平菇菌絲對(duì)番茄種子萌發(fā)及其苗期生長(zhǎng)的影響

肖射華+李玉中+吳婷婷+盧佳豪+湯瑩+楊雯冰

摘 要：為了解平菇菌絲對(duì)番茄種子萌發(fā)及其苗期生長(zhǎng)的影響，以番茄品種“合作903大紅番茄”為材料，在皿內(nèi)測(cè)定了平菇菌絲對(duì)番茄種子萌發(fā)的影響，在盆栽條件下測(cè)定了平菇菌絲發(fā)酵液（含菌絲）對(duì)番茄苗期生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明，當(dāng)平菇菌絲和番茄種子同時(shí)接種時(shí)，種子的發(fā)芽指數(shù)為89.72，而長(zhǎng)滿平菇菌絲后再撒播種子的處理中種子發(fā)芽指數(shù)為78.30；平菇菌絲發(fā)酵液處理濃度為其原液濃度的50%時(shí)對(duì)番茄苗的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，當(dāng)其處理濃度>75%時(shí)，抑制番茄幼苗的生長(zhǎng)。平菇菌絲對(duì)番茄種子的萌發(fā)有一定的抑制作用，發(fā)酵液在低濃度時(shí)促進(jìn)番茄苗生長(zhǎng)，高濃度下抑制其生長(zhǎng)。

關(guān)鍵詞：番茄種子；平菇菌絲；種子萌發(fā)；苗期生長(zhǎng)

中圖分類號(hào)：S641.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2016.10.005

Abstract： In order to understand the mycelium of Pleurotus ostreatus effect on germination and seedling growth of tomato， the effects of mycelium and fermentation filtrate of P. ostreatus were test on tomato seed germination rate， germination index and seedling growth with "Hezuo 903 big red " tomato as experimental materials in CMA plates and pots. The results showed that the mycelium of P. ostreatus had some effect on tomato seed germination inhibition. The inhibitory effect was higher when the mycelium increased. Seed germination index was 89.72 when the fungus and seed were inoculated in the same time on CMA plates. The germination index was 78.30 when the seed inoculated the plates after the mycelium covered culture dish. Compared with the control group， 50% of the intial fermentation broth concentration of P. ostreatus mycelium has some growth promoting effect on tomato seedlings. But when the concentration is more than75%， the growth of tomato seedling was inhibited. All in all， the hypha of P. ostreatus can inhibit the tomato seed germination， and its fermentation broth can promote tomato seedling growth in low concentration but inhibit in high concentrations. This study provided certain scientific guidance on the prevention of root knot nematode of tomato by the mycelium of P. ostreatus.

Key words： tomato； the mycelium of Pleurotus ostreatus； seed germination； seedling growth

番茄（Lycopersicon esculentum Mill.），又名西紅柿，是茄科番茄屬中的草本植物，其果實(shí)屬多汁漿果類，經(jīng)常食用不僅可補(bǔ)充各種維生素和礦物質(zhì)，且具美容、防衰老和防癌的功效，世界各國(guó)均有栽培 [1-2]。目前，我國(guó)溫室大棚蔬菜種植方式的迅速推廣，造成作物的連作指數(shù)增加，重茬嚴(yán)重，再加上種植地封閉、高溫和潮濕的環(huán)境非常適合病害的生長(zhǎng)繁殖，從而導(dǎo)致設(shè)施番茄根結(jié)線蟲 （Meloidogyne spp.）病害發(fā)生嚴(yán)重[3-4]。番茄受侵染后根系形成大量根結(jié)，輕者減產(chǎn)20%～30%，重者減產(chǎn)達(dá)50%，甚至絕收[5]。

在番茄生產(chǎn)中，根結(jié)線蟲的防治不容忽視。在植物線蟲防治方面，有些有關(guān)平菇防治根結(jié)線蟲的報(bào)道。李玉中等[6]在溫室條件下，測(cè)定了不同品種的平菇菌絲對(duì)番茄上南方根結(jié)線蟲病防治效果，發(fā)現(xiàn)對(duì)番茄根結(jié)抑制率在47.83%～56.52%之間，且對(duì)番茄的生長(zhǎng)均有一定的促進(jìn)作用。Marino等[7]報(bào)道了溫室條件下，椰子纖維培養(yǎng)的平菇菌絲與滅菌土壤以1∶3比例混合，對(duì)萵苣上南方根結(jié)線蟲的根結(jié)和卵塊的產(chǎn)生均有明顯的抑制效果。以上報(bào)道，是在根結(jié)線蟲存在的情況下進(jìn)行的試驗(yàn)，在沒有根結(jié)線蟲危害時(shí)，平菇菌絲對(duì)植物的生長(zhǎng)的影響怎樣，有待進(jìn)一步研究。因此，文章研究平菇菌絲對(duì)番茄種子萌發(fā)和苗生長(zhǎng)的影響，以期為平菇菌絲用于番茄上的根結(jié)線蟲病的防治提供一些科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

