EGFR-TKI聯(lián)合化療對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌患者血清IGF-1和AGR2水平的影響

岳紅紅，趙 亮，姜 威

(中國武警總醫(yī)院，北京100039)

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·論 著·

EGFR-TKI聯(lián)合化療對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌患者血清IGF-1和AGR2水平的影響

岳紅紅，趙 亮，姜 威△

(中國武警總醫(yī)院，北京100039)

目的 觀察表皮生長(zhǎng)因子受體-酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI)聯(lián)合化療對(duì)非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者化療前后血清胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)和前梯度蛋白2(AGR2)水平變化的影響，探討IGF-1和AGR2能否作為評(píng)估NSCLC化療療效及預(yù)后的指標(biāo)。方法 選取68例晚期NSCLC患者給予EGFR-TKI聯(lián)合化療為試驗(yàn)組，并以30例健康人群為健康對(duì)照組，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)分別測(cè)定化療前、化療3周后血清IGF-1、AGR2水平。采用Kanplan-Meier法分析血清IGF-1、AGR2水平變化對(duì)預(yù)后的影響。結(jié)果 (1)EGFR-TKI聯(lián)合化療疾病控制率(DCR)為52.9%；(2)試驗(yàn)組治療前血清IGF-1水平為(329.35±88.13)μg/L，明顯高于健康對(duì)照組的(146.36±41.27)μg/L(P<0.01)，試驗(yàn)組治療前血清AGR2水平為(16.72±6.23)ng/mL，高于健康對(duì)照組的(4.38±2.17)ng/mL(P<0.01)；治療后血清IGF-1為(211.53±52.31)μg/L、AGR2水平為(9.72±3.56)ng/mL，均比治療前明顯降低(均P<0.01)；NSCLC患者血清IGF-1與AGR2水平呈正相關(guān)(r=0.489，P<0.01)；(3)治療有效組患者血清IGF-1水平為(128.62±48.24)μg/L、AGR2水平為(7.22±4.27)ng/mL，分別較治療前IGF-1[(334.23±82.11)μg/L]、AGR2[(18.43±6.17)ng/mL]明顯下降(均P<0.01)。Kanplan-Meier分析顯示，治療后血清IGF-1、AGR2水平的高低對(duì)預(yù)后有明顯影響。結(jié)論 IGF-1、AGR2水平在評(píng)估EGFR-TKI聯(lián)合化療對(duì)晚期NSCLC的療效及預(yù)后有著潛在的臨床價(jià)值。

非小細(xì)胞肺癌； 胰島素樣生長(zhǎng)因子; 前梯度蛋白2； 預(yù)后

表皮生長(zhǎng)因子受體-酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI)越來越普遍應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)治療中，相當(dāng)一部分的臨床研究顯示,EGFR-TKI聯(lián)合化療有著更好的療效，不良反應(yīng)更少[1]。其中，EGFR突變與臨床療效有一定的相關(guān)性，但由于EGFR突變檢測(cè)較復(fù)雜，在臨床上難以開展，因此尋找新的替代標(biāo)志物來評(píng)估或預(yù)測(cè)EGFR-TKI聯(lián)合化療的療效及預(yù)后的指標(biāo)顯得尤為重要。血清胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)是一種多肽類生長(zhǎng)因子，具有刺激細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)等作用。IGF-1通過與其受體結(jié)合，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的分化、生長(zhǎng)[2]。前梯度蛋白2(AGR2)是從乳腺癌細(xì)胞系MCF7的cDNA文庫中篩選出非洲爪蟾xAG2的同源基因，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)[3]。多項(xiàng)研究表明，IGF-1和AGR2可作為不同腫瘤包括肺癌、乳腺癌等的生物標(biāo)志物。目前，有關(guān)EGFR-TKI聯(lián)合化療對(duì)晚期NSCLC患者血清IGF-1、AGR2水平的影響及預(yù)后相關(guān)性的研究少見報(bào)道。本研究通過觀察EGFR-TKI聯(lián)合化療在晚期NSCLC治療中的療效以及治療前后血清IGF-1、AGR2水平變化，進(jìn)一步探討IGF-1、AGR2水平與療效、預(yù)后的相關(guān)性，為臨床上判斷療效及預(yù)后提供一個(gè)可靠的指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1月至2015年1月在本院住院治療的肺癌患者68例，均經(jīng)病理學(xué)確診為NSCLC，其中男48例、女20例；≤60歲28例，>60歲40例；年齡42～77歲、平均53.4歲；腺癌44例，鱗癌24例；低分化癌26例，中分化癌22例，高分化癌20例；根據(jù)2009年肺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅲ期37例，Ⅳ期31例。臨床上有可測(cè)量的病灶，Karnofsky評(píng)分大于60分，預(yù)計(jì)生存期大于3個(gè)月，血常規(guī)、肝腎功能、心電圖正常；治療前1個(gè)月內(nèi)未行其他抗腫瘤治療。健康對(duì)照組為同時(shí)期健康體檢者30例，其中男20例、女10例，年齡31～75歲、平均52.1歲。兩組性別及年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法與療效評(píng)價(jià) 所有患者采用GP化療方案：吉西他濱1 250 mg/m2，靜脈滴注，第1、8天；順鉑40 mg/m2，靜脈滴注，第1～3天。21 d為1個(gè)周期，至少2個(gè)周期?；颊叻名}酸厄洛替尼150 毫克/次，1次/天。按世界衛(wèi)生組織(WHO)實(shí)體瘤客觀療效標(biāo)準(zhǔn)分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)、進(jìn)展(PD)，以(CR+PR+SD)為疾病控制率(DCR)?？偵嫫?OS)的定義是指從化療開始至因任何原因引起死亡的時(shí)間。末次隨訪時(shí)間2015年12月30日為隨訪截止日期。

