淺談亞熱帶地區(qū)家蠶核型多角體病毒病的防治方法

羅 平

(1來(lái)賓市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，廣西來(lái)賓 546100； 2華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，廣東廣州 510642)

淺談亞熱帶地區(qū)家蠶核型多角體病毒病的防治方法

羅 平1，2

(1來(lái)賓市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，廣西來(lái)賓 546100；2華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，廣東廣州 510642)

從家蠶品種選用、消毒防病新經(jīng)驗(yàn)、新藥物、飼養(yǎng)新技術(shù)等方面，對(duì)亞熱帶地區(qū)家蠶核型多角體病毒(BmNPV)病的防治方法做了簡(jiǎn)要論述。在亞熱帶地區(qū)，為了控制BmNPV病的危害,可在不同氣候條件下選用不同的抗性品種(如選用華康2號(hào)或桂蠶N2等抗BmNPV病家蠶品種)的同時(shí)，加強(qiáng)消毒防控措施及重視對(duì)其它病害的防控。另外，配套應(yīng)用負(fù)壓式水簾空調(diào)控溫控濕機(jī)飼養(yǎng)小蠶，應(yīng)用正壓式水簾空調(diào)控溫控濕機(jī)飼養(yǎng)大蠶等新的飼養(yǎng)技術(shù)，改善家蠶的飼養(yǎng)環(huán)境，精心飼養(yǎng)，提高家蠶體質(zhì)，可以減少家蠶的發(fā)病率，降低BmNPV病的危害。

亞熱帶地區(qū)；高溫多濕；家蠶；BmNPV；核型多角體病毒??；抗逆性

2016年我國(guó)桑園面積已經(jīng)達(dá)到79.3萬(wàn) hm2，蠶種飼養(yǎng)量已達(dá)1 564萬(wàn)盒(張)，全國(guó)鮮繭產(chǎn)量達(dá)到62萬(wàn)t[1]。蠶業(yè)生產(chǎn)中因蠶病影響而造成的損失約占20%[2]。其中，家蠶核型多角體病毒(又稱家蠶血液型膿病病毒，BmNPV)病是傳染性和致病性很強(qiáng)的蠶病之一，該病傳染性強(qiáng)，目前家蠶一旦患上BmNPV病，沒(méi)有特效藥可以治療。據(jù)我們調(diào)查，在亞熱帶地區(qū)高溫多濕的氣候條件下極易大面積暴發(fā)，有時(shí)部分農(nóng)戶或一定養(yǎng)蠶區(qū)域內(nèi)甚至出現(xiàn)由于該病危害而造成絕產(chǎn)的現(xiàn)象。因此，做好BmNPV病的防控，確保蠶桑產(chǎn)業(yè)穩(wěn)定發(fā)展，促進(jìn)蠶業(yè)增收，具有重要意義。

1912年德國(guó)VON PROWARZEK首先用實(shí)驗(yàn)證明了BmNPV病是過(guò)濾性病毒侵染家蠶引起的[3]，其后，日本和我國(guó)的學(xué)者對(duì)該病的病原、侵染規(guī)律、抵抗性作了深入的研究，現(xiàn)已查明至少有8種野外昆蟲的核型多角體病毒(NPV)能感染家蠶，使家蠶發(fā)生BmNPV病[3]。養(yǎng)蠶生產(chǎn)中病害防控的方法是“良種”+“良法”，即選擇抗性優(yōu)良的家蠶品種和科學(xué)規(guī)范的飼養(yǎng)方法。本文從抗性品種選用、消毒防病、新技術(shù)應(yīng)用等方面對(duì)BmNPV病的防控措施進(jìn)行總結(jié)，供同仁參考。

