五氯聯(lián)苯PCB118對人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞黏附的影響

梁文麗,宋 莉，李卓玉

（山西大學(xué)生物技術(shù)研究所，化學(xué)生物學(xué)與分子工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山西太原030006）

五氯聯(lián)苯PCB118對人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞黏附的影響

梁文麗,宋 莉，李卓玉

（山西大學(xué)生物技術(shù)研究所，化學(xué)生物學(xué)與分子工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山西太原030006）

目的探討五氯聯(lián)苯PCB118對人肝癌細(xì)胞細(xì)胞-基質(zhì)間和細(xì)胞-細(xì)胞間黏附的影響和機(jī)制。方法人肝癌細(xì)胞BEL-7402用PCB118 0.1，1.0和10.0 nmol·L-1分別處理4和6 d后，采用細(xì)胞-基質(zhì)間黏附實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞-基質(zhì)間黏附，細(xì)胞聚集實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞間黏附，實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和Western蛋白印跡法檢測細(xì)胞黏附關(guān)鍵因子CD29、E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白的表達(dá)。結(jié)果與細(xì)胞對照組相比，人肝癌細(xì)胞BEL-7402在PCB118 0.1，1.0和10.0 nmol·L-1處理6 d后，細(xì)胞-基質(zhì)間黏附能力明顯提高（P＜0.05），細(xì)胞-細(xì)胞間黏附明顯降低（P＜0.05）。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示，PCB118明顯提高黏附關(guān)鍵因子CD29和N-鈣黏著蛋白mRNA水平（P＜0.05），顯著降低E-鈣黏著蛋白mRNA水平（P＜0.05）。Western蛋白印跡結(jié)果表明，PCB118處理后，CD29和N-鈣黏著蛋白的蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.01），E-鈣黏著蛋白的蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.01）。結(jié)論P(yáng)CB118影響肝癌細(xì)胞黏附并改變黏附因子CD29、E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白的表達(dá)，這可能與PCB118促進(jìn)肝癌的發(fā)展有關(guān)。

多氯聯(lián)苯；肝癌；細(xì)胞-基質(zhì)間黏附；細(xì)胞間黏附

多氯聯(lián)苯（polychlorinated diphenyls，PCB）是一類人工合成的氯代芳烴類化合物，由于其良好的化學(xué)穩(wěn)定性而廣泛應(yīng)用于塑料加工業(yè)、電力工業(yè)、化工業(yè)和印刷業(yè)等各種生產(chǎn)領(lǐng)域。研究發(fā)現(xiàn)，PCB是典型的持久性有機(jī)污染物，具有持久性、長距離遷移力和生物富集性，已造成全球性污染［1］。PCB主要通過食物消耗和直接接觸暴露于人體，并對人類健康造成嚴(yán)重威脅［2］。據(jù)報(bào)道，PCB與多種健康風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，包括內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育毒性、生殖毒性、免疫毒性以及糖尿病等［3-5］。更嚴(yán)重的是，PCB與多種腫瘤發(fā)生密切相關(guān)，包括乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌和精巢癌等［6-8］。

近年來，肝癌的發(fā)病率和病死率有逐漸升高的趨勢。國際癌癥研究中心數(shù)據(jù)表明，2012年全球＞50%新發(fā)肝癌病例和死亡病例發(fā)生在中國。肝癌的發(fā)生與多種危險(xiǎn)因素密切相關(guān)，包括肝炎病毒感染、黃曲霉素和乙醇等。流行病學(xué)調(diào)查和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，肝癌的患病風(fēng)險(xiǎn)與PCB暴露密切相關(guān)［9-13］，但PCB暴露促進(jìn)肝癌發(fā)病的分子機(jī)制并不清楚。細(xì)胞黏附涉及細(xì)胞-基質(zhì)間黏附和細(xì)胞間黏附，在惡性腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，其破壞是啟動(dòng)轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵［14］。PCB種類繁多，其中以PCB118最具代表性，是用于評估環(huán)境中總PCB的直接指標(biāo)。目前，關(guān)于PCB118暴露對肝癌細(xì)胞黏附的影響及分子機(jī)制未見報(bào)道。本研究旨在探討PCB118暴露對人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞-基質(zhì)間黏附和細(xì)胞間黏附能力的影響，并探討其可能機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器

