加速溶劑萃取-高效液相色譜法測(cè)定方便面中梔子黃色素

陳建中，葛水蓮，楊明建，張 元

（1.邯鄲學(xué)院生命科學(xué)與工程學(xué)院，河北 邯鄲 056005；2.冀南太行山區(qū)野生資源植物研發(fā)中心，河北 邯鄲 056005；3.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110013）

加速溶劑萃取-高效液相色譜法測(cè)定方便面中梔子黃色素

陳建中1,2，葛水蓮1，楊明建1，張 元3

（1.邯鄲學(xué)院生命科學(xué)與工程學(xué)院，河北 邯鄲 056005；2.冀南太行山區(qū)野生資源植物研發(fā)中心，河北 邯鄲 056005；3.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110013）

建立一種檢測(cè)方便面中梔子黃色素的加速溶劑萃取-高效液相色譜方法。采用加速溶劑萃取法萃取方便面，以甲醇為萃取劑，在1 500 psi和50 ℃靜態(tài)循環(huán)提取2 次，用乙腈飽和的正己烷溶液除脂。采用XBridgeTMC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色譜柱，以乙腈-0.1%甲酸溶液為流動(dòng)相，藏花素和藏花酸在二極管陣列檢測(cè)器中的檢測(cè)波長(zhǎng)為441 nm和427 nm進(jìn)行分離分析。結(jié)果表明，藏花素和藏花酸在1.0～20 μg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系（r＞0.999 6）；平均回收率（n=6）在83.64%～94.82%之間；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.92%～2.13%，方法的定量限和檢出限分別為0.5～1.0 μg/g和0.05～0.20 μg/g，本方法快速簡(jiǎn)便、自動(dòng)化程度高、準(zhǔn)確可靠，是一種適合測(cè)定方便面中梔子黃色素的方法。

高效液相色譜；加速溶劑萃??；梔子黃；方便面

梔子黃色素是梔子果實(shí)或藏紅花的提取物，是一種橙紅色液體和黃色粉末的水溶性類(lèi)胡蘿卜天然色素[1-2]，主要成分是藏花素和藏花酸[3-4]。該色素具有降血脂、抑制腫瘤、抗氧化、天然無(wú)毒害，營(yíng)養(yǎng)保健等功效[5-6]。我國(guó)在1989年起就將梔子黃色素列入許可使用的食品添加劑中，廣泛應(yīng)用于飲料、糕點(diǎn)或方便面等各類(lèi)食品中[7-10]。但為避免食品中過(guò)量使用該食品著色劑而造成食品安全問(wèn)題，GB 2760—2014《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定了各類(lèi)食品中梔子黃的最大使用量[11]，且在19 98年發(fā)布了GB/T 17335—1998《食品中梔子黃的測(cè)定》以控制其含量[12]。

梔子黃色素的檢測(cè)方法主要有薄層色譜法[13]、紫外-可見(jiàn)分光光度法[14]、高效液相色譜法[15]等，在提取純化方面檢測(cè)梔子黃色色素用得較廣泛的是紫外-可見(jiàn)分光光度法[16-20]，但高效液相色譜法測(cè)定梔子黃色素準(zhǔn)確高效，在檢測(cè)定量方面越來(lái)越受到親睞[21-23]。各類(lèi)檢測(cè)方法的重點(diǎn)和難點(diǎn)在于優(yōu)化前處理方法，盡可能的提取梔子黃色素，并減少雜質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾，提高檢出限和方法的靈敏度，縮短檢出時(shí)間。目前只有糕點(diǎn)、飲料、酒等簡(jiǎn)單基質(zhì)有國(guó)標(biāo)方法[12]與少量文獻(xiàn)報(bào)道應(yīng)用高效液相色譜法測(cè)定[24-25]，且多以梔子苷為對(duì)照品[13,24]。而在GB 7912—2010《食品添加劑：梔子黃》中規(guī)定藏花素與藏花酸是梔子黃色素的測(cè)定成分，且其分析方法為薄層色譜法。因此以梔子苷為對(duì)照品比較不合理。目前，尚沒(méi)有專(zhuān)門(mén)針對(duì)面條制品中梔子黃色素以藏花素和藏花酸為對(duì)照品的高效液相色譜測(cè)定方法。而目前大多采用水浴加熱回流提取和柱層析法前處理，操作繁雜費(fèi)時(shí)[21-22]，而加速溶劑萃取法具有快速簡(jiǎn)便，使用溶劑少等優(yōu)點(diǎn)，因此本實(shí)驗(yàn)采用加速溶劑萃取法能夠快速簡(jiǎn)便的提取面條制品中梔子黃色素，再液液萃取除去脂肪，采用高效液相色譜法測(cè)定面條制 品中梔子黃色素的含量，并以藏花素和藏花酸為對(duì)照品，以期找到適合面條制品中梔子黃色素的測(cè)定方法，為食品中梔子黃色素的測(cè)定進(jìn)一步提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

