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    HIF—1α因子標記在卵巢惡性生殖細胞腫瘤組織中的表達及意義

    2016-11-28 01:15:25姚美珍譚布珍
    中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新 2016年30期
    關(guān)鍵詞:生殖細胞免疫組化惡性

    姚美珍+譚布珍

    【摘要】 目的:探討缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)在卵巢惡性生殖細胞腫瘤中的表達及與臨床病理特征的關(guān)系。方法:采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測56例卵巢惡性生殖細胞腫瘤組織和38例正常卵巢組織中HIF-1α的表達因子。結(jié)果:HIF-1α在卵巢惡性生殖細胞腫瘤組織中表達率為64.3%,明顯高于正常卵巢組織的23.7%,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義( 字2=4.224,P<0.01)。結(jié)論:HIF-1α在缺氧環(huán)境下可促使腫瘤發(fā)生與發(fā)展,維持腫瘤生長,可作為臨床監(jiān)控卵巢惡性生殖細胞腫瘤發(fā)生、發(fā)展的一個生物學(xué)標志和基因治療靶點。

    【關(guān)鍵詞】 卵巢惡性生殖細胞腫瘤; HIF-1α; 病理

    【Abstract】 Objective:To investigate the expression of hypoxia inducible factor 1α(HIF-1) in ovarian malignant germ cell tumors and its relationship with clinicopathological features.Method:Immunohistochemical technique was used to detect the expression of HIF-1α in 56 cases of ovarian malignant germ cell tumor and 38 cases of normal ovarian tissue.Result:The expression rate of HIF-1α in ovarian malignant germ cell tumor was 64.3%,which was significantly higher than 23.7% of normal ovarian tissue,the difference was statistically significant( 字2=4.224,P<0.01).Conclusion:HIF-1α promote tumor occurrence and development,maintain tumor growth,can be used as a clinical monitoring of malignant ovarian germ cell tumor biological sign of development and a target for gene therapy.

    【Key words】 Malignant ovarian germ cell tumor; Hypoxia inducible factor 1α; Pathology

    First-authors address:The Second Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330006,China

    doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2016.30.031

    卵巢惡性生殖細胞腫瘤是一種復(fù)雜而高度惡性的腫瘤,發(fā)展快,易復(fù)發(fā),預(yù)后差,死亡率高。缺氧誘導(dǎo)因子-1(HIF-1)是在缺氧條件下廣泛存在于哺乳動物和人體內(nèi)的一種轉(zhuǎn)錄因子,由α和β兩個亞基組成,對維持腫瘤細胞能量代謝、細胞增殖和血管生成具有很重要的作用,其中HIF-1α是決定HIF-1活性的缺氧調(diào)控亞基,可特異性的作用于氧反應(yīng)通路,活性受氧濃度調(diào)節(jié)[1-2]。本研究采用免疫組化SP法,測定卵巢惡性生殖細胞腫瘤組織和正常卵巢組織中HIF-1α的表達,旨在探討卵巢惡性生殖細胞腫瘤的HIF-1α表達及其與臨床病理分型及分期之間的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選擇本院2012年1月-2015年7月手術(shù)治療并經(jīng)病理證實的卵巢惡性生殖細胞腫瘤患者組織標本56例和正常受試者卵巢組織標本38例,卵巢惡性生殖細胞腫瘤中包括卵巢內(nèi)胚竇瘤16例,無性細胞瘤20例,未成熟畸胎瘤17例,胚胎癌

    3例;患者年齡12~36歲,平均23歲;按照2000年FIGO臨床病理分期標準,Ⅰ期20例,Ⅱ期20例,Ⅲ期14例,Ⅳ期2例,Ⅰ、Ⅱ為早期,Ⅲ、Ⅳ期為晚期。正常卵巢組織受試者年齡15~35歲,平均24歲,均來自不孕癥腹腔鏡探查行卵巢活檢手術(shù),病理證實卵巢組織無異常者。兩組年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

    1.2 方法 免疫組化SP法:石蠟切片脫蠟至水,3%的過氧化氫室溫孵育10 min,微波修復(fù),正常山羊血清封閉,滴加一抗(兔抗人缺氧誘導(dǎo)因子-1α單克隆抗體濃縮液),4 ℃過夜,依次滴加生物素標記二抗,辣根酶標記鏈霉卵白素工作液,DAB顯色,復(fù)染,酒精脫水,二甲苯透明,封固。用已知陽性片作陽性對照,用PBS代替一抗作陰性對照。