1 抗性品種的選育應(yīng)用

家蠶的抗性包括抗病性和抗逆性?？共⌒允侵讣倚Q對(duì)病原微生物的抵抗性，抗逆性是指家蠶對(duì)養(yǎng)蠶惡劣環(huán)境的抵抗性。家蠶的抗性與品種有關(guān)，不同家蠶品種對(duì)不同病原微生物和環(huán)境因子(化學(xué)和物理等)的抗性存在明顯的差距，2種抗性間也存在密切的關(guān)系[4]。

1.1 抗BmNPV病蠶品種的選育應(yīng)用

陳克平等[5]研究發(fā)現(xiàn)，家蠶品種間對(duì)BmNPV病抗性有差異。姚勤等[6]利用特征序列特異擴(kuò)增區(qū)域(sequence characterized amplified region，SCAR)標(biāo)記技術(shù)開展了BmNPV病新輔助育種選擇，獲得了家蠶抗BmNPV病品種抗NPV-1。費(fèi)美華等[7]開展了抗BmNPV感染蠶品種的選育試驗(yàn)獲得抗性較穩(wěn)定、經(jīng)濟(jì)性狀較好的NVR、CVDAR(CDR)等系統(tǒng)。近10年來(lái)，經(jīng)過(guò)蠶業(yè)科技工作者堅(jiān)持不懈地攻關(guān)，終于選育出了不同的家蠶抗BmNPV病品種。如中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所徐安英等[8-10]選育出了華康2號(hào)、華康3號(hào)，廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)科學(xué)研究院石美寧等[11]選育出了桂蠶N2等家蠶抗BmNPV病新品種。

家蠶抗BmNPV病新品種華康2號(hào)在全國(guó)各蠶區(qū)試養(yǎng)試驗(yàn)[12-20]顯示，華康2號(hào)具有很強(qiáng)的抗BmNPV病性能和地方適應(yīng)性，公斤繭顆數(shù)少，繭層率高，綜合性狀優(yōu)于國(guó)內(nèi)其它蠶品種，并在廣西壯族自治區(qū)通過(guò)了審定。然而，華康2號(hào)在亞熱帶地區(qū)高溫多濕環(huán)境下飼養(yǎng)，還存在一些抗逆性稍差的問(wèn)題，如容易受細(xì)菌的危害發(fā)生細(xì)菌病[19]，結(jié)繭率和死籠率比廣西的當(dāng)家蠶品種兩廣二號(hào)略低[19]等瑕疵，但該品種對(duì)BmNPV病的抗性明顯強(qiáng)于兩廣二號(hào)等蠶品種，仍值得在BmNPV病危害嚴(yán)重的亞熱帶蠶區(qū)大力推廣應(yīng)用。2015年7至11月，在長(zhǎng)期高溫陰雨極端氣候條件下，我們?cè)趶V西忻城縣、興賓區(qū)、象州縣、柳城縣和鹿寨縣等地農(nóng)村推廣試養(yǎng)了華康2號(hào)，調(diào)查結(jié)果顯示華康2號(hào)對(duì)BmNPV病表現(xiàn)出較高的抗性[19-21]。

1.2 抗病抗逆兼用品種的選育應(yīng)用

廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)科學(xué)研究院根據(jù)廣西熱帶和亞熱帶地區(qū)高溫多濕的氣候條件，于2009年4月選育出抗高溫多濕且對(duì)BmNPV病抵抗力強(qiáng)、強(qiáng)健好養(yǎng)的四元雜交品種桂蠶N2[NC99R·NC9C×NJ·NJZ(中·中×日·日)][22]，經(jīng)過(guò)在全國(guó)各地飼養(yǎng)試驗(yàn)[23-24]，桂蠶N2對(duì)BmNPV的食下、創(chuàng)傷感染均具有很強(qiáng)的抵抗力[25]。目前，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所根據(jù)熱帶和亞熱帶地區(qū)高溫多濕的氣候條件，已經(jīng)成功育成抗BmNPV和抗氟化物的春用蠶品種華康3號(hào)，除了在江西省農(nóng)村試驗(yàn)表現(xiàn)出在比較惡劣的飼養(yǎng)環(huán)境中有較強(qiáng)的抗BmNPV和抗氟化物的特性外[10]，在亞熱帶地區(qū)還未見飼養(yǎng)報(bào)道，該品種還在試驗(yàn)觀察階段。