五氯聯(lián)苯PCB118購自德國Dr.Ehrenstorfer GmbH；RPMI1640培養(yǎng)基購自美國Gibco公司；胎牛血清和實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒購自中國上海生工公司；二甲亞砜（DMSO）、胰蛋白酶和大鼠抗人α-微管蛋白一抗購自美國Sigma公司；Trizol和逆轉(zhuǎn)錄試劑購自日本TaKaRa公司；結(jié)晶紫染色液購自碧云天公司；CD29抗體購自美國BDBiosciences公司；兔抗人E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白一抗購自美國Bioworld公司；HRP標(biāo)記羊抗鼠IgG（H+L）和羊抗兔IgG（H+L）購自美國Invitrogen公司；CO2細(xì)胞恒溫培養(yǎng)箱購自美國Thermo Forma公司；顯微鏡購自日本Olympus公司；Infinite F50酶標(biāo)儀購自瑞士TECAN公司；蛋白質(zhì)電泳儀和電轉(zhuǎn)儀購自美國Bio-Rad公司。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和藥物配制

人肝癌細(xì)胞株BEL-7402由本實(shí)驗(yàn)室保存。細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，用含10%胎牛血清，1%青、鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)基置于37°C，5%CO2的CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞生長到約80%，采用胰酶消化細(xì)胞并傳代，取對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

將PCB118溶于DMSO，配成100 mmol·L-1儲備液。使用時(shí)用RPMI1640培養(yǎng)基稀釋至各個(gè)實(shí)驗(yàn)濃度，空白對照組用0.1%DMSO。

1.3 細(xì)胞-基質(zhì)間黏附實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞-基質(zhì)間黏附率

人肝癌細(xì)胞BEL-7402按每孔2×105細(xì)胞接種于6孔培養(yǎng)板中，細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后，用濃度為0.1，1.0和10.0 nmol·L-1的PCB118分別處理4和6 d，在培養(yǎng)期間，每隔2 d換液并重新加藥。4或6 d后，收集細(xì)胞并調(diào)整密度，按每孔1×104細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板中。隨后置于培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)0.5，1，1.5和2 h后吸出各孔培養(yǎng)基，PBS緩沖液洗滌細(xì)胞2次。每孔加入50μL冰凍甲醇室溫固定。20 min后，用PBS緩沖液洗滌細(xì)胞，加入50μL 0.5%結(jié)晶紫染色液室溫染色20 min，然后用PBS緩沖液洗滌細(xì)胞，再加入50μL 1%SDS溶解。室溫孵育10 min后，于酶標(biāo)儀570 nm波長下測定吸光值（A）。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。細(xì)胞-基質(zhì)間黏附率（%）=實(shí)驗(yàn)組A570nm/對照組A570nm×100%。

1.4 細(xì)胞聚集實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞間黏附率

PCB118 0.1，1.0和10.0 nmol·L-1分別處理人肝癌細(xì)胞BEL-7402 4和6 d，在培養(yǎng)期間，每隔2 d換液并重新加藥。4或6 d后，按每孔5×105細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板。然后置于37°C，轉(zhuǎn)速80次·min-1搖床上振蕩1 h。倒置顯微鏡（20×）下統(tǒng)計(jì)細(xì)胞與細(xì)胞間成團(tuán)數(shù)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。處理組細(xì)胞間黏附率（%）=實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞間成團(tuán)數(shù)/細(xì)胞對照組細(xì)胞間成團(tuán)數(shù)×100%。

1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測CD29、E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白mRNA表達(dá)

人肝癌細(xì)胞BEL-7402按每孔1×105細(xì)胞接種于12孔培養(yǎng)板中，PCB118 0.1，1.0和10.0 nmol·L-1分別處理4和6 d，培養(yǎng)期間，每隔2 d換液并重新加藥。4或6 d后，收集細(xì)胞，按總RNA提取試劑盒說明書提取。然后按逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明，將提取的總RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。按照實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒說明進(jìn)行PCR。15μL PCR的反應(yīng)體系如下：4.9μL H2O，2μL cDNA，0.6μL的上游和下游引物和7.5μL SYBR Premix Ex TaqTM。用GAPDH基因?qū)δ康幕駽D29、E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白mRNA表達(dá)進(jìn)行均一化處理?；虮磉_(dá)變化的計(jì)算采用倍增變化率，基因倍增變化率=2-△△Ct（ΔCt為目的基因和內(nèi)參照基因Ct值的差值）。PCR反應(yīng)引物如表1。

