腹膜透析患者血清鐵調(diào)素-25與鐵代謝的相關(guān)性研究*

梁 衍，金 剛，馮 婷，王曉明

陜西省人民醫(yī)院 腎臟內(nèi)科(西安 710068)

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·論 著·

腹膜透析患者血清鐵調(diào)素-25與鐵代謝的相關(guān)性研究*

梁 衍，金 剛，馮 婷，王曉明

陜西省人民醫(yī)院 腎臟內(nèi)科(西安 710068)

目的 研究持續(xù)不臥床腹膜透析(continuous ambulatory peritoneal dialysis, CAPD)患者血清鐵調(diào)素-25(Hepcidin-25)水平與鐵代謝狀態(tài)及殘余腎功能等之間的關(guān)系。 方法 選擇病情穩(wěn)定且接受6個月以上CAPD治療的患者70例作為CAPD組；體檢中心40例健康者作為對照組。采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA)測定血清Hepcidin-25水平，同時檢測受試者血清鐵、鐵蛋白(Fer)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)、總鐵結(jié)合力(TIBC)、血生化,血常規(guī)，估算腎小球濾過率(eGFR)。Pearson法分析Hepcidin-25與其他臨床指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果 與對照組相比，CAPD組患者血紅蛋白(Hb)及eGFR降低；血肌酐，尿素及全段甲狀旁腺激素升高，組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)。CAPD組的血清鐵、TRF、TIBC明顯降低，F(xiàn)er和Hepcidin-25明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)。Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，CAPD組血清Hepcidin-25水平與Fer呈正相關(guān)(r=0.531，P<0.05)；與Hb及eGFR呈負(fù)相關(guān)(r=-0.675、-0.543,P<0.05)。結(jié)論 CAPD患者血清Hepcidin-25水平升高，與機(jī)體殘余腎功能、貧血狀態(tài)有關(guān)。

腹膜透析；鐵調(diào)素-25；貧血

貧血是慢性腎病的主要并發(fā)癥之一，對持續(xù)不臥床腹膜透析(continuous ambulatory peritoneal dialysis, CAPD)患者生活質(zhì)量及預(yù)后具有直接影響[1]。腎性貧血的關(guān)鍵病因之一在于體內(nèi)鐵元素的缺乏，鐵缺乏還會進(jìn)一步影響紅細(xì)胞生成刺激劑的治療效果[2-3]。因此，監(jiān)測腎性貧血患者體內(nèi)鐵代謝指標(biāo)，有助于及時補(bǔ)充足夠的鐵元素，從而更好地改善腎性貧血。近年研究證實，鐵調(diào)素在人體鐵代謝過程中有重要作用，血清鐵調(diào)素-25(Hepcidin-25)為其主要活性成分,可協(xié)助鑒別絕對鐵缺乏或功能性鐵缺乏。新近研究[4]報道，采取酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)能對人體血清Hepcidin-25水平進(jìn)行嚴(yán)密監(jiān)測，使該方法的運(yùn)用成為可能。本文通過橫斷面研究，進(jìn)一步分析鐵代謝情況與血清Hepcidin-25之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2014年1月至2015年1月在陜西省人民醫(yī)院腎臟內(nèi)科腹膜透析中心隨訪治療的CAPD患者70例(CAPD組)。為患者提供百特PD-2雙聯(lián)系統(tǒng)的腹膜透析液，每日交換量控制在6～8 L。納入標(biāo)準(zhǔn)：1)年齡>18歲；2)接受至少6個月的腹膜透析治療；3)入選時病情穩(wěn)定；4)Hb>100 g/L。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)3個月內(nèi)有出血或輸血史；2)患肝臟疾病、惡性腫瘤及血液系統(tǒng)疾病、慢性阻塞性肺病、活動性結(jié)核、炎性活動性疾病且服用過免疫抑制制劑、經(jīng)靜脈輸注鐵劑的患者；嚴(yán)重心力衰竭、急性冠脈綜合征、有創(chuàng)傷、手術(shù)史等合并因素的患者。另選取同期我院健康體檢者40例作為對照組。CAPD組男42例， 女28例，年齡(45.78±18.59)歲，體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為(22.34±3.26) kg/m2，平均透析時間(36.27±15.35)個月；原發(fā)?。郝阅I小球腎炎33例、高血壓腎損害12例、糖尿病腎病19例、慢性間質(zhì)性腎炎6例。對照組男24例，女16例，年齡(42.95±15.32)歲，BMI(23.45±3.39) kg/m2, 兩組性別、年齡和BMI比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

表1 兩組一般資料比較

1.2 測定指標(biāo)