桶裝方便面（ 含梔子黃） 市購(gòu)。藏花素和藏花酸（純度＞98%） 美國(guó)Chroma DEX公司；乙腈、甲醇、正己烷（均為色譜純） 美國(guó)Fisher Scientific公司；乙酸（純度＞99.8%，色譜純） 西隴化工有限公司；尼龍濾膜（0.22 μm） 津隆有限公司；超純水（電導(dǎo)率≤0.10 mS/m，25 ℃）。

1.2 儀器與設(shè)備

高效液相色譜儀 美國(guó)Waters公司；ASE350加速溶劑萃取儀 美國(guó)Dionex公司；AB204-S電子天平瑞士Mettler Toledo公司；Milli-Q超純水處理系統(tǒng) 美國(guó)Millipore公司；KQ-500DE型超聲儀 昆山市超聲儀器有限公司；高速臺(tái)式冷凍離心機(jī) 美國(guó)Beckman Coulter公司；FW-100高速萬(wàn)能粉碎機(jī) 北京中興偉業(yè)儀器有限公司；渦旋混勻儀 美國(guó)OSTC公司。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

分別準(zhǔn)確稱取藏花素和藏花酸10.0 mg到10 mL容量瓶中，甲醇溶解后定容，分別制成質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL的儲(chǔ)備液，于-18 ℃冰箱中保存待用。分別準(zhǔn)確移取1 mL藏花素和藏花酸儲(chǔ)備液到同一10 mL容量瓶中，用甲醇稀釋定容制成100 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別移取100、200、500、1 000、2 000 μL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液分別到10 mL容量瓶中，用甲醇稀釋定容至刻度，配成1、2、5、10、20 μg/mL藏花素和藏花酸混合標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液。

1.3.2 樣品前處理

取適量的方便面經(jīng)磨粉機(jī)處理后待用，準(zhǔn)確稱取方便面粉末2.000 g，放到不銹鋼萃取池中10 mL，甲醇為萃取劑，萃取劑體積為10 mL，在50 ℃溫度和1500 psi條件下進(jìn)行加熱和靜態(tài)循環(huán)萃取2次，氮?dú)獯祾?0 s，加速溶劑萃取完成后，用乙腈飽和的正己烷除脂，用氮吹濃縮儀將提取液濃縮10 mL以下，并用甲醇定容至10 mL，然后經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾，供高效液相色譜儀測(cè)定。

1.3.3 色譜條件

色譜柱：XBridgeTMC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相：0 min時(shí)，V（乙腈）∶V（0.1%甲酸溶液）=85∶15；梯度變化后5 min，V（乙腈）∶V（0.1%甲酸溶液）=30∶70；梯度變化后8 min，V（乙腈）∶V（0.1%甲酸溶液）=5∶95；梯度變化后9 min，V（乙腈）∶V（0.1%甲酸溶液）=85∶15；等度變化后12 min，V（乙腈）∶V（0.1%甲酸溶液）=85∶15；流速：1.2 mL/min；柱溫：常溫；二極管陣列（photodiode array，PDA）檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)：441 nm（藏花素），427 nm（藏花酸）；進(jìn)樣量：10 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 高效液相色譜分析條件的選擇

2.1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

以5 μg/mL的藏花素和藏花酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，以PDA為檢測(cè)器，所得光譜圖如圖1所示，藏花素在441 nm波長(zhǎng)處有最大吸收；藏花酸在427 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，因此選擇441 nm作為藏花素的檢測(cè)波長(zhǎng)；選擇427 nm作為藏花酸的檢測(cè)波長(zhǎng)。

圖1 藏花素（A）和藏花酸（B）的PDA光譜圖Fig. 1 Adsorption spectra of crocin (A) and crocetion (B)