1.3 血清IGF-1、AGR2水平檢測(cè) 所有患者于化療前及化療2個(gè)療程結(jié)束后，以及健康對(duì)照者在清晨空腹采集靜脈血5 mL，1 000 r/min離心20 min，分裝，置于-80 ℃冰箱保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)IGF-1、AGR2，IGF-1 ELISA及AGR2 ELISA試劑盒購自北京易科攀博生物有限公司，嚴(yán)格按檢測(cè)說明書操作。

2 結(jié) 果

2.1 近期療效情況 本組68例患者中，CR 0例，PR 26例，SD 10例，PD 32例，DCR為52.9%(36/68)。

2.2 兩組血清IGF-1、AGR2水平 試驗(yàn)組治療前血清IGF-1水平為(329.35±88.13)μg/L，明顯高于健康對(duì)照組的(146.36±41.27)μg/L(P<0.01)，試驗(yàn)組治療前血清AGR2水平為(16.72±6.23)ng/mL，高于健康對(duì)照組的(4.38±2.17)ng/mL(P<0.01)；治療后血清IGF-1為(211.53±52.31)μg/L、AGR2水平為(9.72±3.56)ng/mL，均比治療前明顯降低(均P<0.01)。

2.3 治療有效及無效組患者化療前后IGF-1、AGR2水平 治療有效組患者血清IGF-1水平為(128.62±48.24)μg/L較治療前為(334.23±82.11)μg/L明顯下降(P<0.01)。而治療無效組患者血清IGF-1水平為(304.46±78.52)μg/L，較治療前的(323.13±73.56)μg/L略有下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療有效組患者血清AGR2水平為(7.22±4.27)ng/mL，較治療前的(18.43±6.17)ng/mL明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。而治療無效組患者血清AGR2水平為(12.69±3.56)ng/mL，低于治療前的(15.36±2.78)ng/mL，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.4 血清IGF-1、AGR2水平對(duì)生存時(shí)間的影響 根據(jù)治療前后血清IGF-1、AGR2檢測(cè)結(jié)果，計(jì)算出血清IGF-1、AGR2水平中位值(IGF-1=113.74 μg/L、AGR2=6.28 ng/mL)，以中位值為界，劃分為高值和低值，經(jīng)Kaplan-Meier法繪制生存曲線，發(fā)現(xiàn)，血清IGF-1、AGR2水平高于中位值，其生存率較低，表明治療后血清IGF-1、AGR2水平的高低對(duì)預(yù)后有明顯影響(P<0.01)。見圖1、2。