采用腎臟病飲食調(diào)整簡化公式計算患者腎小球濾過率(eGFR)，男性：eGFR[mL/(min·1.73m2)]=186×(Scr)-1.154×(年齡)-0.203；女性：eGFR[mL/(min·1.73m2)]=186×(Scr)-1.154×(年齡)-0.203×0.742。受試者取清晨空腹靜脈血3 mL，3 000 r/min離心20 min，離心半徑6 cm，分離血清，置-80 ℃冰箱保存待測。檢測前標(biāo)本常溫解凍。血清Hepcidin-25檢測試劑盒購自美國Bioswamp公司,操作步驟嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。另留取空腹靜脈血標(biāo)本采用全自動生化儀檢測血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血尿酸(UA)、血白蛋白(ALB)；采用放射免疫法測定血清鐵蛋白(Fer)；采用放射免疫分析法測定全段甲狀旁腺激素(iPTH)；EDTA抗凝管血液測定血常規(guī)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組生化指標(biāo)比較

與對照組比較，CAPD組的血紅蛋白(Hb)、eGFR、白蛋白(ALB)水平均明顯降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)；血肌酐(SCr)、尿素(BUN)、全段甲狀旁腺激素(iPTH)水平均明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)(表2)。

表2 兩組生化指標(biāo)比較

2.2 兩組鐵代謝指標(biāo)和Hepcidin-25水平比較

與對照組相比，CAPD組的血清鐵、轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)、總鐵結(jié)合力(TIBC)均明顯降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)，鐵蛋白(Fer)和Hepcidin-25水平均明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)(表3)。

2.3 CAPD患者血清Hepcidin-25水平與各變量的相關(guān)性分析

血清Hepcidin-25水平與Fer呈正相關(guān)，與Hb、eGFR呈負(fù)相關(guān)(表4)。

表3 兩組鐵代謝指標(biāo)及Hepcidin-25水平比較

表4 CAPD 患者血清Hepcidin-25水平與各變量的相關(guān)性分析

3 討論

貧血是終末期腎病常見并發(fā)癥之一，其發(fā)病機(jī)制主要為腎臟分泌促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)不足或體內(nèi)鐵缺乏。缺鐵包括相對性缺鐵和絕對性缺鐵兩種，相對性缺鐵又稱功能性缺鐵或鐵釋放障礙[5]。Hepcidin在相對性缺鐵時發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用，該物質(zhì)能促進(jìn)人體肝臟合成早期多肽[6]，其產(chǎn)物由84個氨基酸殘基構(gòu)成，Hepcidin降解之后生成的多肽分子具有不同生物學(xué)活性。其中，Hepcidin-20和Hepcidin-25為Hepcidin的主要存在形式，通常Hepcidin-20以單體形式存在于溶液中，Hepcidin-25則以多聚體形式存在，亦是Hepcidin的主要活性形式[7]。體內(nèi)的Hepcidin-25分泌于血液中起效，并經(jīng)過腎臟排泄，血清 Hepcidin-25濃度和eGFR呈負(fù)相關(guān)，腎功能減退造成Hepcidin-25在體內(nèi)大量蓄積。故慢性腎病(chronic kidney disease, CKD)患者，特別是腎功能嚴(yán)重受損者，其體內(nèi)的Hepcidin-25會明顯增加[8]。

國、內(nèi)外已有研究[9-13]提示，Hepcidin-25在慢性腎衰竭、腎移植、血液透析患者的腎性貧血中起重要作用，其表達(dá)受多因素調(diào)控：機(jī)體貧血、缺氧、EPO增加和鐵缺乏可下調(diào)肝臟Hepcidin mRNA的表達(dá)，炎性反應(yīng)、感染、鐵超負(fù)荷可上調(diào)其表達(dá)。然而，國、內(nèi)外關(guān)于CAPD患者血清Hepcidin-25表達(dá)水平及其相關(guān)因素的研究還很少。因此，本研究旨在闡明影響CAPD患者血清Hepcidin-25水平的相關(guān)因素及其與腎性貧血的關(guān)系，為該類患者腎性貧血的監(jiān)測與治療提供新思路。本研究發(fā)現(xiàn)，CAPD患者即使貧血明顯改善，Hb>100 g/L,血清Hepcidin-25水平仍明顯高于對照組，Hepcidin-25的表達(dá)與eGFR呈負(fù)相關(guān)。該結(jié)果與Troutt等[14]報道一致，與Niihata等[15]在血液透析(hemodialysis,HD)患者中的研究結(jié)果也一致。Hepcidin-25是通過腎臟濾過和降解，Malyszko等[16]亦發(fā)現(xiàn)，鐵調(diào)素與腎功能顯著相關(guān)?；颊哐錒epcidin-25水平可隨腎功能減退而升高，腎功能受損越嚴(yán)重的患者，經(jīng)腎臟排泄的量越低，最終使得其體內(nèi)Hepcidin-25水平顯著升高。此外，Peters等[17]采用質(zhì)譜分析法檢測了84例未接受透析的CKD患者和48例HD患者的血清Hepcidin-25水平，發(fā)現(xiàn)CKD患者和HD患者Hepcidin-25水平與eGFR不相關(guān)；推測Hepcidin-25和eGFR之間無相關(guān)性。但本研究用ELISA法檢測血清Hepcidin-25水平，結(jié)果表明其與eGFR呈負(fù)相關(guān)，上述差異可能是因為不同的檢測方法所致[18]。

