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    HIF-1α因子標(biāo)記在卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤組織中的表達(dá)及意義*

    2016-12-10 07:07:02姚美珍譚布珍
    中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新 2016年30期
    關(guān)鍵詞:生殖細(xì)胞免疫組化惡性

    姚美珍 譚布珍

    HIF-1α因子標(biāo)記在卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤組織中的表達(dá)及意義*

    姚美珍①譚布珍①

    目的:探討缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)在卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤中的表達(dá)及與臨床病理特征的關(guān)系。方法:采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測56例卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤組織和38例正常卵巢組織中HIF-1α的表達(dá)因子。結(jié)果:HIF-1α在卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤組織中表達(dá)率為64.3%,明顯高于正常卵巢組織的23.7%,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( χ2=4.224,P<0.01)。結(jié)論:HIF-1α在缺氧環(huán)境下可促使腫瘤發(fā)生與發(fā)展,維持腫瘤生長,可作為臨床監(jiān)控卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤發(fā)生、發(fā)展的一個(gè)生物學(xué)標(biāo)志和基因治療靶點(diǎn)。

    卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤; HIF-1α; 病理

    First-author’s address:The Second Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330006,China

    卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤是一種復(fù)雜而高度惡性的腫瘤,發(fā)展快,易復(fù)發(fā),預(yù)后差,死亡率高。缺氧誘導(dǎo)因子-1(HIF-1)是在缺氧條件下廣泛存在于哺乳動(dòng)物和人體內(nèi)的一種轉(zhuǎn)錄因子,由α和β兩個(gè)亞基組成,對(duì)維持腫瘤細(xì)胞能量代謝、細(xì)胞增殖和血管生成具有很重要的作用,其中HIF-1α是決定HIF-1活性的缺氧調(diào)控亞基,可特異性的作用于氧反應(yīng)通路,活性受氧濃度調(diào)節(jié)[1-2]。本研究采用免疫組化SP法,測定卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤組織和正常卵巢組織中HIF-1α的表達(dá),旨在探討卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤的HIF-1α表達(dá)及其與臨床病理分型及分期之間的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1一般資料 選擇本院2012年1月-2015年7月手術(shù)治療并經(jīng)病理證實(shí)的卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤患者組織標(biāo)本56例和正常受試者卵巢組織標(biāo)本38例,卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤中包括卵巢內(nèi)胚竇瘤16例,無性細(xì)胞瘤20例,未成熟畸胎瘤17例,胚胎癌3例;患者年齡12~36歲,平均23歲;按照2000年FIGO臨床病理分期標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ期20例,Ⅱ期20例,Ⅲ期14例,Ⅳ期2例,Ⅰ、Ⅱ?yàn)樵缙?,Ⅲ、Ⅳ期為晚期。正常卵巢組織受試者年齡15~35歲,平均24歲,均來自不孕癥腹腔鏡探查行卵巢活檢手術(shù),病理證實(shí)卵巢組織無異常者。兩組年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

    1.2方法 免疫組化SP法:石蠟切片脫蠟至水,3%的過氧化氫室溫孵育10 min,微波修復(fù),正常山羊血清封閉,滴加一抗(兔抗人缺氧誘導(dǎo)因子-1α單克隆抗體濃縮液),4 ℃過夜,依次滴加生物素標(biāo)記二抗,辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液,DAB顯色,復(fù)染,酒精脫水,二甲苯透明,封固。用已知陽性片作陽性對(duì)照,用PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

    1.3免疫組化結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 采用Fromovitz陽性細(xì)胞半定量分級(jí)法。HIF-1α陽性判定標(biāo)準(zhǔn)為腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)或胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。先根據(jù)陽性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)計(jì)分,≤5%為0分,6%~25%為1分,26%~50%為2分,51%~75%為3分,≥76%為4分;同時(shí)根據(jù)陽性細(xì)胞染色深淺計(jì)分:不著色為0分,淡黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分。上述兩項(xiàng)評(píng)分相加,0~1分為陰性(-);2~3分為弱陽性(+);4~5分為中度陽性(++);6~7分為強(qiáng)陽性(+++)[3-4]。

    1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 10.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,比較采用 χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤組織與正常卵巢組織HIF-1α表達(dá)比較 HIF-1α在卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤組織中表達(dá)率為64.3%,明顯高于正常卵巢組織的23.7%,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( χ2=4.224,P<0.01),見表1。