2 消毒防病

雖然在家蠶抗BmNPV病蠶品種的選育上，有了新的突破。但是，目前生產(chǎn)應(yīng)用上，尚未選育出兼顧高抗BmNPV病、高抗逆性、豐產(chǎn)的家蠶品種。因?yàn)?，家蠶的BmNPV病不會(huì)引起胚種傳染[26]，BmNPV病的發(fā)生必然是由于環(huán)境中存在BmNPV病原誘發(fā)引起的。因此，在惡劣的環(huán)境下，需要加強(qiáng)消毒防病工作，以殺滅病原，切斷病毒病的傳播途徑。

2.1 消毒防病常規(guī)方法

常規(guī)的消毒方法，在養(yǎng)蠶前、中、后，靈活使用消毒藥劑(常用的有漂白粉、新鮮石灰粉、強(qiáng)氯精、福爾馬林等)進(jìn)行消毒。并且對(duì)蠶室周邊環(huán)境進(jìn)行清理、消毒。

養(yǎng)蠶前的消毒：通常采用“三消一洗”的方法，即先用含1%有效氯的漂白粉溶液進(jìn)行消毒(一消)，有條件的可將蠶具在水泥地板上暴曬，再用干凈的水清洗、然后再用含1%有效氯的漂白粉溶液消毒1次(二消)。為防止“一消”和“二消”的消毒效果不徹底，最后再用2%的新鮮石灰水進(jìn)行消毒(三消)以確保徹底殺滅各種家蠶傳染病病原體。在蠶病易發(fā)的季節(jié)，如條件許可在藥液噴灑消毒的基礎(chǔ)上，可對(duì)蠶室、蠶具用熏煙劑消毒1次。

蠶期中的消毒：定期、不定期地對(duì)蠶室、貯桑室、桑葉及蠶室用具進(jìn)行消毒，保持蠶室、貯桑室、桑葉及蠶室用具的清潔衛(wèi)生。做好家蠶眠前、眠中、眠起處理，選用對(duì)病毒有效的蠶體蠶座消毒劑{如新鮮石灰粉、防病1號(hào)[通用名為聚甲醛粉(蠶用)]或漂白粉石灰粉混合制劑[漂白粉與新鮮石灰粉按1∶10混合]等}進(jìn)行蠶體蠶座消毒。講究蠶室衛(wèi)生，防止二次傳染，蠶糞、病死蠶、爛繭等要集中統(tǒng)一消毒處理或堆制成堆肥待充分腐熟后使用，嚴(yán)禁隨意丟棄污染環(huán)境。

養(yǎng)蠶結(jié)束后的消毒：養(yǎng)蠶上蔟完畢后，要移走蠶沙，蠶沙統(tǒng)一堆肥進(jìn)行無(wú)害化處理，蠶室、蠶具進(jìn)行“三消一洗”，并暴曬蠶具。其中在“一消”后，蠶室、貯桑室地面要用清水反復(fù)沖洗，刷凈蠶具、蔟具上的浮絲、廢絲、污漬、病死蠶等，再進(jìn)行徹底消毒。

2.2 消毒防病新方法

2.2.1 化學(xué)藥劑消毒 新型的消毒劑有二溴殺菌劑[如二溴海因藥液、魯煙Ι號(hào)(含二溴海因的熏煙消毒劑)]、XD-A(漂粉精和月芐三甲氯銨混合劑)、氯溴異氰尿酸及其復(fù)配藥液等。