Tab.1 Primer sequences of CD29，E-cadherin，N-cadherin and GAPDH for real-time quantitative PCR

1.6 Western蛋白印跡法檢測CD29、E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白表達(dá)

人肝癌細(xì)胞BEL-7402按每孔1×106細(xì)胞接種于60 mm培養(yǎng)皿中，用PCB118 0.1，1.0和10.0 nmol·L-1處理6 d，在培養(yǎng)期間，每隔2 d換液并重新加藥。6 d后，收集細(xì)胞，加入細(xì)胞裂解液裂解10 min，13 000×g，4°C離心10 min，收集上清。BCA法測蛋白濃度。加入5×SDS蛋白上樣緩沖液，100°C金屬浴5 min后，進(jìn)行10%SDS-PAGE凝膠電泳。電泳后，分離的蛋白條帶轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，5%脫脂奶粉封閉1 h后，4°C一抗孵育過夜，TBST洗膜2次。然后加入二抗室溫孵育1 h，TBST洗膜2次。最后于暗室化學(xué)發(fā)光液顯像。使用Image J分析軟件對蛋白條帶進(jìn)行積分吸光度分析，以目標(biāo)蛋白條帶的積分吸光度值與對應(yīng)的α-微管蛋白積分吸光度值的比值表示目標(biāo)蛋白的相對表達(dá)水平。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 PCB118對人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞-基質(zhì)間黏附的影響

與細(xì)胞對照組相比，PCB118 0.1，1.0和10.0 nmol·L-1處理人肝癌細(xì)胞BEL-7402 4 d后，細(xì)胞-基質(zhì)間黏附未發(fā)生明顯變化。表2顯示，當(dāng)不同濃度的PCB118處理人肝癌細(xì)胞BEL-7402 6 d后，細(xì)胞-基質(zhì)間黏附率增大。與細(xì)胞對照組相比，PCB118 0.1，1.0和10.0 nmol·L-1處理明顯提高BEL-7402細(xì)胞-基質(zhì)間黏附能力（P＜0.05）。

Tab.2 Effect of PCB118 exposure on cell-matrix adhesion of human hepatoma cells BEL-7402

2.2 PCB118對人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞間黏附的影響

PCB118 0.1，1.0和10.0 nmol·L-1處理人肝癌細(xì)胞BEL-7402 4 d后，與細(xì)胞對照組相比，細(xì)胞間黏附未發(fā)生明顯變化。當(dāng)不同濃度的PCB118處理人肝癌細(xì)胞BEL-7402 6 d后，細(xì)胞間黏附率降低。與細(xì)胞對照組相比，PCB118 0.1，1.0和10.0 nmol·L-1處理明顯降低BEL-7402細(xì)胞間黏附能力，細(xì)胞間黏附率分別降低了（20.0±5.2）%，（26.8±4.8）%和（20.9±7.7）%（P＜0.05）（圖1）。

Fig.1 Effect of PCB118 exposure on cell-cell adhesion of human hepatoma cells BEL-7402.*P＜0.05，**P＜0.01，compared with controlgroup.

2.3 PCB 118對人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞黏附因子CD29、E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白基因表達(dá)的影響

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（圖2）結(jié)果顯示，與細(xì)胞對照組相比，PCB118 0.1，1.0和10 nmol·L-1處理人肝癌細(xì)胞BEL-7402 4 d后，黏附因子CD29，E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白的mRNA相對表達(dá)均無明顯變化；處理6 d后，CD29 mRNA水平分別是細(xì)胞對照組的1.4±0.1，1.8±0.2和（1.7±0.1）倍（P＜0.05）（圖2A），E-鈣黏著蛋白mRNA水平分別為細(xì)胞對照組的（87±9）%，（80±4）%和（80±6）%（圖2B），N-鈣黏著蛋白mRNA水平分別是細(xì)胞對照組的2.2±0.2，2.3±0.3和（2.1±0.3）倍（圖2C）。

Fig.2 Effect of PCB118 on relative mRNA expression of CD29（A），E-cadherin（B）and N-cadherin（C）in human hepatoma cells BEL-7402.*P＜0.05，**P＜0.01，compared with controlgroup.

