“多肽?！闭T導(dǎo)劑防治煙草病害的效果研究

黃夸克 陳海如 杜官本 張 俊 楊 嘉 曾 嶸 解 燕

(1. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，云南 昆明 650201；2. 云南省煙草公司曲靖市公司，云南 曲靖 655000；3. 西南林業(yè)大學(xué)材料工程學(xué)院，云南 昆明 650224)

?

“多肽?！闭T導(dǎo)劑防治煙草病害的效果研究

黃夸克1,2陳海如1杜官本3張 俊3楊 嘉2曾 嶸2解 燕2

(1. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，云南 昆明 650201；2. 云南省煙草公司曲靖市公司，云南 曲靖 655000；3. 西南林業(yè)大學(xué)材料工程學(xué)院，云南 昆明 650224)

將有機(jī)誘導(dǎo)劑 “多肽?！?施加在煙草示范品種紅花大金元的育苗基質(zhì)及煙株上，通過與常規(guī)防治煙苗和煙株的病情及生物學(xué)性狀進(jìn)行比較，分析其對煙草病害的防治效果。結(jié)果表明： 苗期使用有機(jī)誘導(dǎo)劑 “多肽?！?后，大十字期猝倒病、貓耳期煙草黑脛病、根黑腐病和立枯病的發(fā)病率分別比對照平均下降了9.3%、15.1%、9.0%和12.7%，同時成苗期煙草黑脛病、根黑腐病、立枯病發(fā)病率分別比對照平均降低了16.5%、10.4%、13.5%；大田期使用有機(jī)誘導(dǎo)抗病劑 “多肽?！?后，對煙草黑脛病的相對防治效果平均達(dá)75.0%，對煙草根黑腐病的相對防治效果平均達(dá)75.9%，對煙草赤星病的相對防治效果平均達(dá)43.3%，對煙草氣候性斑點病的相對防治效果平均達(dá)42.2%，對煙草炭疽病的相對防治效果平均達(dá)45.0%，對煙草白粉病的相對防治效果平均達(dá)47.0%；經(jīng)過 “多肽保” 處理過的育苗基質(zhì)及煙株的生物學(xué)性狀得到改善，煙苗的側(cè)根干質(zhì)量、莖稈高度、莖稈直徑、莖稈干質(zhì)量、單株葉面積等均顯著提高。因此，使用 “多肽?！?能有效提高煙草的抗病能力。

多肽保；有機(jī)誘導(dǎo)劑；煙草；病害；防治效果

傳統(tǒng)煙草 (Nicotianatabacum) 病蟲害的防治主要從抗病品種的利用、化學(xué)防治和加強(qiáng)田間綜合管理進(jìn)行研究[1-6]，云南省多年來在優(yōu)質(zhì)煙葉原料的生產(chǎn)方面做出了突出貢獻(xiàn)。然而，云南是中國最大的優(yōu)質(zhì)煙葉和卷煙生產(chǎn)地，煙草種植受多種真菌、病毒、細(xì)菌、線蟲等危害，主要有猝倒病、黑脛病、黑腐病、赤星病等[5-6]。然而，當(dāng)前對以上病害的控制主要依賴于抗病品種和化學(xué)農(nóng)藥等。但生產(chǎn)上還沒有育成對這些病害免疫或高抗的煙草抗病品種，例如紅花大金元等煙草優(yōu)良品種也因為病害的原因大面積減產(chǎn)、煙農(nóng)不愿意種，但轉(zhuǎn)基因煙草的應(yīng)用由于安全顧慮，并未商品化，因此化學(xué)農(nóng)藥的使用仍然是云南煙葉病害控制的最主要措施。隨著單一品種的大規(guī)模種植和化學(xué)農(nóng)藥的大量應(yīng)用，煙葉及環(huán)境的安全性已經(jīng)飽受詬病，不利于煙草行業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。在不調(diào)整煙葉品種種植規(guī)劃的前提下，煙葉生產(chǎn)過程中，以煙葉安全和對環(huán)境友好為基礎(chǔ)的有害生物防控成為了必由之路。近年來，一些新的防治方法應(yīng)運而生，并取得了較好的防治效果。