番茄品種：“合作903大紅番茄”（上海番茄研究所）；平菇菌種： 黑平菇；供試土壤：來自衡陽(yáng)師范學(xué)院生命科學(xué)與環(huán)境學(xué)院護(hù)綠創(chuàng)綠協(xié)會(huì)的種植園。

培養(yǎng)基：玉米粉瓊脂（CMA）培養(yǎng)基（配方：玉米粉20 g，瓊脂20 g，1 000 mL水）；馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基（配方：去皮土豆200 g，葡萄糖20 g，瓊脂條20 g，1 000 mL水）；馬鈴薯葡萄糖（PD）培養(yǎng)液：不含瓊脂的PDA。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 平菇菌絲對(duì)番茄種子萌發(fā)的影響 將番茄種子用55 ℃溫水浸泡4 h后，用3%的次氯酸鈉消毒l5 min，再用無菌水沖洗3～4次，取顆粒大小一致、飽滿的種子分別撒布于長(zhǎng)滿平菇菌絲的CMA平板（直徑90 mm）、平菇菌絲長(zhǎng)滿皿底一半的CMA平板和平菇菌絲及番茄種子同時(shí)接種的CMA平板上，以不接菌為對(duì)照，每處理3個(gè)皿，每皿撒播30粒，保鮮膜封口，28 ℃恒溫光照培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3，5 d，每天光照10 h，黑暗14 h。番茄種子芽長(zhǎng)超過1 mm計(jì)為發(fā)芽種。5 d時(shí)記錄各試驗(yàn)組中培養(yǎng)皿內(nèi)種子的發(fā)芽數(shù)，參考吳麗君等[8]的方法計(jì)算種子的發(fā)芽勢(shì)（GE）、發(fā)芽率（GP）、發(fā)芽指數(shù)（GI）、簡(jiǎn)化活力指數(shù)（GS）、G值、相對(duì)發(fā)芽指數(shù)（RGI）以及相對(duì)傷害率（RHP）等生理指標(biāo)。計(jì)算公式如下：

發(fā)芽勢(shì)：GE=3 d內(nèi)種子發(fā)芽數(shù)/供試種子總數(shù)×100%；

發(fā)芽率：GP=5 d種子發(fā)芽數(shù)/供試種子總數(shù)×100%；

發(fā)芽指數(shù)：GI=∑（Gt/Dt） （Dt：發(fā)芽日數(shù)，Gt：在t日內(nèi)的發(fā)芽數(shù)）；

G值=苗總鮮重/育苗天數(shù)；

簡(jiǎn)化活力指數(shù)：GS=GP×S （GP：發(fā)芽率，S：幼苗平均總生長(zhǎng)量）

相對(duì)發(fā)芽指數(shù)：RGI=平菇菌絲處理發(fā)芽指數(shù)/對(duì)照發(fā)芽指數(shù)×100%

相對(duì)傷害率：RHP=（對(duì)照發(fā)芽粒數(shù)-各處理發(fā)芽粒數(shù)）/對(duì)照發(fā)芽粒數(shù)×100%

1.2.2 平菇菌絲發(fā)酵液的制備 將在PDA平板上活化的平菇菌絲接種到100 mL PD培養(yǎng)液中（250 mL錐形瓶），每瓶接種直徑6 mm的菌圓片5片，28 ℃、180 r·min-1的搖床中培養(yǎng)7 d，里面懸浮大量的菌絲球，即為平菇菌絲發(fā)酵液原液。用PD培養(yǎng)液與發(fā)酵液原液按照3∶1，1∶1和1∶3的比例配制溶液，制得為原液75%，50%，25%的溶液，用于番茄苗的澆灌。

1.2.3 平菇菌絲發(fā)酵液對(duì)番茄苗期生長(zhǎng)的影響 將種子表面消毒并做催芽處理，方法同1.2.1，待芽長(zhǎng)至約0.5 cm左右，用沙土培育番茄苗，28 ℃光照12 h，黑暗12 h處理8 d后，移栽番茄幼苗。

在每個(gè)150 mm×110 mm×132 mm（口徑×高×底直徑） 塑料花盆中裝滅菌的種植園土壤800 g，移栽3株大小相近的幼苗，移栽7 d后，取發(fā)酵液原液和無菌水稀釋的含原液濃度為25%，50%，75%溶液（含菌絲），澆灌番茄根部，每處理5盆，每株澆灌5 mL，以PD培養(yǎng)液處理為對(duì)照，處理后，適時(shí)澆水，20～30 ℃生長(zhǎng)0 d，5 d，9 d時(shí)，參照王玉等[9]的測(cè)量方法分別測(cè)定番茄幼苗的株高；在9 d時(shí)，將植株連根拔起，將根部土壤用自來水沖洗干凈，用吸水紙吸干水，用天平稱量各株鮮質(zhì)量，記錄并計(jì)算株平均鮮質(zhì)量。