2.4 PCB118對人肝癌細(xì)胞BEL-7402黏附因子CD29、E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白蛋白表達(dá)的影響

Western蛋白印跡檢測（圖3）表明，BEL-7402細(xì)胞經(jīng)PCB1180.1，1.0和10.0nmol·L-1處理6d后，CD29蛋白表達(dá)顯著升高，分別為細(xì)胞對照組的1.5，1.7和1.5倍（P＜0.01）；E-鈣黏著蛋白的蛋白表達(dá)顯著降低，分別為細(xì)胞對照組的73.4%，49.3%和51.4%（P＜0.01）；N-鈣黏著蛋白的蛋白表達(dá)顯著升高，分別是細(xì)胞對照組的1.4，1.5和1.5倍（P＜0.01）。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，PCB118暴露能明顯提高人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞-基質(zhì)間黏附能力，顯著降低細(xì)胞間黏附能力，提高黏附關(guān)鍵因子CD29和N-鈣黏著蛋白的表達(dá)水平，降低E-鈣黏著蛋白的表達(dá)水平。這些結(jié)果提示，PCB118可能通過改變肝癌細(xì)胞的黏附能力進(jìn)而促進(jìn)肝癌的進(jìn)展。

細(xì)胞的黏附能力在腫瘤的轉(zhuǎn)移過程中扮演了十分關(guān)鍵的角色。在惡性腫瘤轉(zhuǎn)移過程中，同型細(xì)胞間黏附能力的降低導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞從原發(fā)瘤上脫落。細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間的黏附能力增強(qiáng)使得腫瘤細(xì)胞易于游離出基底膜，這一過程是腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的始動(dòng)步驟。隨后，腫瘤細(xì)胞經(jīng)血循環(huán)、淋巴道、體腔等到達(dá)繼發(fā)組織器官從而形成相同性質(zhì)的轉(zhuǎn)移瘤［15］。本研究發(fā)現(xiàn)，PCB118暴露人肝癌細(xì)胞BEL-74024d后并未對人肝癌細(xì)胞BEL-7402的細(xì)胞黏附有明顯作用，而在暴露6d后明顯提高細(xì)胞-基質(zhì)間黏附能力并降低細(xì)胞間黏附能力，推測這可能是PCB118對癌細(xì)胞的慢性作用結(jié)果導(dǎo)致。上述結(jié)果表明，PCB118暴露明顯改變?nèi)烁伟┘?xì)胞的細(xì)胞黏附能力，這一過程可能是PCB118促進(jìn)肝癌進(jìn)展的重要機(jī)制之一。

細(xì)胞黏附因子在調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附中發(fā)揮重要作用。其中整合素是介導(dǎo)細(xì)胞和基質(zhì)之間連接的細(xì)胞表面跨膜受體，主要由α和β亞單位組成異構(gòu)二聚體。CD29是整合素βl亞單位，介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)黏附作用［16］，其能通過提高細(xì)胞與基質(zhì)黏附進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移。傅遍紅等［17］的實(shí)驗(yàn)表明，CD29分子在肝癌細(xì)胞株的細(xì)胞膜表面具有較強(qiáng)的表達(dá)，表達(dá)率達(dá)95.78%，李興睿等［18］也證實(shí)了整合素β1在肝癌細(xì)胞中的陽性表達(dá)率顯著高于非肝癌組織，CD29可作為判斷肝癌惡性程度和侵襲性的重要指標(biāo)之一。本研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)濃度為0.1，1.0和10.0nmol·L-1的PCB118暴露人肝癌細(xì)胞BEL-74024d后，CD29mRNA水平未發(fā)生明顯改變；而PCB118暴露時(shí)間延長至6d，CD29 mRNA和蛋白水平顯著升高。這一結(jié)果與細(xì)胞基-質(zhì)間黏附實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。此外，這些結(jié)果提示，PCB118暴露促進(jìn)人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞-基質(zhì)間黏附能力可能與其提高CD29的表達(dá)相關(guān)。

