EDP患者的血小板聚集計(jì)數(shù)分析

荊 敏，王潤(rùn)琴，曾 光

(陽(yáng)泉煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院，山西 陽(yáng)泉 045000)

EDP患者的血小板聚集計(jì)數(shù)分析

荊 敏，王潤(rùn)琴，曾 光

(陽(yáng)泉煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院，山西 陽(yáng)泉 045000)

目的：探討血小板聚集計(jì)數(shù)用于實(shí)驗(yàn)室判斷EDTA依賴性假性血小板減少癥(EDP)的應(yīng)用價(jià)值。方法：回顧性分析46例EDP患者血小板聚集計(jì)數(shù)，并與同期46例真性血小板減少患者及46例健康體檢者進(jìn)行比較并作推片鏡檢復(fù)核；其中18例同時(shí)與枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本及未抗凝全血即刻檢測(cè)之血小板聚集計(jì)數(shù)比較分析并作推片鏡檢復(fù)核。結(jié)果：EDP患者血小板聚集計(jì)數(shù)為(767±128)×109/L，推片鏡檢血小板聚集成團(tuán)、成簇分布，與真性血小板減少患者的(87±16)×109/L、健康體檢者的(76±10)×109/L比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，且推片鏡檢后兩者血小板均未發(fā)生聚集，均呈散在均勻分布；18例EDP患者血小板聚集計(jì)數(shù)為(781±132)×109/L，推片鏡檢血小板聚集成團(tuán)、成簇分布，與枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本的(82±15)×109/L、未抗凝全血即刻檢測(cè)的(71±10)×109/L比較顯著增加(P<0.05)，且推片鏡檢后兩者血小板均未發(fā)生聚集，均呈散在均勻分布。結(jié)論：血小板聚集計(jì)數(shù)可作為實(shí)驗(yàn)室初步判斷EDP的依據(jù)。

EDP；血小板聚集；血小板聚集計(jì)數(shù)

近年來(lái)，由于多種原因誘導(dǎo)血小板聚集而致血小板計(jì)數(shù)假性減少(PTCP )的現(xiàn)象日益增加。其中90%以上為ICSH認(rèn)可的血細(xì)胞分析首選抗凝劑EDTA[1]誘導(dǎo)的PTCP，被稱為EDTA依賴性假性血小板減少癥(EDTA-PTCP )，即EDP[2]。

此類標(biāo)本血小板發(fā)生聚集，聚集體體積處于血細(xì)胞分析儀血小板計(jì)數(shù)閾值之外，血細(xì)胞分析儀無(wú)法準(zhǔn)確識(shí)別為血小板，將聚集的血小板排除在血小板計(jì)數(shù)范圍之外，致血小板計(jì)數(shù)假性減少。日常工作中，實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員仍舊采用傳統(tǒng)手工法推片染色鏡檢血小板分布情況，根據(jù)血小板是否聚集分布來(lái)鑒別真假性血小板減少。然而，實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀已具備識(shí)別血小板聚集體的能力并提供血小板聚集(PLT-Clumbs)報(bào)警信息及血小板聚集計(jì)數(shù)，可以輔助鑒別真假性血小板減少。本研究回顧性分析實(shí)驗(yàn)室半年多來(lái)發(fā)現(xiàn)的46例EDP患者血細(xì)胞分析儀檢測(cè)之血小板聚集計(jì)數(shù)，以探討血小板聚集計(jì)數(shù)用于實(shí)驗(yàn)室初步判斷EDP的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本實(shí)驗(yàn)室2016年1～7月發(fā)現(xiàn)的46例EDP患者。46例患者EDTA抗凝標(biāo)本經(jīng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)首次并二次復(fù)查血小板計(jì)數(shù)偏低，報(bào)警提示“PLT-Clumbs”，且推片染色顯微鏡檢發(fā)現(xiàn)血小板成簇聚集，經(jīng)臨床確認(rèn)無(wú)出血傾向，實(shí)驗(yàn)室檢查標(biāo)本狀態(tài)正常，排除采血不順暢等因素后確定為EDP[3]。其中男25例，女21例，年齡0～72歲，平均(35.59±7.96)歲。選取同期46例真性血小板減少患者及46例健康體檢者作對(duì)照。真性血小板減少患者男24例，女22例，年齡0～70歲，平均(36.82±7.35)歲。健康體檢者男23例，女23例，年齡0～82歲，平均(40.82±8.35)歲。各組的性別、年齡構(gòu)成比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 儀器與試劑

德國(guó)SIEMENS生產(chǎn)的ADVIA 2120i血細(xì)胞分析儀及其配套推片機(jī)組合的全自動(dòng)血細(xì)胞分析流水線及其原裝試劑、質(zhì)控品和染液，日本Olympus顯微鏡。

1.3 方法

EDP患者、真性血小板減少患者及健康體檢者各46例EDTA抗凝標(biāo)本均使用ADVIA 2120i全自動(dòng)血細(xì)胞分析流水線檢測(cè)并設(shè)置推片機(jī)全部自動(dòng)推片染色，記錄血小板計(jì)數(shù)、血小板聚集計(jì)數(shù)及 “PLT-Clumbs”報(bào)警提示，同時(shí)顯微鏡檢觀察血小板分布情況。