青霉菌滅活菌絲體 (多肽保) 是一種無毒物質(zhì)，無直接殺菌或抑菌活性，主要成分為多肽和多糖，可在促進(jìn)煙株生長的同時，誘導(dǎo)烤煙體內(nèi)與抗病相關(guān)的基因大量開放表達(dá)，從而使煙株產(chǎn)生系統(tǒng)抗病性，提高對黑脛病、病毒病等多種病害的抵抗能力[7-10]。本研究嘗試與 “多肽?！?作為有機(jī)誘導(dǎo)抗病劑對煙草病害進(jìn)行防治，通過在云南曲靖的不同地區(qū)進(jìn)行大田試驗，找出一種無毒的有效抵抗煙草病毒的新產(chǎn)品。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

“多肽保” (10%) 由昆明保騰科技有限公司提供，紅花大金元幼苗由云南煙草公司提供，甲霜靈·錳鋅 (58%)、霜霉威水劑 (72.2%)、氨基寡糖素水劑 (0.5%)、代森鋅可濕性粉劑 (80%)、科生多抗霉素水劑 (0.3%)、甲基硫菌靈懸浮劑 (36%) 均由江蘇寶靈化工股份有限公司提供。

1.2 試驗地點及面積

苗期推廣應(yīng)用5 833.36 hm2，其中，麒麟?yún)^(qū)666.67 hm2，沾益區(qū)666.67 hm2，宣威市666.67 hm2，會澤縣666.67 hm2，師宗縣666.67 hm2，陸良縣666.67 hm2，羅平縣666.67 hm2，馬龍666.67 hm2，富源500 hm2；大田期推廣應(yīng)用8 400 hm2，其中，麒麟?yún)^(qū)1 000 hm2，沾益區(qū)1 000 hm2，宣威市1 000 hm2，會澤縣1 000 hm2，師宗縣1 000 hm2，陸良縣1 000 hm2，羅平縣1 000 hm2，馬龍733.33 hm2，富源666.67 hm2。示范地安排于各縣、區(qū)基地單元建設(shè)、“三化” 示范、生產(chǎn)方式現(xiàn)代化試點等重點項目示范區(qū)，于4月20日至5月5日移栽，施肥及其他栽培管理按優(yōu)質(zhì)煙栽培管理措施執(zhí)行。

1.3 試驗設(shè)計

1.3.1 苗期 “多肽?！?的施加及處理方法

1) “多肽?！?處理：漂浮育苗+多肽保。具體操作為，調(diào)節(jié)基質(zhì)水分時，將 “多肽?！?20 g/盤與基質(zhì)充分拌勻后播種；為防止育苗基質(zhì)霉菌滋生，需要做好育苗棚通風(fēng)除濕工作。播種至出苗，棚內(nèi)相對濕度控制在75%～85%，小十字期至大十字期，棚內(nèi)相對濕度控制在75%左右，大十字期后，棚內(nèi)相對濕度控制在60%～70%，其他按照漂浮育苗規(guī)程進(jìn)行規(guī)范管理。

2) 常規(guī)處理：漂浮育苗。按照漂浮育苗規(guī)程進(jìn)行育苗和規(guī)范管理。

1.3.2 大田期多肽保的施加及處理方法

1) “多肽保” 處理：移栽時，將10% “多肽保” 7.5 kg/hm2加水1 500 kg制備成懸液，之后將懸液與45～75 kg細(xì)土或細(xì)農(nóng)家肥充分?jǐn)嚢杈鶆颍诳緹熞圃郧熬鶆蚴┯谔羶?nèi)。

2) 常規(guī)防治處理：常規(guī)防治病害，面積0.67 hm2左右。其中化學(xué)藥劑與細(xì)土或農(nóng)家肥充分?jǐn)嚢杈鶆颍唧w方法如下。

(1) 黑脛病和根黑腐?。?月上中旬，當(dāng)田間病株率達(dá)1%時，先清除帶病煙株，再用58%甲霜靈·錳鋅2.25 kg/hm2兌2 250 kg水灌根1次。10～15 d后，根據(jù)發(fā)病情況再用72.2%霜霉威水劑1.8 kg/hm2兌1 500 kg水灌根1～2次，共施藥2～3次。