2.1.2 流動(dòng)相的選擇

本實(shí)驗(yàn)分別考察乙腈-水、甲醇-水、乙腈-0.1%甲酸溶液、甲醇-0.1%甲酸溶液、甲醇-乙酸銨溶液等作為流動(dòng)相時(shí)，藏花素和藏花酸的出峰情況。結(jié)果表明，50%等度洗脫時(shí)在V（乙腈）-V（0.1%甲酸溶液）峰形較好，乙腈-水、甲醇-水、甲醇-0.1%甲酸溶液、甲醇-乙酸銨溶液作為流動(dòng)相時(shí)，存在峰形矮胖或拖尾嚴(yán)重或無(wú)法看到峰形等現(xiàn)象，這可能是因?yàn)楸粶y(cè)組分與色譜柱上的硅醇基團(tuán)相互作用，引起次級(jí)保留效應(yīng)，造成樣品組分峰拖尾現(xiàn)象。通過(guò)在流動(dòng)相中加入酸性改良劑（如甲酸），有效緩解酸性組分的次級(jí)保留效應(yīng)，使藏花酸的峰形得到明顯改善。但在各種流動(dòng)相的等度洗脫下，待測(cè)成分與雜質(zhì)不能得到良好分離。因此通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相梯度和流速，使藏花素和藏花酸控制在12 min內(nèi)出峰，且使樣品與雜質(zhì)分開(kāi)，分離度良好。因此實(shí)驗(yàn)最終選擇的高效液相色譜條件為0 min時(shí)，V（乙腈）∶V（0.1%甲酸溶液）= 85∶15；梯度變化后5 min，V（乙腈）∶V（0.1%甲酸溶液）=30∶70；梯度變化后8 min，V（乙腈）∶V（0.1%甲酸溶液）=5∶95；梯度變化后9 min，V（乙腈）∶V（0.1%甲酸溶液）=85∶15；等度變化后12 min，V（乙腈）∶V（0.1%甲酸溶液）=85∶15；流速為1.2 mL/min；柱溫為常溫。在12 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)藏花素和藏花酸的分離，如圖2和圖3所示。圖4為方便 面樣品圖中藏花素的光譜圖，以驗(yàn)證樣品中的色譜峰是藏花素。

圖2 梔子黃色素標(biāo)準(zhǔn)品色譜分離圖Fig. 2 Chromatograpm of gardenia yellow standard

圖3 方便面樣品色譜圖Fig. 3 Chromatogram of gardenia yellow in instant noodle

圖4 樣品中藏花素的光譜圖Fig. 4 Absorption spectrum of crocin in sample

2.2 樣品前處理?xiàng)l件優(yōu)化

2.2.1 萃取劑的選擇

圖5 5 種溶劑的回收率Fig. 5 Recoveries of gardenia yellow extracted with fi ve solvents

表1 萃取劑的提取效率（n==66）Table 1 Extraction effi ciency of different extraction solvents (n == 66))

梔子黃色素是一種溶于水、甲醇、乙醇等極性溶劑，不溶于苯、正己烷等非極性溶劑的混合物。實(shí)驗(yàn)選擇水、堿性溶液、甲醇、乙腈、乙酸乙酯的溶劑進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，對(duì)比了5 種提取溶劑的萃取率，如圖5所示，結(jié)果顯示甲醇和溶液的提取率相對(duì)理想，因此實(shí)驗(yàn)選擇考察甲醇溶液提取梔子黃色素。在固定溫度為50 ℃，靜態(tài)時(shí)

間為10 min，循環(huán)2 次；氮?dú)獯祾?0 s。分別考察甲醇、90%甲醇溶液、50%甲醇溶液、10%甲醇溶液、水對(duì)樣品中梔子黃色素的萃取率，結(jié)果如表1所示，甲醇萃取效率整體效果最好；甲醇溶液次之；水對(duì)藏花酸的萃取率偏低，對(duì)藏花素萃取率較高，總體不理想；因此選擇甲醇作為萃取劑。

