于曉麗
(遼寧省丹東市傳染病醫(yī)院 檢驗(yàn)科,遼寧 丹東 118002)
乙型肝炎病毒學(xué)和免疫學(xué)與臨床特征相關(guān)性的前瞻性研究
于曉麗
(遼寧省丹東市傳染病醫(yī)院 檢驗(yàn)科,遼寧 丹東 118002)
目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(HBV-LC)、原發(fā)性肝癌患者血清中的乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)和乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸(HBV DNA)定量分布特點(diǎn),以及二者之間相關(guān)性,為乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)在病程不同階段的診斷和干預(yù)治療提供臨床依據(jù)。方法 采集2014年7月至2015年7月,在丹東市傳染病醫(yī)院住院的慢性乙型肝炎(CHB)150例、肝硬化(LC)100例、肝癌患者50例,采用微粒子化學(xué)發(fā)光定量動態(tài)檢測HBsAg水平,熒光PCR定量動態(tài)檢測HBVDNA載量,并對HBVDNA水平及HBsAg進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果 HBsAg定量值大?。郝砸倚透窝祝靖斡不靖伟珻HB中檢測值最高,其次為肝硬化,肝癌組檢測值最低,且P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;HBVDNA定量和HBsAg呈現(xiàn)相同的規(guī)律,即慢性乙型肝炎>肝硬化>肝癌且P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 ①HBsAg定量值和HBVDNA定量值一樣在慢性乙型肝炎疾病進(jìn)展中呈逐漸下降漸下降趨勢。②HBsAg與HBVDNA之間呈一定的正相關(guān),可以使用HBsAg與HBVDNA互補(bǔ)評估HBV病毒復(fù)制情況。
乙型肝炎表面抗原;乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸;慢性乙型肝炎;肝硬化;原發(fā)性肝癌;乙型肝炎病毒
乙型肝炎病毒是具有高度的傳染性,全球約有20億人感染乙型肝炎病毒,近1/4的病毒患者最終死于肝癌或肝硬化[1]。慢性乙型肝炎已成為嚴(yán)重的臨床和公共衛(wèi)生問題。乙型肝炎造成的社會公共衛(wèi)生問題正在逐年上升。本研究通過定量檢測CHB、肝硬化和肝癌患者血清中HBsAg和HBVDNA的水平,分析HBsAg和HBVDNA在乙型肝炎疾病進(jìn)展過程中的分布特點(diǎn),尋找判斷HBV相關(guān)性疾病的病情程度及治療療效更可靠的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
1.1 一般資料:選擇2014年7月至2015年7月在丹東市傳染病醫(yī)院住院的為CHB的患者150例,和LC患者100例,肝癌患者50例,其中:患者年齡分布在33~72歲,年齡以50~59歲為多見,平均年齡為(57.34± 14.23)歲,本次研究所調(diào)查的患者病例均符合《慢性乙型肝炎病毒感染防治指南》[2],肝癌患者符合原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2011年版)。排除標(biāo)準(zhǔn):排除甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染及合并酒精性、藥物性、自身免疫性或代謝性肝病。
1.2 方法:HBsAg定量檢測使用雅培i2000全自動微粒子化學(xué)發(fā)光分析儀及配套專用試劑。HBVDNA使用廈門安普利全自動核酸提取儀及PCR擴(kuò)增儀,用使用安普利專用配套試劑。
1.3 參考標(biāo)準(zhǔn):HBsAg陽性參考范圍≥0.05 IU/mL,高于檢測上限(250 IU/mL)的樣本用雅培專用HBsAg稀釋液稀釋500倍后再檢測;HBVDNA檢測下限為1.0×103拷貝/mL。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析符合正分布的數(shù)據(jù),采用(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示。不符合正態(tài)分布以中位數(shù)和分位數(shù)間距[M(QR)]表示;兩兩組比較采用t檢驗(yàn),相關(guān)性檢驗(yàn)采用Spearman's分析,若P<0.05則視為有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
2.1 患者的分組情況及各組患者的一般資料:慢性乙型肝炎患者150例,男性82例,女性68例。平均年齡在(45.44±11.4)歲。HBVDNA定量為5.04 copies/mL,HBsAG定量為5301.0 IU/mL。
肝硬化患者100例,男性52例,女性48例。平均年齡在(45.20± 10.14)歲。HBV-DNA定量為4.11 copies/mL,HBsAG定量為1138.4 IU/mL。
肝癌患者50例,男性30例,女性20例。平均年齡在(52.01 ±9.98)歲。HBV-DNA定量為1.52 copies/mL,HBsAG定量為601.4 IU/mL。
2.2 HBsAg定量值在CHB、肝硬化、原發(fā)性肝癌中的分布:慢性乙型肝炎組、肝硬化組、肝癌組患者血清HBsAg定量值分布不同,分別是:5301.0(70.5~18735.3)IU/mL、2138.4(14.52~2471.7) IU/mL、989.4(49.0~1175.2)IU/mL,CHB中檢測值最高,其次為肝硬化,肝癌組檢測值最低,呈現(xiàn)逐漸下降趨勢。