圖1 血清IGF-1水平對(duì)生存時(shí)間的影響

圖2 血清AGR2水平對(duì)生存時(shí)間的影響

2.5 血清IGF-1與AGR2水平的相關(guān)分析 晚期NSCLC患者血清IGF-1與AGR2水平呈正相關(guān)(r=0.489，P<0.01)。見圖3。

圖3 IGF-1與AGR2相關(guān)的關(guān)系

3 討 論

有研究報(bào)道，EGFR-TKI聯(lián)合化療能有效提高NSCLC患者的臨床獲益率，延長(zhǎng)無進(jìn)展生存時(shí)間[4]。本研究中，晚期NSCLC患者予以EGFR-TKI聯(lián)合化療，其DCR為52.9%，表明采用EGFR-TKI聯(lián)合化療有效提高了患者的療效，卻并不能使晚期NSCLC患者完全緩解，只能部分有效緩解疾病的發(fā)展。這其中大部分患者并未從中受益。有研究表明，采用EGFR-TKI治療，EGFR突變陽性患者臨床療效好于EGFR突變陰性患者[5]。但是，EGFR突變檢測(cè)受到很多因素的制約，如實(shí)驗(yàn)室技術(shù)、價(jià)格等，在臨床實(shí)踐中無法廣泛地開展。因此，需要一個(gè)新的替代指標(biāo)來預(yù)測(cè)或評(píng)估EGFR-TKI治療或化療的療效以及預(yù)后。

IGF-1是主要由肝臟分泌的一種生長(zhǎng)因子及促有絲分裂原。在多種腫瘤中呈高表達(dá)，與腫瘤病情進(jìn)展、化療藥物的抵抗以及不良預(yù)后相關(guān)[6]。張曦等[7]利用RNA干擾(RNAi)介導(dǎo)胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)基因沉默，可逆轉(zhuǎn)NSCLC細(xì)胞PC-9/ZD發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化。湯敏等[8]研究發(fā)現(xiàn)，NSCLC患者血清IGF-1水平明顯高于健康人，NSCLC危險(xiǎn)程度隨著IGF-1水平升高而增加，對(duì)于NSCLC的輔助診斷和生物學(xué)行為預(yù)測(cè)重要的價(jià)值。馬望等[9]研究報(bào)道，在NSCLC患者中，化療有效組血清IGF-1明顯下降，表明IGF-1與NSCLC疾病進(jìn)展密切相關(guān)，有可能成為預(yù)測(cè)化療療效的指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，NSCLC患者IGF-1水平明顯高于健康對(duì)照組，予以聯(lián)合化療后，IGF-1水平明顯下降，而化療無效組無明顯下降，與前述報(bào)道結(jié)果一致。進(jìn)一步對(duì)NSCLC患者生存時(shí)間曲線分析發(fā)現(xiàn)，予以EGFR-TKI聯(lián)合化療后，血清IGF-1水平越高，總生存時(shí)間越短，其原因可能與血清IGF-1高表達(dá)與肺癌的侵襲、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為有關(guān)。

AGR2與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。采用RNAi 技術(shù)特異地剔除AGR2基因可明顯減少肺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[10]。Chung等[11]研究發(fā)現(xiàn)，在Ⅰ期肺癌患者中，血清AGR2水平高于平均值。Alavi等[12]研究發(fā)現(xiàn)，幾乎所有的NSCLC患者均有AGR2表達(dá)，并且AGR2水平與年輕患者總生存期有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，NSCLC患者治療前AGR2水平明顯高于健康對(duì)照組，這與上述的研究結(jié)果相一致，其原因可能是由于腫瘤細(xì)胞過度分泌AGR2釋放入血所致。Narumi等[13]研究發(fā)現(xiàn)，AGR2可作為反映肺腺癌患者EGFR基因突變的輔助標(biāo)志物，也是肺腺癌細(xì)胞EGFR-TKI治療敏感性潛在的標(biāo)志物。在肺癌細(xì)胞系NCI-H460中，AGR2水平降低破壞了EGFR介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑[14]。本研究結(jié)果顯示，予以EGFR-TKI聯(lián)合化療后，血清AGR2水平明顯降低。此外，治療有效組血清AGR2水平明顯下降，而無效組則下降不明顯，表明血清AGR2水平可能與體內(nèi)腫瘤負(fù)荷有關(guān)，可作為判斷療效的參考指標(biāo)。通過生存時(shí)間曲線分析發(fā)現(xiàn)，予以EGFR-TKI聯(lián)合化療后，血清AGR2水平越高，生存時(shí)間越短。推測(cè)，AGR2水平越高，惡性程度越高，更快地出現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移，從而導(dǎo)致患者更差的預(yù)后，生存期縮短。剔除AGR2基因，可減少IGF-1誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移和細(xì)胞周期進(jìn)程[15]。AGR2是IGF-1參與腫瘤進(jìn)展的關(guān)鍵調(diào)控者。本研究中通過相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，NSCLC患者血清IGF-1與AGR2水平呈正相關(guān)，表明IGF-1與AGR2共同參與了肺癌的進(jìn)展。