    1.3 免疫組化結(jié)果判定標準 采用Fromovitz陽性細胞半定量分級法。HIF-1α陽性判定標準為腫瘤細胞的胞質(zhì)或胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。先根據(jù)陽性細胞占腫瘤細胞的百分數(shù)計分,≤5%為0分,6%~25%為1分,26%~50%為2分,51%~75%為3分,≥76%為4分;同時根據(jù)陽性細胞染色深淺計分:不著色為0分,淡黃色為1分,棕黃色為

    2分,棕褐色為3分。上述兩項評分相加,0~1分為陰性(-);2~3分為弱陽性(+);4~5分為中度陽性(++);6~7分為強陽性(+++)[3-4]。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 10.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,計量資料用均數(shù)±標準差(x±s)表示,比較采用t檢驗;計數(shù)資料以率(%)表示,比較采用 字2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 卵巢惡性生殖細胞腫瘤組織與正常卵巢組織HIF-1α表達比較 HIF-1α在卵巢惡性生殖細胞腫瘤組織中表達率為64.3%,明顯高于正常卵巢組織的23.7%,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義( 字2=4.224,P<0.01),見表1。

    2.2 HIF-1α在不同病理類型的卵巢惡性生殖細胞腫瘤中的表達 不同病理類型的卵巢惡性生殖細胞腫瘤中惡性程度高、預(yù)后差的卵黃囊瘤、未成熟畸胎瘤及胚胎癌HIF-1α表達高于惡性程度低、預(yù)后較好的無性細胞瘤,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(H=27.081,P=0.000),見表2。

    2.3 HIF-1α在不同臨床分期的卵巢惡性生殖細胞腫瘤中的表達 HIF-1α在晚期(Ⅲ~Ⅳ期)卵巢惡性生殖細胞腫瘤中陽性率為100%,明顯高于早期(Ⅰ~Ⅱ期)的50%,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義( 字2=3.176,P=0.001),見表3。

    3 討論

    對人類腫瘤標本的免疫組化分析顯示,在大多數(shù)腫瘤中HIF-1α呈過度表達,Zhong等[5]利用HIF-1α單克隆抗體檢測了HIF-1α在多種腫瘤中的表達,發(fā)現(xiàn)90%的結(jié)腸癌、肺癌及前列腺癌等癌組織中表達升高,而在腫瘤附近正常組織中沒有或僅有弱陽性表達;Birner等[6]宮頸癌的研究中也得到類似的結(jié)果。本研究顯示卵巢惡性生殖細胞腫瘤組織中HIF-1α的陽性表達率明顯高于正常卵巢組織(P<0.05),說明HIF-1α可促進腫瘤的發(fā)生;樊利芳等[7]用免疫組織化學(xué)方法研究HIF-1α在肺癌中的表達,發(fā)現(xiàn)其與臨床分期,有無轉(zhuǎn)移呈正相關(guān);文獻[8]顯示對206例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性的乳腺癌標本的HIF-1α表達進行分析,免疫組化顯示HIF-1α陽性表達率為76.2%(157/206)。本研究顯示在卵巢惡性生殖細胞腫瘤中的表達明顯高于正常卵巢組織,惡性程度高、預(yù)后差的卵黃囊瘤、未成熟畸胎瘤、胚胎癌中的HIF-1α陽性表達率明顯高于惡性度低的、預(yù)后較好的無性細胞瘤;Ⅲ~Ⅳ期卵巢惡性生殖細胞腫瘤組織的HIF-1α的陽性表達率明顯高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05),表明HIF-1α可提示腫瘤的高度侵襲性。

    綜上所述,筆者認為HIF-1α在缺氧環(huán)境可促進腫瘤發(fā)生與發(fā)展,維持腫瘤生長,故可作為臨床監(jiān)控卵巢惡性生殖細胞腫瘤發(fā)生、發(fā)展的一個生物學(xué)標志,作為基因治療的靶點。抑制HIF-1α蛋白的表達及轉(zhuǎn)錄活性,有望成為一種新的治療惡性腫瘤的途徑[9-15]。

    參考文獻

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    (收稿日期:2016-08-08) (本文編輯:李穎)

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