摘 要:文章是利用維生素C對紫外產(chǎn)生吸收和對堿不穩(wěn)定性的性質(zhì),使用紫外分光光度法測定果蔬中維生素C的含量。果蔬中維生素C的濃度含量在1.00-12.00微克/毫升范圍內(nèi)時(shí)能與吸收值呈線性關(guān)系;檢出限為0.014微克每毫升;加標(biāo)回收率在97.9%-99.0%之間。該法操作簡單,應(yīng)用于維生素C含量的測定,結(jié)果也較正確。
關(guān)鍵詞:果蔬維生素C含量;紫外分光光度法;測定
維生素C是一種水溶性維生素,也稱抗壞血酸,并且在蔬菜和水果中含量尤其豐富?;诰S生素C的這一特點(diǎn),課題組成員對果蔬中的維生素C進(jìn)行了研究,期望其研究成果能為果蔬中的維生素C的進(jìn)一步的研究提供依據(jù)。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 樣品溶液的準(zhǔn)備
將蔬菜和水果清洗后擦干,稱量果蔬可以食用的部分100g,將果蔬在搗碎機(jī)中搗碎,再向果蔬中加入100ml浸提劑,將其迅速搗成勻漿。稱取25-55g漿狀的樣品,將其移入100ml容量瓶中,稀釋至刻度并搖勻。當(dāng)果蔬提取液無渾濁現(xiàn)象,則可直接取樣并進(jìn)行測定,當(dāng)出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象,則應(yīng)通過離心機(jī)進(jìn)行消除。
1.2 樣品溶液吸光度的測定
移取無渾濁現(xiàn)象的提取液0.1ml-0.5ml,放置于10ml的比色管中,再加入2%的偏磷酸溶液稀釋至刻度并搖勻,在波長243nm處,以蒸餾水作為參比對象,使用1cm石英皿測定其吸光度。
1.3 待測堿液的測定
先吸取0.1ml-0.5ml無渾濁溶液作為提取液,向其中加入幾滴0.5mol/L氫氧化鈉溶液,放置于10ml的比色管中進(jìn)行混勻,并在25℃條件下靜置45min后,向其中加入2%偏磷酸溶液并稀釋至刻度后進(jìn)行混勻。并以蒸餾水作為參比對象,在波長為243nm處進(jìn)行吸光度的測定。
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
2.1 如果選擇波長長度
維生素C是一種烯醇化合物,在紫外區(qū)有吸收現(xiàn)象,并分別對不同濃度的維生素C在試劑空白溶液可在215~455nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描,結(jié)果表明最大吸收峰是在245nm。所以245nm作為測量波長。
2.2 靜置時(shí)間的選擇
以取樣量0.5ml做實(shí)驗(yàn),加入堿液后在25度的溫度下放置。根據(jù)結(jié)果可知在25度溫度下放置25~40min,吸光度達(dá)到穩(wěn)定最小值,所以實(shí)驗(yàn)選擇的靜置的時(shí)間為40min。
2.3 氫氧化鈉的用量選擇
水果提取液的取樣量與加堿量有關(guān),當(dāng)提取液取樣量小于等于0.5ml時(shí),加入5滴0.5mol/L氫氧化鈉溶液,溶液為堿性(pH值>10),并利用維生素在堿性介質(zhì)中的不穩(wěn)定性,達(dá)到破壞維生素C的目的。如果堿液的加入量過大,就會(huì)使最終測定液的酸堿度受到影響,所以選擇加入5滴0.5mol/L氫氧化鈉溶液。如果取樣體積大于0.5ml的時(shí)候,就要適當(dāng)增加堿液量至溶液pH達(dá)值>10,此時(shí)在25度的溫度下,取樣量的靜置時(shí)間也需要延長。
2.4 校準(zhǔn)曲線測定
數(shù)據(jù)見表2,最大吸光度不要超過0.8A。
2.5 不同測量方法對比
2,6-二氯靛酚滴定法與紫外分光光度法是采用的都是前處理溶液,但測試方法不相同,從表3中可以表明,不同的測量方法得出維生素C的相對平均差都小于5.5%,實(shí)驗(yàn)表明兩種方法得出的結(jié)果相吻合,因此紫外分光光度法更適合于含有深顏色樣品的測定。
參考文獻(xiàn)
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[2]李婷婷,鄧晶晶,尤思路.紫外分光光度法測定維生素C片含量結(jié)果的不確定度評定[J].成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2008(02).
作者簡介:高志慧(1996-),女,漢族,黑龍江省哈爾濱市平房區(qū),從事化學(xué)制藥專業(yè)學(xué)習(xí)。