E-鈣黏著蛋白在維持上皮細(xì)胞間黏附中發(fā)揮重要作用，其是細(xì)胞間黏附的負(fù)調(diào)節(jié)因子［19］。E-鈣黏著蛋白能抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。在腫瘤進(jìn)展中，E-鈣黏著蛋白功能缺失引起細(xì)胞間黏附能力降低，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。在40%的肝癌樣本中觀察到E-鈣黏著蛋白表達(dá)的降低［20］。N-鈣黏著蛋白也是一個(gè)連接蛋白，并且調(diào)節(jié)細(xì)胞間黏附能力。本研究發(fā)現(xiàn)，與細(xì)胞間黏附實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致，PCB118暴露人肝癌細(xì)胞BEL-74024d對E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白表達(dá)沒有明顯的影響；當(dāng)PCB118暴露6d后，E-鈣黏著蛋白表達(dá)明顯降低，而N-鈣黏著蛋白的表達(dá)明顯升高。上述結(jié)果表明，PCB118暴露抑制人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞間黏附能力可能與其影響E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白的表達(dá)相關(guān)。此外，E-鈣黏著蛋白和N-鈣黏著蛋白也參與上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesene?hymaltransition，EMT）。EMT改變表現(xiàn)在形態(tài)改變、功能改變和表型分子表達(dá)改變，其中E-鈣黏著蛋白表達(dá)減少，N-鈣黏著蛋白表達(dá)升高是EMT的一個(gè)重要機(jī)制［21］。因此，PCB118暴露人肝癌細(xì)胞BEL-7402后，可能同時(shí)影響了腫瘤細(xì)胞的上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化。

Fig.3EffectofPCB118onproteinexpressionofCD29，E-cadherinandN-cadherininhumanhepatomacells BEL-7402byWesternblotting.Bwasthesemiquantitative resultofA.*P＜0.05，**P＜0.01，comparedwithcontrol group.

綜上所述，PCB118暴露明顯影響人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞黏附能力，并改變黏附關(guān)鍵因子CD29、N-鈣黏著蛋白和E-鈣黏著蛋白的表達(dá)水平，這可能是PCB118促進(jìn)肝癌進(jìn)展的重要機(jī)制之一。

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Effect of PCB118 on celladhesion of human hepatocellular carcinoma cells BEL-7402

LIANG Wen-li，SONG Li，LIZhuo-yu
（Key Laboratory of ChemicalBiology and Molecular Engineering of the Ministry of Education，Institute of Biotechnology，ShanxiUniversity，Taiyuan 030006，China）

OBJECTIVE To investigate the effects and mechanism of PCB118 on cell-matrix and cell-celladhesion in human hepatocellular carcinoma cells.METHODS Human hepatocellular carcinoma cells BEL-7402 were treated with PCB118 0.1，1.0 and 10.0 nmol·L-1for 4 or 6 d，respectively.Then the cell-matrix adhesion assay and cell aggregation experiments were conducted to study the effect of PCB118 on cell-matrix adhesion and cell-celladhesion in BEL-7402 cells.Quantitative real-time PCR and Western blotting methods were employed to assess the expression of key cytokines CD29，N-cadherin and E-cadherin.RESULTS The results showed that the cell-matrix adhesion ability ofhuman hepato?cellular carcinoma cells BEL-7402 were significantly increased（P＜0.05）after treatment with PCB118 0.1，1.0 and 10.0 nmol·L-1for 6 d，whereas the cell-celladhesion ability was significantly reduced（P＜0.05）.Exposure to PCB118（0.1，1.0 and 10.0 nmol·L-1）for 6 d induced significantupregulation ofthe mRNA expression levels of CD29 and N-cadherin along with the downregulation of E-cadherin（P＜0.05）. Western blotting analysis revealed that PCB118 exposure significantly increased protein expressions of CD29 and N-cadherin but reduced E-cadherin protein level（P＜0.01）.CONCLUSION PCB118 exposure affects the expression of CD29，N-cadherin and E-cadherin，which may be involved in PCB118-induced alteration ofcelladhesion ofhepatocellular carcinoma cellline BEL-7402.

polychlorinated diphenyls；hepatocellular carcinoma；cell-matrix adhesion；cell-cell adhesion

The project supported by National Natural Science Foundation of China（21207084）；National Natural Science Foundation of China（31271516）；and Natural Science Foundation of Shanxi Province（2014011027-5）

SONG Li，E-mail：lsong@sxu.edu.cn，Tel：（0351）7017774

R114

A

1000-3002-（2016）05-0558-06

10.3867/j.issn.1000-3002.2016.05.012

2015-09-27接受日期：2016-02-25）

（本文編輯：喬 虹）

國家自然科學(xué)基金（21207084）；國家自然科學(xué)基金（31271516）；山西省自然科學(xué)基金（2014011027-5）

梁文麗，女，碩士研究生，主要從事環(huán)境毒理學(xué)研究。

宋莉，E-mail：lsong@sxu.edu.cn，Tel：（0351）7017774