同時(shí)對(duì)46例EDP患者中18例枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本使用ADVIA 2120i全自動(dòng)血細(xì)胞分析流水線檢測(cè)并設(shè)置推片機(jī)全部自動(dòng)推片染色，記錄血小板計(jì)數(shù)、血小板聚集計(jì)數(shù)及 “PLT-Clumbs”報(bào)警提示，同時(shí)顯微鏡檢觀察血小板分布情況。

同步對(duì)上述18例EDP患者儀器旁采集未抗凝靜脈血即刻使用ADVIA 2120i全自動(dòng)血細(xì)胞分析檢測(cè)并手工推片染色，記錄血小板計(jì)數(shù)、血小板聚集計(jì)數(shù)及 “PLT-Clumbs”報(bào)警提示，同時(shí)顯微鏡檢觀察血小板分布情況。

每份標(biāo)本平行測(cè)定兩次，兩次結(jié)果取均值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 各組PLT、PLT-CLM計(jì)數(shù)、PLT-Clumbs報(bào)警及血小板分布比較(表1)

真性血小板減少患者血小板聚集計(jì)數(shù)為(87±16)×109/L，與健康體檢者的(76±10)×109/L比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，且血細(xì)胞分析儀檢測(cè)兩者均未報(bào)警提示“PLT-Clumbs”，推片鏡檢兩者血小板均未發(fā)生聚集，均呈散在均勻分布。

EDP患者血小板聚集計(jì)數(shù)為(767±128)×109/L，血細(xì)胞分析儀檢測(cè)報(bào)警提示“PLT-Clumbs”，推片鏡檢血小板聚集成團(tuán)、成簇分布，真性血小板減少患者的(87±16)×109/L與健康體檢者的(76±10)×109/L比較，顯著增加(P<0.05)。

表1 各組PLT、PLT-CLM及血小板分布比較

注：PLT-CLM計(jì)數(shù)：B與A比較，t=-1.27，P>0.05；C與A比較，t=-6.27，P<0.05；C與B比較，t=-6.07，P<0.05。(A：健康體檢組，B：真性血小板減少組，C：EDP組)

2.2 EDP患者各類標(biāo)本PLT、PLT-CLM計(jì)數(shù)、PLT-Clumbs報(bào)警及血小板分布比較(表2)

EDP患者EDTA抗凝標(biāo)本血小板聚集計(jì)數(shù)為(781±132)×109/L，血細(xì)胞分析儀檢測(cè)報(bào)警提示“PLT-Clumbs”，推片鏡檢血小板聚集成團(tuán)、成簇分布，與枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本的(82±15)×109/L、未抗凝全血即刻檢測(cè)的(71±10)×109/L比較顯著增加(P<0.05)，且血細(xì)胞分析儀檢測(cè)后兩者均未報(bào)警提示“PLT-Clumbs”，推片鏡檢后兩者血小板均未發(fā)生聚集，均呈散在均勻分布。

EDP患者枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本血小板聚集計(jì)數(shù)的(82±15)×109/L與未抗凝全血即刻檢測(cè)的(71±10)×109/L比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表2 EDP患者各類標(biāo)本PLT、PLT-CLM及血小板分布比較±s)

注： PLT-CLM計(jì)數(shù)：A與B比較，t=-6.01，P<0.05；A與C比較，t=-6.19，P<0.05；B與C比較，t=-1.21，P>0.05。(A：EDTA抗凝組，B：枸櫞酸鈉抗凝組，C：未抗凝即刻檢測(cè)組)

3 討論

1975年Mant即已提出血小板聚集可致血小板假性減少(PTCP )[4]。引起血小板聚集的原因很多，近來(lái)報(bào)道的PTCP病例EDP占絕大多數(shù)。目前其他血液與血栓學(xué)相關(guān)研究提示EDP無(wú)出血及血栓性疾病的可能[5]，尚屬良性病程，無(wú)臨床意義。但EDP容易誤導(dǎo)臨床對(duì)此類患者實(shí)施過度檢查及無(wú)效治療，甚至不得不對(duì)正在接受溶栓治療的患者停用抗凝藥物。于此，鑒別真假性血小板減少要求實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)人員高度重視。

隨著臨床全血細(xì)胞分析標(biāo)本大批量的增加，傳統(tǒng)手工法推片染色鏡檢血小板聚集情況因耗時(shí)長(zhǎng)、人為因素干擾大等特點(diǎn)影響到工作效率。目前，大部分實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀已可以識(shí)別血小板聚集體，雖然無(wú)法將聚集的血小板準(zhǔn)確識(shí)別為血小板，但可以提供血小板聚集報(bào)警信息及血小板聚集計(jì)數(shù)，用以輔助鑒別真假性血小板減少；配套推片機(jī)自動(dòng)推片染色，不僅節(jié)省人力，而且推片染色質(zhì)量高。對(duì)于血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)降低的標(biāo)本，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)人員可以根據(jù)血細(xì)胞分析儀提示的血小板聚集報(bào)警、血小板聚集計(jì)數(shù)，對(duì)配套推片機(jī)自動(dòng)制作的血涂片采取人工復(fù)核血小板分布情況等相應(yīng)措施來(lái)快速識(shí)別EDP，從而鑒別真正的血小板減少。