    表1 卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤組織與正常卵巢組織HIF-1α表達(dá)比較

    2.2HIF-1α在不同病理類型的卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤中的表達(dá) 不同病理類型的卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤中惡性程度高、預(yù)后差的卵黃囊瘤、未成熟畸胎瘤及胚胎癌HIF-1α表達(dá)高于惡性程度低、預(yù)后較好的無性細(xì)胞瘤,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H=27.081,P=0.000),見表2。

    表2 HIF-1α在不同病理類型的卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤中的表達(dá)

    2.3HIF-1α在不同臨床分期的卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤中的表達(dá) HIF-1α在晚期(Ⅲ~Ⅳ期)卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤中陽性率為100%,明顯高于早期(Ⅰ~Ⅱ期)的50%,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( χ2=3.176,P=0.001),見表3。

    表3 HIF-1α在不同臨床分期的卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤中的表達(dá)

    3 討論

    對(duì)人類腫瘤標(biāo)本的免疫組化分析顯示,在大多數(shù)腫瘤中HIF-1α呈過度表達(dá),Zhong等[5]利用HIF-1α單克隆抗體檢測了HIF-1α在多種腫瘤中的表達(dá),發(fā)現(xiàn)90%的結(jié)腸癌、肺癌及前列腺癌等癌組織中表達(dá)升高,而在腫瘤附近正常組織中沒有或僅有弱陽性表達(dá);Birner等[6]宮頸癌的研究中也得到類似的結(jié)果。本研究顯示卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤組織中HIF-1α的陽性表達(dá)率明顯高于正常卵巢組織(P<0.05),說明HIF-1α可促進(jìn)腫瘤的發(fā)生;樊利芳等[7]用免疫組織化學(xué)方法研究HIF-1α在肺癌中的表達(dá),發(fā)現(xiàn)其與臨床分期,有無轉(zhuǎn)移呈正相關(guān);文獻(xiàn)[8]顯示對(duì)206例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性的乳腺癌標(biāo)本的HIF-1α表達(dá)進(jìn)行分析,免疫組化顯示HIF-1α陽性表達(dá)率為76.2%(157/206)。本研究顯示在卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤中的表達(dá)明顯高于正常卵巢組織,惡性程度高、預(yù)后差的卵黃囊瘤、未成熟畸胎瘤、胚胎癌中的HIF-1α陽性表達(dá)率明顯高于惡性度低的、預(yù)后較好的無性細(xì)胞瘤;Ⅲ~Ⅳ期卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤組織的HIF-1α的陽性表達(dá)率明顯高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05),表明HIF-1α可提示腫瘤的高度侵襲性。

    綜上所述,筆者認(rèn)為HIF-1α在缺氧環(huán)境可促進(jìn)腫瘤發(fā)生與發(fā)展,維持腫瘤生長,故可作為臨床監(jiān)控卵巢惡性生殖細(xì)胞腫瘤發(fā)生、發(fā)展的一個(gè)生物學(xué)標(biāo)志,作為基因治療的靶點(diǎn)。抑制HIF-1α蛋白的表達(dá)及轉(zhuǎn)錄活性,有望成為一種新的治療惡性腫瘤的途徑[9-15]。

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    The Expression and Significance of HIF-1α Marker in Malignant Ovarian Germ Cell Tumor Tissues/

    YAO Mei-zhen,TAN Bu-zhen.//
    Medical Innovation of China,2016,13(30):111-113

    Objective:To investigate the expression of hypoxia inducible factor 1α(HIF-1) in ovarian malignant germ cell tumors and its relationship with clinicopathological features.Method:Immunohistochemical technique was used to detect the expression of HIF-1α in 56 cases of ovarian malignant germ cell tumor and 38 cases of normal ovarian tissue.Result:The expression rate of HIF-1α in ovarian malignant germ cell tumor was 64.3%,which was significantly higher than 23.7% of normal ovarian tissue,the difference was statistically significant( χ2=4.224,P<0.01).Conclusion:HIF-1α promote tumor occurrence and development,maintain tumor growth,can be used as a clinical monitoring of malignant ovarian germ cell tumor biological sign of development and a target for gene therapy.

    Malignant ovarian germ cell tumor; Hypoxia inducible factor 1α; Pathology

    10.3969/j.issn.1674-4985.2016.30.031

    江西省衛(wèi)生廳課題(20073085)

    ①南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院 江西 南昌 330006

    姚美珍

    (2016-08-08) (本文編輯:李穎)

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