二溴海因(DBDMH)是目前國(guó)際上公認(rèn)的殺菌力較強(qiáng)的新一代氧化綠色環(huán)保的廣譜消毒劑。李云芝等[27]試驗(yàn)證明，二溴海因與碳酸鈉混合液對(duì)家蠶常見的主要病原體都有很好的殺滅效果。使用0.5 g/L二溴海因和5 g/L碳酸鈉的混合液，對(duì)BmNPV和家蠶質(zhì)型多角體病毒(BmCPV)的消毒效果達(dá)到100%，并且對(duì)白僵菌、黃曲霉菌有相同的消毒效果。魯煙Ι號(hào)是二溴海因加上一定比例的鋸末配制而成的熏煙劑，養(yǎng)蠶前后按蠶室空間用3 g/m3魯煙Ι號(hào)對(duì)蠶室蠶具熏煙消毒30 min，可以殺滅家蠶的主要病原菌[28]。

XD-A是山東農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院蠶業(yè)研究所研制的一種蠶用環(huán)境消毒劑，該消毒劑以漂粉精為主劑，添加月芐三甲氯銨等輔劑，以合適的比例復(fù)配制成[29]。用含0.1%有效氯的XD-A溶液消毒10 min可殺滅家蠶核型多角體病毒多角體(BmNPB)和家蠶質(zhì)型多角體病毒多角體(BmCPB)，用含0.3%有效氯的XD-A溶液消毒15 min可徹底殺滅真菌類病原。在實(shí)際生產(chǎn)消毒中用含0.3%有效氯的XD-A溶液消毒15 min即可全部殺滅病毒病和真菌病的病原物,殺滅效果優(yōu)于漂粉精和消特靈。同時(shí)，XD-A也可以用于桑葉的葉面消毒，添食含有效氯0.3%以下的XD-A消毒液浸漬處理的桑葉對(duì)家蠶生理及繭質(zhì)無(wú)不良影響[29]。

氯溴異氰尿酸溶液噴灑消毒時(shí)，可慢慢地釋放次溴酸(HOBr)和次氯酸(HOCl)，次溴酸的活性是次氯酸的4倍，對(duì)細(xì)菌、真菌、病毒都有強(qiáng)烈的殺滅作用，但其溶液呈酸性，而家蠶多角體病毒的多角體蛋白是堿溶性蛋白，因而需要在氯溴異氰尿酸溶液中添加碳酸鈉或者磷酸三鈉，使溶液呈堿性溶解多角體蛋白提高對(duì)家蠶病毒多角體的消毒效果。李云芝等[30]試驗(yàn)研究表明，氯溴異氰尿酸溶液中添加磷酸三鈉的復(fù)配液穩(wěn)定性優(yōu)于添加碳酸鈉的復(fù)配液；實(shí)際生產(chǎn)中配制成0.125 g/L及以上濃度的氯溴異氰尿酸溶液和10 g/L磷酸三鈉混合液使用，具體配制方法是先將氯溴異氰尿酸配制成目的濃度的消毒溶液，然后于消毒前加入所需的磷酸三鈉制成混合液使用。

2.2.2 臭氧(O3)消毒 臭氧是氧氣(O2)的同素異形體，在18～30 ℃下，臭氧迅速分解為氧氣和氧原子[31]，其中氧原子呈游離狀態(tài)，化學(xué)性質(zhì)活潑，具有較強(qiáng)的氧化分解力和良好的消毒殺菌效果；臭氧可破壞或分解細(xì)菌的細(xì)胞壁，迅速擴(kuò)散侵入細(xì)胞內(nèi)，氧化破壞細(xì)胞內(nèi)的酶，使之失去生存能力[32-34]；對(duì)病毒來(lái)說(shuō)，臭氧可破壞病毒的多肽鏈，導(dǎo)致病毒RNA受損壞，如與氨基酸殘基(色氨酸、蛋氨酸和半胱氨酸)發(fā)生反應(yīng)而直接破壞病毒蛋白質(zhì)[31]。利用新生臭氧進(jìn)行消毒是目前最安全環(huán)保的消毒方法。臭氧在消毒過(guò)程中很快降解，其產(chǎn)物是氧氣，與化學(xué)藥劑消毒方法相比，臭氧消毒是沒(méi)有有害物質(zhì)殘留、沒(méi)有二次污染、安全環(huán)保的消毒方法。王建芳等[34]研究表明，高濃度的臭氧對(duì)BmNPV、白僵菌分生孢子和微粒子孢子都具有很好的殺滅效果，且能使附著在蠶體上的黃曲霉菌感染力下降40%左右。黃深惠等[31]研究證明，臭氧消毒關(guān)鍵在于使用的濃度和作用方式，只有在10 g/h的較高產(chǎn)氣量作用，并且形成氣流的條件下，才能達(dá)到徹底殺滅環(huán)境中的家蠶病原體的效果。