2.2.2 加速溶劑萃取方法的優(yōu)化選擇

加速溶劑萃取過(guò)程中萃取劑的用量較少，且萃取劑的體積有一定的限制，故不考慮萃取體積的影響。實(shí)驗(yàn)考察了萃取溫度、萃取時(shí)間，結(jié)果如圖6所示，萃取溫度50 ℃的萃取效率比40 ℃的高，60～120 ℃萃取率隨溫度升高有所提高，但重復(fù)性和穩(wěn)定性逐漸變差，說(shuō)明提高溫度可能減弱梔子黃色素與面條制品的吸附力，加快梔子黃色素進(jìn)入溶劑中，同時(shí)溫度過(guò)高影響梔子黃色素的穩(wěn)定性，溫度盡量控制在60 ℃以下，因此選擇50 ℃作為萃取溫度。靜態(tài)萃取時(shí)間在10 min后變化不大，為縮短前處理時(shí)間，靜態(tài)萃取時(shí)間選擇10 min。與傳統(tǒng)的水浴加熱回流法相比較[21]，萃取時(shí)間明顯縮短，萃取溶劑體積明顯減少。

圖6 萃取溫度（A）和萃取時(shí)間（B）對(duì)梔子黃色素萃取率的影響Fig. 6 Infl uence of extraction temperature and time on the recovery of gardenia yellow

2.3 方法評(píng)價(jià)

2.3.1 方法的分離效果和線性關(guān)系

從圖2可知，藏花素和藏花酸在1.3.3節(jié)色譜條件下，梔子黃色素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的分離效果良好。以峰面積（Y）對(duì)質(zhì)量濃度（X）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到的藏花素和藏花酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程、線性范圍和相關(guān)系數(shù)，將標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋至響應(yīng)值是噪音的3 倍（即信噪比RSN=3）為檢出限，加標(biāo)樣品稀釋至響應(yīng)值是噪音的10 倍（即信噪比RSN=10）為定量限，結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果表明，藏花素和藏花酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好。方法的定量限和檢出限分別為0.5～1.0 μg/g和0.05～0.20 μg/g。

表2 梔子黃色素的線性方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍、檢出限和定量限Table 2 Standard curve equations with correlation coeffi cients and limits of detection for gardenia yellow

2.3.2 加標(biāo)回收率和精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

準(zhǔn)確稱取樣品2.00 g，加入混合標(biāo)準(zhǔn)品，加標(biāo)量分別為2、5、10 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL，按照1.3.2節(jié)處理樣品，平行處理6 份。結(jié)果表明，藏花素和藏花酸的平均回收率（n=6）為83.64%～94.82%；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.92%～2.13%，結(jié)果如表3所示。

表3 梔子黃色素加標(biāo)回收率和精密度（n==66）Table 3 Recoveries and precision (relative standard deviation) of gardenia yellow in spiked samples (n == 66))

2.3.3 方法重復(fù)性和穩(wěn)定性

準(zhǔn)確稱取樣品2.000 g，加入1 mL 5 μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照1.3.2節(jié)方法處理樣品，平行處理6份，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.72%～1.82%之間，可見(jiàn)該方法重復(fù)性較好。將其中一個(gè)樣品分別放置0、2、4、8、12 h后，測(cè)定藏花素和藏花酸的峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.89%和1.73%，可見(jiàn)梔子黃色素在12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.4 實(shí)際樣品的測(cè)定結(jié)果

表4 6 個(gè)批次方便面樣品的測(cè)定（n==66）Table 4 Results of determination of gardenia yellow in 6 batches of instant noodles (n == 66))

應(yīng)用本方法對(duì)6 個(gè)批次的桶裝方便面進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表4。GB 2760—2014《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定了面條制品中梔子黃的最大使用量不能超過(guò)1.5 g/kg，樣品中多含藏花素，不含藏花酸，藏花素的含量不超過(guò)國(guó)標(biāo)中對(duì)梔子黃含量的規(guī)定。

3 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)采用加速溶劑萃取法，在一定溫度和壓力條件下減少梔子黃色素對(duì)面條制品的吸附，提高梔子黃色素的萃取率，結(jié)果表明，在50 ℃溫度和1500 psi條件下進(jìn)行以甲醇溶液為萃取劑，萃取劑體積為10 mL，加熱和靜態(tài)循環(huán)萃取2 次，用乙腈飽和的正己烷除脂，藏花素和藏花酸的回收率可達(dá)83.64%～94.82%間，且無(wú)雜質(zhì)干擾，為方便面中梔子黃色素的檢測(cè)方法的建立提供依據(jù)。

[1] 陸偉, 錢(qián)驊, 張衛(wèi)明, 等. 梔子黃色素的提取及精制研究[J]. 中國(guó)食品添加劑, 2010(1): 77-80. DOI:10.3969/ j.issn.1006-2513.2010.01.013.