2 結(jié)果與分析

2.1 平菇菌絲對(duì)番茄種子萌發(fā)的作用效果

經(jīng)試驗(yàn)得知，從各處理中番茄種子的發(fā)芽指數(shù)來看，對(duì)照明顯高于其他處理，為94.6，最低的為菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿后撒播種子的處理，僅為75.5；該處理的簡(jiǎn)化活力指數(shù)也最低，為19.0%；其對(duì)番茄種子萌發(fā)的傷害率最大，達(dá)8.8%；而對(duì)照組的簡(jiǎn)化活力指數(shù)為33.0%（表1）。綜合以上生理指標(biāo)可知，平菇菌絲對(duì)番茄種子的萌發(fā)具有一定的抑制作用（圖1），且隨著平菇菌絲的增多，抑制作用越強(qiáng)。

2.2 平菇菌絲發(fā)酵液對(duì)番茄苗期生長(zhǎng)的作用效果

2.2.1 平菇菌絲發(fā)酵液對(duì)番茄苗株高的影響 在施用平菇菌絲發(fā)酵液處理5 d時(shí)，各處理組之間番茄苗的株高沒有明顯差異；到9 d時(shí)，不同處理間的株高出現(xiàn)了顯著差異，其中使用50%發(fā)酵原液的處理效果最好（表3）。經(jīng)50%平菇菌絲發(fā)酵液處理的苗平均株高4.8 cm，與對(duì)照組相比，處理組要好于對(duì)照組；經(jīng)25%發(fā)酵原液澆灌的番茄苗平均株高為4.55 cm，與對(duì)照相比無顯著差異。而當(dāng)其處理濃度大于發(fā)酵原液的75%時(shí)，與對(duì)照相比有一定的抑制作用。說明平菇菌絲發(fā)酵液對(duì)番茄苗的生長(zhǎng)在低濃度時(shí)有促進(jìn)作用，高濃度時(shí)有抑制作用。

2.2.2 平菇菌絲發(fā)酵液對(duì)番茄鮮重的影響 在施用平菇菌絲發(fā)酵液處理9 d時(shí)，不同處理中生長(zhǎng)的番茄的鮮質(zhì)量有顯著差異，50%發(fā)酵液原液平均每株的鮮質(zhì)量最大為3.051 g，明顯高于對(duì)照的鮮質(zhì)量2.394 g； 25%發(fā)酵液原液與對(duì)照相比無顯著差異，75%發(fā)酵液原液和發(fā)酵液原液的處理之間無顯著差異，但都明顯低于對(duì)照（圖2）。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)研究了平菇菌絲對(duì)番茄種子萌發(fā)及其苗期生長(zhǎng)的影響，結(jié)果表明，平菇菌絲對(duì)番茄種子的萌發(fā)有一定的抑制作用。而平菇菌絲發(fā)酵濾液（含菌絲）對(duì)番茄苗的影響受到濃度的影響，其濃度為原液的50%時(shí)對(duì)番茄幼苗的生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用，而大于75%時(shí)有一定的抑制作用。而律鳳霞等[10]的研究表明，榆黃蘑菌糠浸提液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)番茄生長(zhǎng)過程中的株高、莖粗、冠幅及終產(chǎn)量等都有明顯的促進(jìn)作用，其中是用到的菌糠浸提液，而非菌絲本身。李玉中和向紅瓊[6]的平菇菌絲對(duì)番茄的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，是在苗移栽之前2周將菌絲施入土壤，且在有根結(jié)線蟲的情況下進(jìn)行的試驗(yàn)。

本研究顯示平菇菌絲對(duì)番茄種子萌發(fā)具有一定的抑制作用，不同濃度的發(fā)酵液對(duì)番茄的影響不同。但在生產(chǎn)中為了達(dá)到既防治番茄上根結(jié)線蟲又能促進(jìn)番茄生長(zhǎng)的效果，在施用平菇菌絲防治線蟲病害時(shí)，可先用菌絲處理土壤一段時(shí)間，待土壤線蟲被殺死，再移栽較大的番茄苗，或選用合適濃度的發(fā)酵液處理番茄，避免菌絲對(duì)幼苗的傷害。本研究對(duì)于今后用平菇菌絲防治番茄上的根結(jié)線蟲病具有一定的指導(dǎo)意義。

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