本研究對(duì)實(shí)驗(yàn)室半年多來(lái)發(fā)現(xiàn)的46例EDTA誘導(dǎo)血小板聚集導(dǎo)致血小板假性減少患者之血小板計(jì)數(shù)、血小板聚集計(jì)數(shù)、PLT-Clumbs報(bào)警、推片鏡檢血小板分布情況進(jìn)行回顧性分析，并與同期46例真性血小板減少患者及46例健康體檢者進(jìn)行比較。EDP患者血小板聚集計(jì)數(shù)為(767±128)×109/L，血細(xì)胞分析儀檢測(cè)報(bào)警提示“PLT-Clumbs”，推片鏡檢血小板聚集成團(tuán)、成簇分布，與真性血小板減少患者的(87±16)×109/L、健康體檢者的(76±10)×109/L比較，顯著增加(P<0.05)，且血細(xì)胞分析儀檢測(cè)后兩者均未報(bào)警提示“PLT-Clumbs”，推片鏡檢后兩者血小板均未發(fā)生聚集，均呈散在均勻分布。同時(shí)對(duì)其中18例EDP患者EDTA抗凝標(biāo)本與枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本及未抗凝全血即刻檢測(cè)之血小板計(jì)數(shù)、血小板聚集計(jì)數(shù)、PLT-Clumbs報(bào)警、推片鏡檢血小板分布情況比較。EDP患者EDTA抗凝標(biāo)本血小板聚集計(jì)數(shù)為(781±132)×109/L，血細(xì)胞分析儀檢測(cè)報(bào)警提示“PLT-Clumbs”，推片鏡檢血小板聚集成團(tuán)、成簇分布，與枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本的(82±15)×109/L、未抗凝全血即刻檢測(cè)的(71±10)×109/L比較顯著增加(P<0.05)，且血細(xì)胞分析儀檢測(cè)后兩者均未報(bào)警提示“PLT-Clumbs”，推片鏡檢后兩者血小板均未發(fā)生聚集，均呈散在均勻分布。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析可見，EDP患者之EDTA抗凝標(biāo)本經(jīng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血小板聚集計(jì)數(shù)顯著增加，報(bào)警提示“PLT-Clumbs”，推片鏡檢可見血小板聚集成團(tuán)、成簇分布。由此表明，血小板聚集計(jì)數(shù)顯著增加可作為實(shí)驗(yàn)室初步判斷EDP的依據(jù)。與報(bào)道結(jié)合血小板聚集體計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)可幫助檢驗(yàn)技術(shù)人員快速識(shí)別假性血小板減少相一致[6]。

因此建議使用全自動(dòng)血細(xì)胞分析流水線的實(shí)驗(yàn)室，采用國(guó)際血液學(xué)復(fù)檢專家組推薦規(guī)則設(shè)置推片機(jī)自動(dòng)推片，對(duì)于血小板計(jì)數(shù)降低的標(biāo)本，根據(jù)是否提示血小板聚集報(bào)警及血小板聚集計(jì)數(shù)是否顯著增高，對(duì)自動(dòng)推片進(jìn)一步人工鏡檢復(fù)核血小板分布情況來(lái)及早判斷EDP以鑒別真正的血小板減少。

本研究針對(duì)血小板計(jì)數(shù)降低的標(biāo)本進(jìn)行研究，對(duì)于真值較高即使發(fā)生聚集也未降低至正常參考范圍以下的病例尤其是高凝狀態(tài)患者血小板聚集計(jì)數(shù)的應(yīng)用價(jià)值也值得大家進(jìn)一步探討。

[1] 劉成玉，羅春麗.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].5版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2013.

[2] 周小棉，鄒 曉.假性血小板減少癥研究進(jìn)展[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2007,30(9):1065-1067.

[3] 劉惠蘭，黃美群，陳漢紅，等.EDTA-k2 抗凝劑引發(fā)的血小板假性減少原因的探討[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012,33(7):879-880.

[4] 劉曉燕，周玲靈，胡曉蕾.溫度與抗凝劑對(duì)假性血小板減少的影響[J].浙江實(shí)用醫(yī)學(xué)，2015,20(5):369-370.

[5] 馬 力，張 靜，韓志梅，等. EDTA依賴性假性血小板減少癥檢測(cè)方法的探討[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2014,9(24):20-21.

[6] 吳 衛(wèi)，崔 巍，李 薇，等.血小板聚集體計(jì)數(shù)在真性和假性血小板減少鑒別中的應(yīng)用 [J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2009,32(5):557-559.

本文編輯：周文超

荊 敏，女，主管檢驗(yàn)師，從事臨床檢驗(yàn)工作

R446.1

B

1671-0126(2016)05-0021-03