生產(chǎn)上應(yīng)用的臭氧是由臭氧發(fā)生器產(chǎn)生的，臭氧發(fā)生器一般為蠶用高濃度臭氧發(fā)生器，消毒時(shí)應(yīng)在蠶室上、中、下層都要設(shè)有臭氧釋放口，使蠶室上、中、下各層空間保持穩(wěn)定的臭氧濃度，才可達(dá)到最佳的消毒效果。

3 養(yǎng)蠶新技術(shù)

家蠶飼養(yǎng)過(guò)程中，桑葉質(zhì)量、蠶室的溫濕度、空氣質(zhì)量等都會(huì)影響家蠶對(duì)病毒病的抵抗力。江忠康[35]研究表明，桑葉的質(zhì)量會(huì)影響家蠶的體質(zhì)，喂適熟葉的大蠶對(duì)病毒病的抵抗力比喂老葉的強(qiáng)，而喂嫩葉和貯藏葉的大蠶抵抗力最差；家蠶在低于5 ℃或高于40 ℃的極端溫度條件下放置6～48 h，再回到25 ℃的正常溫度下飼養(yǎng)，就會(huì)大量發(fā)生BmNPV病，4～5齡大蠶受高、低溫沖擊，發(fā)病率增高[35]。另外，化學(xué)物質(zhì)刺激、通風(fēng)不良、生理障礙和一些微生物的影響都會(huì)導(dǎo)致家蠶抵抗力下降，誘發(fā)BmNPV病。因此，加強(qiáng)桑園病蟲害防治，提高桑葉質(zhì)量，加強(qiáng)家蠶飼養(yǎng)管理，改善蠶室氣候環(huán)境，提高家蠶體質(zhì)，是防治BmNPV病不可忽視的措施。

亞熱帶地區(qū)高溫多濕氣候平均年內(nèi)長(zhǎng)達(dá)5個(gè)月以上，小蠶飼養(yǎng)時(shí)采取負(fù)壓式水簾空調(diào)控溫控濕機(jī)控溫控濕飼養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)降溫補(bǔ)濕，效果良好[36]。我們?cè)趶V西忻城縣引進(jìn)理工環(huán)保節(jié)能機(jī)改裝形成的“正壓式水簾空調(diào)控溫控濕機(jī)”，在農(nóng)村飼養(yǎng)大蠶時(shí)應(yīng)用，將無(wú)對(duì)流的“口袋”式蠶房改變?yōu)橛袑?duì)流的“通透”式蠶房。據(jù)我們調(diào)查，在高溫多濕季節(jié)可以將飼養(yǎng)溫度降低5～6 ℃，飼養(yǎng)相對(duì)濕度控制在大蠶生長(zhǎng)適宜的范圍內(nèi)，并適當(dāng)增加空氣流動(dòng)，保持蠶房空氣新鮮，蠶病明顯減少，BmNPV病平均發(fā)病率比對(duì)照降低7.66個(gè)百分點(diǎn)，平均產(chǎn)繭量比對(duì)照增加19.6%。另外，在家蠶飼養(yǎng)過(guò)程中，添食EM原露和魚肝油[37]，也能增強(qiáng)家蠶體質(zhì)，提高家蠶抗病能力。