2.3 三組患者HBV DNA對數(shù)值的變化分布:在慢性乙型肝炎組、肝硬化組、肝癌組患者血清HBV DNA定量值分別是:5.07(4.01~6.91)log10copies/mL、4.11(0.00~5.81)log10copies/mL、(0.00~4.69)log10copies/mL,CHB中檢測值最高,其次為肝硬化,肝癌組檢測值最低,三組中HBV DNA呈逐漸下降趨勢,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其中兩兩比較中慢性乙型肝炎與肝硬化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,肝硬化與肝癌組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但慢性乙型肝炎與肝硬化,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2.4 HBsAg與HBVDNA在CHB、肝硬化、原發(fā)性肝癌三組之間定量值的相關(guān)性分析
可以看出:HBsAg與HBVDNA在CHB中r=0.287,P=0.043;在肝硬化中r=0.316,P=0.003;在肝癌中r=0.449,P=0.001;因此,HBsAg與HBVDNA在CHB、肝硬化、原發(fā)性肝癌三組中均呈正相關(guān)。
亞洲人群普遍對肝炎病毒具有基因水平上的不耐受[3],我國更是典型的乙型肝炎易感地區(qū)。作為乙型肝炎的高發(fā)國家,人們對乙型肝炎的了解卻不是很多。乙型肝炎是由乙型肝炎病毒感染所導(dǎo)致的,并且隨著病情發(fā)展可以導(dǎo)致肝硬化和原發(fā)性肝癌。有研究報(bào)道[4],每年約有100萬人死于HBV感染相關(guān)性疾病,慢性乙型肝炎患者發(fā)展為肝硬化的年發(fā)生率大約為2.3%,嚴(yán)重威脅人類的健康和生命。
乙型肝炎病毒屬于嗜肝病毒科,電鏡下呈現(xiàn)球形,具有雙層蛋白衣殼。常見的病毒顆粒形式有3種,即大球型顆粒,小球型顆粒以及管型顆粒。乙型肝炎病毒的抗原主要是由病毒衣殼外表的表面抗原HBsAg、Pre S1、Pre S2組成。其病毒表面的特異性抗原是參與人體免疫識別的關(guān)鍵媒介。HBV感染可以刺激機(jī)體產(chǎn)生一系列的抗體和免疫細(xì)胞。借由檢測抗體和免疫分子來診斷是否罹患乙型肝炎,是目前主要的檢測手段之一,除此之外,也可以通過檢測轉(zhuǎn)氨酶來判斷乙型肝炎病情。
HBsAg是感染乙型肝炎病毒后,篩查和診斷乙型肝炎疾病的一項(xiàng)重要的實(shí)驗(yàn)指標(biāo),并且在感染乙型肝炎后最先出現(xiàn)的血清標(biāo)志物,作為HBV感染的穩(wěn)定、可靠的血清標(biāo)志物,已有40多年的歷史了。HBsAg是HBV被發(fā)現(xiàn)的第一個蛋白[5],是由混合糖蛋白組成的外膜蛋白,有HBV包膜基因轉(zhuǎn)錄和編碼,在感染HBV的患者血清中,作為感染HBV顆粒的外膜蛋白。HBsAg的合成有兩條途徑:一條途徑是以宿主基因中溶原性的病毒核酸片段為模板,經(jīng)細(xì)胞內(nèi)翻譯后產(chǎn)生;另一條途徑是以具有轉(zhuǎn)錄活性的CCCDNA為模板翻譯后產(chǎn)生。因此;HBsAg常作為HBV感染的標(biāo)志。研究發(fā)現(xiàn)[6],HBsAg清除可降低肝硬化及HCC的發(fā)生率。
HBV-DNA(乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸)位于HBV核心內(nèi),其絕對數(shù)量的多少直接顯示了病毒繁殖速率的大小,這被認(rèn)為是評價(jià)HBV的金標(biāo)準(zhǔn)[7]。但由于DNA檢測技術(shù)要求嚴(yán)格,準(zhǔn)確率沒有保證,檢測下限不盡如人意,因此尋找一種能取代舊方法而又穩(wěn)定標(biāo)志物,對評估HBV患者病情有著重大意義。
那么,HBsAg的水平在慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌進(jìn)展中是如變化的,以及HBsAg與DNA的關(guān)系,值得我們進(jìn)行研究。本研究結(jié)果顯示:HBsAg定量檢測在CHB中檢測值最高,其次為肝硬化,肝癌組檢測值最低,呈現(xiàn)逐漸下降趨勢。HBVDNA也呈現(xiàn)相同的規(guī)律,即隨乙型肝炎疾病進(jìn)展呈現(xiàn)逐漸下降趨勢。HBsAg與HBVDNA在CHB、肝硬化、原發(fā)性肝癌三組中均呈正相關(guān)。分析原因可能為:HBV侵入機(jī)體,機(jī)體產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答,從而引起肝細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷。HBV感染的時(shí)間越長,免疫應(yīng)答就越持久,肝細(xì)胞破會的就越嚴(yán)重,結(jié)果造成肝細(xì)胞廣泛的壞死,進(jìn)而導(dǎo)致依賴于肝細(xì)胞產(chǎn)生的HBsAg合成和分泌減少,依賴于肝細(xì)胞產(chǎn)生的HBV病毒的復(fù)制減少。
HBsAg水平下降則是機(jī)體啟動調(diào)節(jié)并逐漸清除HBV的表現(xiàn)[8]。HBVDNA載量下降是評價(jià)抗病毒有效的指標(biāo)之一,通過動態(tài)監(jiān)測二者的變化,可有效預(yù)測抗病毒的療效,判定個體化應(yīng)答治療策略,以指導(dǎo)調(diào)整抗病毒治療方案,提高療效,警惕發(fā)展為肝硬化和(或)肝癌。
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R512.6+2
B
1671-8194(2017)06-0097-02