綜上所述，晚期NSCLC患者給予EGFR-TKI聯(lián)合化療后，血清IGF-1與AGR2水平與臨床療效及預(yù)后有密切的關(guān)系，在評(píng)估EGFR-TKI聯(lián)合化療對(duì)晚期NSCLC的療效及預(yù)后有著潛在的臨床價(jià)值。本研究不足之處在于單中心、樣本量偏少，還需要多中心、大樣本量的研究來證實(shí)兩者在NSCLC的療效及預(yù)后判斷方面的價(jià)值。此外，如何有效降低肺癌血清中IGF-1、AGR2水平，以及如何阻斷兩者之間的協(xié)同作用通路，有可能成為提高肺癌療效的重要途徑之一。

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Effect of EGFR-TKI combined with chemotherapy on serum IGF-1 and AGR2 levels in patients with advanced non-small cell lung cancer

YUEHonghong,ZHAOLiang,JIANGWei△

(GeneralhospitalofChinesePeople′sArmyPoliceForce,Beijing100039,China)

Objective To observe the effect of EGFR-TKI combined with chemotherapy on the changes of serum insulin-like growth factor1(IGF-1)and anterior gradient-2(AGR2)levels in the patients with advanced non-small cell lung cancer(NSCLC),and to investigate whether IGF-1 and AGR2 can serve as a potential indicator of the prognosis and efficacy of chemotherapy in NSCLC.Methods Sixty-eight patients with advanced NSCLC were selected as the experimental group treated by EGFR-TKI combined chemotherapy and 30 healthy people served as the healthy control group.(treatment group).The levels of serum IGF-1 and AGR2 before chemotherapy and at 3 weeks after chemotherapy were detected by ELISA.The influence of serum IGF-1 and AGR2 levels on the prognosis was analyzed by using Kanplan-Meier method.Results (1)The disease control rate(DCR)in the EGFR-TKI combined chemotherapy was 52.9%;(2)the level of serum IGF-1 before treatment in the experimental group was(329.35±88.13)μg/L,which was significantly higher than (146.36±41.27)μg/L in the healthy control group(P<0.01); the level of serum AGR2 in experimental group was(16.72±6.23)ng/mL,which was significantly higher than(4.38±2.17)ng/mL in the healthy control group(P<0.01); serum levels of IGF-1 and AGR2 after treatment were(211.53±52.31)μg/L and (9.72±3.56)ng/mL respectively,which were significantly lower than those before treatment(P<0.01); serum IGF-1 and AGR2 in NSCLC patients were positively correlated(r=0.489,P<0.01);(3)serum levels of IGF-1 and AGR2 after chemotherapy were(128.62±48.24)μg/L and(7.22±4.27)ng/mL respectively,which were obviously lower than(334.23±82.11)μg/L and(18.43±6.17)ng/mL before chemotherapy(allP<0.01).The Kanplan-Meier analysis revealed that serum IGF-1 and AGR2 levels in advanced NSCLC had an obvious influence on the prognosis.Conclusion Serum IGF-l and AGR2 levels may have a potential clinical value to assess the therapeutic efficacy of EGFR-TKI combined chemotherapy and prognosis in advanced NSCLC．

Non-small-cell lung cancer; IGF-1; AGR2; prognosis

岳紅紅，女，副主任醫(yī)師，主要從事過敏反應(yīng)研究。△

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.23.014

A

1673-4130(2016)23-3277-03

2016-03-03

2016-05-21)