4 總結(jié)與展望

綜上所述，在蠶業(yè)生產(chǎn)上要防治BmNPV病，在選用家蠶品種時(shí)，既要考慮所選蠶品種的抗病性，又要兼顧考慮所選蠶品種的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)和抗逆性。亞熱帶地區(qū)，蠶農(nóng)選擇飼養(yǎng)家蠶品種時(shí)，不宜搞“一刀切”，在極端高溫多濕的惡劣條件下，為了保證養(yǎng)蠶成功率，可以選擇飼養(yǎng)桂蠶N2；為了提高養(yǎng)蠶效益，在春、秋季較好的氣候條件下，選擇飼養(yǎng)華康2號(hào)；在高溫多濕的氣候條件下，還是選擇飼養(yǎng)兩廣二號(hào)為好。在合理選擇飼養(yǎng)家蠶品種的同時(shí)，還要做好相關(guān)的消毒防病工作，加強(qiáng)桑園病蟲害防治，應(yīng)用養(yǎng)蠶新技術(shù)，改善養(yǎng)蠶環(huán)境，增強(qiáng)家蠶體質(zhì)，提高家蠶抗病能力，促進(jìn)蠶桑產(chǎn)業(yè)穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)。

在實(shí)際生產(chǎn)中，要想取得穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)，除了加強(qiáng)BmNPV病的防控外，還要加強(qiáng)家蠶其它病毒病和真菌病、細(xì)菌病、微粒子病等傳染性病害的防控。培育抗性強(qiáng)且綜合性狀優(yōu)良的家蠶新品種是目前家蠶防病的最重要課題。近年來(lái)，隨著基因組學(xué)[2]和生物技術(shù)的快速發(fā)展，通過(guò)基因組編輯(如CRISPR/ Cas 9)和顯微注射轉(zhuǎn)基因技術(shù)，獲得新的育種素材和品種，提高了家蠶抗性品種選育研究的水平和效率，未來(lái)的家蠶病害防控將以培育抗病性、抗逆性強(qiáng)的家蠶品種取代化學(xué)藥劑消毒，成為最經(jīng)濟(jì)、環(huán)保、有效的疾病防控措施。

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·信息、廣告索引·

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所附屬蠶藥廠

(封面)

陜西省安康市蠶種場(chǎng)

(封二)

云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所

(封三)

江蘇生久農(nóng)化有限公司

(封底)

四川省南充蠶具研究有限公司

(彩插1)

西昌市蠶種場(chǎng)

(彩插2)

湖州寶成蠶業(yè)用品有限公司

(彩插3)

涼山彝族自治州蠶種場(chǎng)

(彩插4)

四川南充上智農(nóng)業(yè)機(jī)械設(shè)備有限公司

(彩插5)

杭州市蠶桑技術(shù)推廣總站

(彩插6)

江蘇省東臺(tái)市騰飛塑料制品廠

(黑插1)

中國(guó)蠶業(yè)稿約

(黑插2)

計(jì)量單位

(P39)

《蠶業(yè)科學(xué)》征訂啟事

(P47)

參考文獻(xiàn)著錄方法與格式

(P79)

南京柯林表面處理材料銷售有限公司

(P80)

2017-05-24;接受日期：2017-06-26

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(編號(hào) CARS-22)；來(lái)賓市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)項(xiàng)目(編號(hào) 來(lái)科產(chǎn)162918)。

信息：羅平(1974—)，男，廣西來(lái)賓，碩士，高級(jí)農(nóng)藝師，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)“西部之光”訪問(wèn)學(xué)者。 Tel：0772-6681229，E-mail:xcluoping@126.com

S884.1

B

1007-0982(2017)03-0059-05