(2) 炭疽病：當(dāng)田間病葉率達(dá)16%時，用80%代森鋅可濕性粉劑600倍液等推薦使用的殺菌劑葉面噴霧1次。對病葉率超過30%以上的重病煙田，用上述藥劑及劑量葉面噴霧2～3次，每次間隔7～10 d。

(3) 氣候性斑點病：當(dāng)田間病葉率達(dá)16%時，用80%代森鋅可濕性粉劑600倍液等推薦使用的殺菌劑葉面噴霧1次；也可將80%代森鋅可濕性粉劑600倍液與3%～5%磷酸二氫鉀溶液混合使用。對病葉率超過30%以上的重病煙田，用上述藥劑及劑量葉面噴霧2～3次，每次間隔7～10 d。

(4) 赤星?。簾熤甏蝽敽?～7 d，用0.3%科生多抗霉素水劑300倍液等推薦使用的殺菌劑葉面噴霧1次。對病情指數(shù)達(dá)10以上的重病田塊，用上述藥劑及劑量葉面噴霧2～3次，每次間隔7～10 d。

(5) 白粉?。寒?dāng)田間病葉率達(dá)5%時，用36%甲基硫菌靈懸浮劑500倍液等推薦使用的殺菌劑葉面噴霧1次。對病葉率超過15%以上的重病煙田，用上述藥劑及劑量葉面噴霧2～3次，每次間隔7～10 d。

3) 對照：不施用任何殺菌劑，面積666.67～1 333.34 m2。

1.4 調(diào)查方法

1.4.1“多肽?！?誘導(dǎo)紅花大金元抗病性調(diào)查方法

1) 苗期：以示范縣為單位，在十字期、貓耳期和成苗期 (移栽前10～15 d) 各調(diào)查1次。其中每組試驗隨機(jī)調(diào)查20株，取其平均值。

2) 大田期：第1次施藥后15 d，開始第1次調(diào)查，以后調(diào)查根據(jù)主要病害發(fā)生情況具體確定。具體為：黑脛病于5 d后進(jìn)行第2次調(diào)查，再過5 d后進(jìn)行第3次調(diào)查；赤星病于5 d后進(jìn)行第2次調(diào)查；炭疽病和氣候性斑點病于5 d后進(jìn)行第2次調(diào)查，再過5 d后進(jìn)行第3次調(diào)查；白粉?。? d后進(jìn)行第2次調(diào)查，接著5 d后進(jìn)行第3次調(diào)查。其中每組試驗隨機(jī)調(diào)查20株，取其平均值。

1.4.2“多肽?！?對紅花大金元生物性狀影響調(diào)查

1) 苗期：調(diào)查煙苗的側(cè)根干質(zhì)量、莖稈高度、莖稈直徑、莖稈干質(zhì)量、單株葉面積、群體生長整齊度。其中每組試驗隨機(jī)調(diào)查20株，取其平均值。

2) 大田期：調(diào)查煙株的株高、莖圍、葉長大小、平均留葉數(shù)、株形、田間整齊度、生長勢 (團(tuán)棵期、旺長期和成熟期)。其中每組試驗隨機(jī)調(diào)查20株，取其平均值。

1.5 統(tǒng)計方法

1) 紅花大金元病情指數(shù) (Y) 計算方法如下：

(1)

其中該病級數(shù)及該病對應(yīng)最高級數(shù)參見國標(biāo)GB/T 23222—2008 《煙草病蟲害分級及調(diào)查方法》。

2) 紅花大金元病情增長率 (I) 計算方法如下：

(2)

3) 紅花大金元相對防治效果 (P) 計算方法如下：

(3)