[2] ZHU Xingyi, MANG Yili, SHEN Fengqiong, et al. Homogenate extraction of gardenia yellow pigment from Gardenia jasminoides Ellis fruit using response surface methodology[J]. Journal of Food Science and Technology, 2014, 51(8): 1575-1581. DOI:10.1007/ s13197-012-0683-2.

[3] 任治軍, 何開(kāi)澤, 譚健, 等. 大孔吸附樹(shù)脂精制梔子黃色素[J]. 食品科學(xué), 2005, 26(11): 157-162. DOI:10.3321/ j.issn:1002-6630.2005.11.034.

[4] 胡居吾, 熊偉, 李雄輝, 等. 大孔樹(shù)脂-溶劑萃取法精制高色價(jià)梔子黃色素的集成技術(shù)研究[J]. 天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā), 2011, 23(2): 304-308. DOI:10.3969/j.issn.1001-6880.2011.02.026.

[5] 梅蕾蕾, 胡曉. 梔子中藏花素的藥理學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué), 2013, 18(7): 837-840.

[6] 唐秋琳, 趙海, 戚天勝, 等. 天然食用黃色素研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)食品添加劑, 2006(2): 68-73. DOI:10.3969/j.issn.1006-2513.2006.02.019.

[7] 邱斌, 陳衛(wèi)平, 王青. 梔子黃色素穩(wěn)定性研究[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā), 2009, 30(9): 190-192. DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2009.09.057.

[8] 陳旭華, 林艷華, 史亞峰, 等. 梔子黃色素在方便面中的應(yīng)用研究[J]. 食品科技, 2007, 32(12): 175-177. DOI:10.3969/ j.issn.1005-9989.2007.12.054.

[9] OZEKI N, UENO E, ITO Y, et al. Analysis of turmeric oleoresin, gardenia yellow, and annatto extract in foods using reversed-phase thin-layer chromatography/scanning densitometry[J]. Journal of the Food Hygienics Society of Japan, 2000, 41(6): 347-352. DOI:10.3358/ shokueishi.41.347.

[10] YANG Wenhan, WANG Jinhua, LI Xiaolin, et al. A new method research for determination of natural pigment crocin yellow in foods by solid-phase extraction ultrahigh pressure liquid chromatography[J]. Journal of Chromatography A, 2011, 1218(11): 1423-1428. DOI:10.1016/j.chroma.2010.12.121.

[11] 衛(wèi)生部. GB2760—2014 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2014.

[12] 中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院勞動(dòng)衛(wèi)生與職業(yè)病研究所. GB/T 17335—1998 食品中梔子黃的測(cè)定[S]. 1998.

[13] 李嚴(yán)巍, 王梅, 閻惠芳, 等. 食品中梔子黃色素的定性、定量方法[J].食品與發(fā)酵工業(yè), 1996(6): 39-42. DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ ts.1966.06.009.

[14] 高麗, 鄧青云, 姜益泉, 等. 梔子黃色素提取及其穩(wěn)定性的研究[J]. 中國(guó)釀造, 2012, 31(5): 176-179. DOI:10.3969/ j.issn.0254-5071.2012.05.048.

[15] 蔣志國(guó), 陳文學(xué), 劉四新, 等. 低速逆流色譜分離制備梔子黃色素中的藏花素[J]. 色譜, 2011, 29(3): 277-280. DOI:10.3724/ SP.J.1123.2011.00277.

[16] 謝鳳霞, 邱祖民, 涂盛輝, 等. 浸提法與超聲波提取法提取梔子黃色素的比較[J]. 南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(理科版), 2005, 29(3): 278-281. DOI:10.3969/j.issn.1006-0464.2005.03.021.

[17] 賀鵬, 羅旭璐, 闞歡, 等. 3種梔子中梔子黃色價(jià)、梔子苷及總皂苷含量比較[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué), 2014(8): 287-288; 289. DOI:10.3969/ j.issn.1002-1302.2014.08.106.

[18] 李雄輝, 趙萍, 季清榮, 等. 不同提取工藝對(duì)梔子黃色素提取效果的比較[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā), 2006, 27(6): 192-194. DOI:10.3969/ j.issn.1005-6521.2006.06.071.