本研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，CAPD患者血清Hepcidin-25水平與Fer呈正相關(guān)。作為鐵代謝生物標(biāo)志物，血清Fer能反映患者體內(nèi)鐵的儲存量，與鐵的存儲和利用相關(guān)。因其屬于急性反應(yīng)產(chǎn)物，處于炎癥期時該指標(biāo)會升高，甚至與腫瘤、營養(yǎng)不良等有關(guān)，所以要明確將EPO缺乏、鐵代謝及慢性炎癥等相互作用進(jìn)行區(qū)分尚存在局限性。近年研究[19]表明，監(jiān)測Hepcidin-25水平更有利于區(qū)分單純性鐵缺乏和伴有單核吞噬細(xì)胞組織鐵潴留，以防止過度補(bǔ)鐵導(dǎo)致鐵潴留，前者Hepcidin-25水平下降，而后者升高。監(jiān)測CAPD患者血清Hepcidin-25水平，有利于指導(dǎo)臨床鐵劑的使用。

Hepcidin-25作為一種調(diào)節(jié)激素，可對CAPD患者體內(nèi)的鐵代謝進(jìn)行調(diào)節(jié)，被認(rèn)為是貧血的重要調(diào)節(jié)因子。缺氧、缺鐵及貧血均會抑制該因子的表達(dá)，但炎癥會促進(jìn)其產(chǎn)生[20]。由于多數(shù)CAPD患者的Hepcidin-25表達(dá)存在異常，所以可將其作為檢測CAPD患者是否出現(xiàn)功能性缺鐵的指標(biāo)。目前，CAPD患者Hepcidin-25表達(dá)的研究還不足，我們的研究結(jié)果仍需進(jìn)一步驗證。此外，進(jìn)一步研究Hepcidin-25及其拮抗劑，對CAPD患者貧血或鐵缺乏方面的治療有重要意義。

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The Study on the Correlation between Hepcidin-25 and Iron Metabolism in the Patients with Peritoneal Dialysis

Liang Yan, Jin Gang, Feng Ting, Wang Xiaoming.

Department of Nephrology, Shaanxi Provincial People′s Hospital, Xi′an 710068, China

Objective To study the correlation of Hepcidin-25 with the status of iron metabolism and the residual renal function in patients with continuous ambulatory peritoneal dialysis (CAPD). Methods 70 stable patients who had accepted CAPD treatment for more than six months were selected and divided into the CAPD group; while the other 40 healthy subjects in the medical examination center were selected and divided into the control group. The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was adopted to measure the levels of Hepcidin-25 and the routine methods were used to measure the levels of serum iron, ferritin (Fer), transferrin (TRF), total iron binding capacity (TIBC), blood biochemistry, and blood routine. Meanwhile, the glomerular filtration rate (eGFR) was estimated. Then, the Pearson correlation analysis was used to analyze the correlation of serum Hepcidin-25 with other clinic indexes. Results The levels of eGFR and hemoglobin were significantly lower in the CAPD group than in the control group (P<0.001), but the levels of serum creatinine, serum urea, and serum intact parathyroid hormone were significantly higher in the CAPD group (P<0.001). The levels of serum iron, TRF and TIBC were significantly lower in the CAPD group than in the control group, while the levels of Fer and Hepcidin-25 were significantly higher in the CAPD group (P<0.05). The results of Pearson correlation analysis revealed that serum Hepcidin-25 was positively correlated with Fer (r=0.531,P<0.05)，but it was negatively correlated with Hb (r=-0.675,P<0.05) and eGFR (r=-0.543,P<0.05). Conclusion The elevated levels of serum Hepcidin-25 in the CAPD patients are correlated with the status of anemia and residual renal function.

Peritoneal dialysis; Hepcidin-25; Anemia

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1705.R.20161027.1710.072.html

10.3969/j.issn.1674-2257.2016.05.010

陜西省社會發(fā)展科技攻關(guān)項目(No：2016SF-123)

R692.5

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