各病害以最后1次調(diào)查的病情指數(shù)計算相對防治效果。

2 結(jié)果與分析

2.1 “多肽?！?在紅花大金元苗期的誘導(dǎo)抗病效果

經(jīng)“多肽?！碧幚淼募t花大金元在苗期的發(fā)病率調(diào)查結(jié)果見表1。從表1可知，無論是大十字期、貓耳期，還是成苗期，“多肽?！?處理后的紅花大金元的發(fā)病率與對照相比，發(fā)病率均下降。尤其是貓耳期及成苗期的煙草黑脛病，較對照試驗的發(fā)病率下降了15.1%和16.5%。說明經(jīng)過 “多肽?！?誘導(dǎo)處理，能夠降低紅花大金元在苗期的發(fā)病率。

表1“多肽保” 處理紅花大金元苗期的發(fā)病率

2.2 “多肽保” 在紅花大金元大田期的誘導(dǎo)抗病效果

2.2.1 對煙草黑脛病的防治效果

曲靖9個縣市 (區(qū)) 示范點經(jīng) “多肽?！?處理后，對黑脛病的相對防治效果見表2。由表2可知， 經(jīng) “多肽?！?處理的紅花大金元煙株平均病情指數(shù)為3.8%，常規(guī)防治煙株的平均病情指數(shù)為3.5%，而未經(jīng)防治的對照平均病情指數(shù) (15.2%) 較前兩者高，說明經(jīng)過 “多肽?！?誘導(dǎo)處理后的煙株抗病能力明顯提高，對煙草黑脛病的平均相對防效達(dá)到75.0%。其數(shù)值較常規(guī)化學(xué)防治對煙草黑脛病的相對防效 (77%) 低，但 “多肽?！?對黑脛病的防效與常規(guī)化學(xué)防效無顯著差異。

表2 不同處理煙草黑脛病的相對防治效果

2.2.2 對煙草根黑腐病的防治效果

由表3可知，9個縣市 (區(qū)) 示范點最后1次調(diào)查的根黑腐病病情指數(shù)為： 經(jīng) “多肽?！?處理的煙株，其病情指數(shù)為2.1%，為對照 (8.7%) 的1/4。在平均相對防效上，根黑腐病的防效與黑脛病的試驗結(jié)果一致，即 “多肽?！?和常規(guī)化學(xué)防治對根黑腐病的防治效果無明顯差異。

表3 不同處理煙草根黑腐病的相對防治效果

2.2.3 對煙草赤星病的防治效果

由表4可知，使用 “多肽?！?處理的煙株對赤星病的平均相對防效為43.3%，其值較常規(guī)防治處理的平均相對防效 (67.3%) 低，說明化學(xué)防治處理對煙草赤星病的效果更明顯。但是經(jīng)過 “多肽?！?誘導(dǎo)作用后的煙株與對照相比，前者平均病情指數(shù)僅為后者的50%，說明 “多肽保” 誘導(dǎo)劑抗赤星病的效果明顯。

表4 不同處理煙草赤星病的相對防治效果

2.2.4 對煙草氣候性斑點病的防治效果

由表5可知，9個縣市 (區(qū)) 示范點最后1次調(diào)查的氣候性斑點病病情指數(shù)為：使用 “多肽?！?處理過的煙株的平均病情指數(shù)為7.8%，其值較常規(guī)防治處理 (4.5%) 高，說明化學(xué)處理更有利于氣候性斑點病的防治。但采用 “多肽?！?處理后的煙株的病情指數(shù)值仍然僅有對照的1/2，并且對應(yīng)的平均相對防效達(dá)到了42.2%，說明 “多肽?！?對氣候性斑點病有一定防效，但明顯低于常規(guī)化學(xué)防治的防效。

表5 不同處理煙草氣候性斑點病情的相對防效

2.2.5 對煙草炭疽病的防治效果

由表6可知，9個縣市 (區(qū)) 示范點最后1次調(diào)查的病情指數(shù)為：使用 “多肽?！?處理的平均值為8.3%，常規(guī)防治處理的平均值為3.9%，對照的平均值為15.1%，同時 “多肽保” 對煙草炭疽病的平均相對防效達(dá)45.0%，而常規(guī)化學(xué)防治對煙草炭疽病的平均相對防效達(dá)74.2%。以上結(jié)果說明，“多肽?！?對煙草炭疽病有一定防效，但顯著低于常規(guī)化學(xué)防治的防效。