[19] 曲曉蘭, 劉希欣, 高紅莉, 等. 微波-表面活性劑協(xié)同提取梔子黃色素的工藝[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā), 2010, 31(8): 25-27. DOI:10.3969/ j.issn.1005-6521.2010.08.008.

[20] 鐘雪梅, 羅喬奇, 唐敏, 等. 均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)化梔子黃色素的提取工藝[J]. 華西藥學(xué)雜志, 2009, 24(2): 160-162. DOI:10.13375.CNKI. WCJPS.2009.02.004.

[21] 李永利, 張焱, 翟志雷, 等. 高效液相色譜法測(cè)定食品中梔子黃[J]. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2008, 18(1): 72; 150. DOI:10.3969/ j.issn.1004-8685.2008.01.030.

[22] 丁艷, 孫益民, 馬芝森, 等. 高效液相色譜法測(cè)定食品中的梔子黃的研究[J]. 食品科學(xué), 2006, 27(2): 199-202. DOI:10.3321/ j.issn:1002-6630.2006.02.043.

[23] 丁呈華, 曹豐璞, 楊浩, 等. 高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定梔子黃、檸檬黃和日落黃色素[J]. 許昌學(xué)院學(xué)報(bào), 2010, 29(5): 101-102. DOI:10.3969/j.issn.1671-9824.2010.05.030.

[24] 中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì). GB/T 5009.149—2003 食品中梔子黃的測(cè)定[S]. 2003.

[25] 陳艷華, 于中軍. 高效液相色譜法測(cè)定蛋糕中的梔子黃[J]. 中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥, 2010, 24(5): 155. DOI:10.3969/j.issn.1673-7555.2010.24.123.

Determination of Gardenia Yellow in Instant Noodle by Accelerated Solvent Extraction and High Performance Liquid Chromatography

CHEN Jianzhong1,2, GE Shuilian1, YANG Mingjian1, ZHANG Yuan3
(1. College of Life Science and Engineering, Handan College, Handan 056005, China; 2. Wild Resources Plant Research Center of South Hebei Mt. Taihang, Handan 056005, China; 3. School of Pharmacy of China Medical University, Shenyang 110013, China)

A method was developed for the determination of gardenia yellow in instant noodle by accelerated solvent extraction (ASE) and high performance liquid chromatography (HPLC). The crushed samples were extracted twice using ASE with methanol at 50 ℃ and 1 500 psi, followed by defatting using n-hexane saturated with acetonitrile. Then the gardenia yellow were eluted on XBridgeTMC18with a mobile phase composed of acetonitrile and 0.1% formic acid solution, and detected by photo-diode array (PDA) detector at 441 nm for crocin and 427 nm for crocetion. The developed method had a linear range of 1.0□20 μg/mL for the two analytes with good correlation coeffi cients (r ＞ 0.999 6). The mean re coveries were 83.64%□94.82%, with relative standard deviation (RSD) of 0.92%□2.13% (n = 6). The limit of quantitation (LOQ) and the limit of detection (LOD) of this method for gardenia yellow were 0.5□1.0 μg/g and 0.05□0.2 μg/g, respectively. The method proved to be quick, simple, automated, reliable, accurate, and suitable to detect gardenia yellow in instant noodle.

high performance liquid chromatography (HPLC); accelerated solvent extraction (ASE); gardenia yellow; instant noodle

10.7506/spkx1002-6630-201610036

TS202.3

A

1002-6630（2016）10-0208-05

陳建中, 葛水蓮, 楊明建, 等. 加速溶劑萃取-高效液相色譜法測(cè)定方便面中梔子黃色素[J]. 食品科學(xué), 2016, 37(10): 208-212. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201610036. http://www.spkx.net.cn

CHEN Jianzhong, GE Shuilian, YANG Mingjian, et al. Determination of gardenia yellow in instant noodle by accelerated solvent extraction and high performance liquid chromatography[J]. Food Science, 2016, 37(10): 208-212. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201610036. http://www.spkx.net.cn

2015-08-05

河北省科技計(jì)劃項(xiàng)目（13222907；12272502）；邯鄲市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（1422104057-2；1323108093-9）；邯鄲學(xué)院校級(jí)項(xiàng)目（15202）

陳建中（1978—），男，副教授，碩士，研究方向?yàn)樘烊皇乘幹参锘钚晕镔|(zhì)研發(fā)。E-mail：cjzhong@126.com