表6 不同處理煙草炭疽病的相對防效

2.2.6 對煙草白粉病防治效果分析

煙株的白粉病病情指數(shù)及對該病的相對防效見表7。由表7可知，使用 “多肽?！?處理后煙株對白粉病的平均相對防效值低于常規(guī)處理，說明化學(xué)處理對煙草白粉病的防效顯著，但 “多肽保” 對煙草白粉病仍具有一定防效。

表7 不同處理煙草白粉病的相對防效

2.3 “多肽?！?處理對紅花大金元生物學(xué)性狀的影響

1) 苗期：由表8可知，使用 “多肽?！?后，煙苗的生物學(xué)性狀明顯改善。側(cè)根干質(zhì)量、莖稈高度、莖稈直徑、莖稈干質(zhì)量均顯著提高，群體生長整齊度盡管較常規(guī)防治差，但對煙株生長影響不大。

2) 大田期：由表9可知，使用 “多肽保” 后，煙株的形狀及整齊度沒有明顯的變化，且對煙株的生長沒有影響。

表8 2種處理9個縣市 (區(qū)) 煙苗的生物學(xué)性狀

表9 9個縣市 (區(qū)) 的煙株生物學(xué)性狀

3 結(jié)論與討論

通過開展大田試驗示范可以看出，有機(jī)誘導(dǎo)劑 “多肽?！?對曲靖煙區(qū)煙株生長的抗病能力具有明顯的促進(jìn)作用，特別是對黑脛病、根黑腐病和立枯病的防治作用明顯。

1) 苗期使用有機(jī)誘導(dǎo)劑 “多肽保” 后，大十字期猝倒病、貓耳期煙草黑脛病、根黑腐病和立枯病的發(fā)病率分別比對照平均下降了9.3%、15.1%、9.0%和12.7%；同時成苗期煙草黑脛病、根黑腐病、立枯病發(fā)病率分別比對照平均降低了16.5%、10.4%、13.5%。因此，使用“多肽?！碧幚砟苡行岣邿熋绲目共∧芰?。

2) 大田期使用有機(jī)誘導(dǎo)抗病劑 “多肽保” 后，對煙草黑脛病的相對防治效果平均達(dá)75.0%，對煙草根黑腐病的相對防治效果平均達(dá)75.9%，對煙草赤星病的相對防治效果平均達(dá)43.3%，對煙草氣候性斑點病的相對防治效果平均達(dá)42.2%，對煙草炭疽病的相對防治效果平均達(dá)45.0%，對煙草白粉病的相對防治效果平均達(dá)47.0%。因此，使用 “多肽?！?處理能有效提高煙株的抗病能力。

3) 苗期使用 “多肽?！?后，煙苗生物學(xué)性狀得到顯著改善；大田區(qū)使用 “多肽?！?后，煙株的形狀及整齊度沒有發(fā)生顯著變化，且煙株生長情況良好。因此， “多肽?！?作用明顯，毒性較低，使用 “多肽?！?作為新型有機(jī)誘導(dǎo)劑來替代化學(xué)誘導(dǎo)劑對煙草的病情進(jìn)行防范是可行的。

[1] 吳劍, 張廷金, 李祥軍, 等. 2種生防促生菌與青霉菌滅活菌絲體協(xié)同誘導(dǎo)煙草抗病效果研究[J]. 青海師范大學(xué)學(xué)報, 2015, 31(3): 34-39.

[2] 馮振群, 盧清. 新型生物殺菌劑新奧霉素防治煙草花葉病毒病的田間藥效[J]. 現(xiàn)代農(nóng)藥, 2011, 10(4): 50-52.

[3] 徐興陽, 歐陽進(jìn), 楊明. 幾種防治煙草普通花葉病藥劑的田間藥效[J]. 煙草科技, 2005(1): 47-48.

[4] Park J M, Paek K H. Overexpression of the tobaccoTsi1 gene encoding an EREBP/AP2-Typetranscription factor enhances resistance against pathogen attack andosmotic stress in tobacco[J]. Plant Cell, 2001, 13(5): 1035- 1046.

[5] Johnson R, Narvaez J, An G, et al. Expression of proteinase inhibitors I and II in transgenic tobacco plants: effects on natural defense against Manduca sexta larvae[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 1989, 86(24): 9871-9875.

[6] Ramamoorthy V, Viswanathan R, Raguchander T, et al. Induction of systemic resistance by plant growth promoting rhizobacteria in crop plants against pests and diseases[J]. Crop Protection, 2001, 20(1): 1-11.

[7] 端永明, 徐興陽, 尹平, 等. “多肽?！?對煙草赤星病的防治效果探索[J]. 昆明學(xué)院學(xué)報, 2011, 33(6): 21-26.

[8] 鐘曉田, 李剛, 龍春銳, 等. 有機(jī)誘導(dǎo)抗病劑 “多肽保” 對培育健壯煙苗及大田增產(chǎn)增值效果的研究[J]. 昆明學(xué)院學(xué)報, 2013, 35(3): 12-15.

[9] 徐興陽, 端永明, 董家紅, 等. 植物有機(jī)誘導(dǎo)抗病劑 “多肽?！?對TMV的防控效果[J]. 昆明學(xué)院學(xué)報, 2010, 32(6): 6-9.

[10] 楊明. 青霉菌滅活菌絲體對煙草大田病害的誘導(dǎo)抗病性研究[D]. 長沙: 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué), 2009: 28-32.

(責(zé)任編輯 韓明躍)

Polypeptide-produce Inducer for Tobacco Diseases Resistance with Field Demonstration

Huang Kuake1,2, Chen Hairu1, Du Guanben3, Zhang Jun3, Yang Jia2, Zeng Rong2, Xie Yan2

(1. College of Plant Protection ,Yunnan Agriculture University, Kunming Yunnan 650201, China; 2. Yunnan Tobacco Company Qujing Branch,Qujing Yunnan 655000, China; 3. College of Materials and Technology, Southwest Forestry University, Kunming Yunnan 650224, China)

The organic induced agent called Polypeptide was applied in the seedling and plants of Honghuadajinyuan tobacco. By comparing with the diseases and biological characters of tobaccos treated with common treatments, the control efficacy of Polypeptide-oduce for the tobacco diseases was investigated. The results showed that the seedling morbidity of the damping (Phythiumaphanidermatum), phytophthora nicotianae (Phytophthoraparasiticavar), black root rot diseases (Fusariumsolanif. sp.batatas) and damping off (Rhizoctoniasolani) under the treatment of Polypeptide-produce was decreased averagely to 9.3%, 15.1% , 9.0% and 12.7%, compared with the control in early stage. Meanwhile, phytophthora nicotianae, black root rot diseases and damping off of mature seedling decreased averagely to 16.5%, 10.4% and 13.5%. Compared with the control, the control efficacy of phytophthora nicotianae, black root diseases, rust diseases (Bipolarissacchari), climatic spot disease (Exserohilumturcicum) and anthrax (Colletotrichumgossypii) and powdery mildew (Castagne) were reached 75.0%, 75.9%, 43.3%, 42.2%, 45.0% and 47.0%, respectively. The biological characters of the treated seedlings and tobacco plants were improved, compared with the conventional processing. The lateral root dry weight of seedling, the stem height, the stem diameter, the stem dry weight and leaf area for one plant were improved obviously. Hence, the capacity of diseases resistance could be improved under the treatment of Polypeptide-produce.

Polypeptide-roduce, organic induced agent, tobacco, diseases, control efficacy

10. 11929/j. issn. 2095-1914. 2016. 06. 021

2016-01-17

云南曲靖市煙草公司項目 “曲靖市烤煙有害生物綜合防控技術(shù)體系研發(fā)與應(yīng)用” (2012YN10) 資助。

陳海如 (1944—)，男，教授。研究方向：植物病理。Email: hrchen@mail.ynau.edu.cn。

S763.1

A

2095-1914(2016)06-0131-06

第1作者：黃夸克 (1978—)，男，博士生。研究方向：植物病理。Email: zj8101274@163.com。