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    兩種血小板聚集分析儀檢測結(jié)果的分析比較

    2016-11-21 07:16:45楚杜武任軍偉叢玉隆
    標(biāo)記免疫分析與臨床 2016年9期
    關(guān)鍵詞:檢驗科氯吡分析儀

    楚杜武,任軍偉,叢玉隆

    (1.北京世紀(jì)壇醫(yī)院檢驗科,北京100038;2.兵器工業(yè)北京北方醫(yī)院檢驗科,北京100089;3.解放軍總醫(yī)院西院檢驗科,北京100853)

    兩種血小板聚集分析儀檢測結(jié)果的分析比較

    楚杜武1,任軍偉2,叢玉隆3

    (1.北京世紀(jì)壇醫(yī)院檢驗科,北京100038;2.兵器工業(yè)北京北方醫(yī)院檢驗科,北京100089;3.解放軍總醫(yī)院西院檢驗科,北京100853)

    目的 通過PL-11血小板分析儀(結(jié)果用最大聚集率,maximum aggregation rate,PL-MAR%表示)與光比濁法血小板聚集儀(light transmittance aggregometry,LTA,結(jié)果用血小板最大聚集率,LTA-MAR%表示)檢測結(jié)果的比較分析,探討兩種方法的優(yōu)略。方法 利用二磷酸腺苷(adenosine phosphate,ADP)誘導(dǎo)LTA的血小板聚集實驗,ADP誘導(dǎo)PL-11血小板分析儀的血小板聚集實驗。結(jié)果 ①對照組與患者組對比,LTA-MAR%,PL-MAR%參數(shù)有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01);②PL-MAR%與LTA-MAR%呈正相關(guān)(r=0.889)。結(jié)論 ①氯吡格雷有抗血小板聚集的藥物效果。②PL-11作為一種新型的血小板分析儀,檢測結(jié)果與LTA檢測結(jié)果相關(guān)性好,精密度高,可作為血小板聚集功能檢測的新途徑。

    血小板聚集; PL-11; 光比濁血小板聚集儀; ADP

    目前我國心血管疾病患者已超過2.7億,按全國人口14億計算,近5個中國人中就有1人患心血管疾病。隨著心血管病患者抗血小板藥物的廣泛使用,如何更有效、更準(zhǔn)確地掌握個體患者的服藥效果,科學(xué)地進(jìn)行個體化治療,就需要有更好的臨床檢驗監(jiān)測手段。目前,光比濁法血小板聚集儀(light transmittance aggregometry,LTA)在臨床上的使用率超過95%,是公認(rèn)的血小板聚集檢測的金標(biāo)準(zhǔn)[1]。當(dāng)前,市場上新推出了一種以電阻抗法連續(xù)監(jiān)測血小板數(shù)量判斷聚集情況的新型儀器PL-11。本文通過PL-11與LTA在血小板聚集功能方面的平行檢測、分析與探討,達(dá)到對PL-11檢測性能和方法學(xué)的深入了解,為臨床醫(yī)生提供一個抗血小板藥物藥效監(jiān)測及血小板功能檢測的新途徑。

    材料和方法

    1 儀器及試劑

    CHRONO-LOG MODEL700血小板聚集分析儀及其配套試劑(美國CHRONO-LOG公司);PL-11血小板分析儀及配套試劑(南京神州英諾華醫(yī)療科技有限公司);Thermo IEC CL40離心機(jī)(美國Thermo公司);SYSMEX XE-2100血細(xì)胞分析儀及其配套試劑(日本 Sysmex公司);枸櫞酸鈉抗凝管(美國 BD公司)。

    2 觀察對象及標(biāo)本采集

    ①隨機(jī)選取37例健康志愿者作為對照組,男性25例,女性12例;使用簡單隨機(jī)化(隨機(jī)數(shù)字表法)選取單服用氯吡格雷(75mg/d)10天以上的心腦血管病患者32例作為患者組,男性23例,女性9例(同時未服用其他抗血小板聚集類藥物)。②用3支3.8%枸櫞酸鈉抗凝真空采血管采集靜脈血,分別采集3mL。2支3mL樣本進(jìn)行LTA實驗;1支3mL樣本進(jìn)行英諾華PL-11血小板分析儀實驗。

    3 方法

    3.1比濁法血小板聚集儀實驗[2](light transmmitance aggregometry) 使用10μmol/L二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)作為誘導(dǎo)劑,用血細(xì)胞分析儀測定富血小板血漿(platelet rich plasma,PRP)的血小板濃度,用貧血小板血漿(platelet poor plasma,PPP)調(diào)整PRP血小板濃度為(200~300)× 109/L[3],檢測ADP誘導(dǎo)血小板聚集率。

    3.2PL-11血小板分析儀實驗 將樣本置于儀器的待測試位置,按“檢測”鍵,等待測試完畢,打印結(jié)果。

    4 主要觀察指標(biāo)

    ADP誘導(dǎo)LTA測得血小板最大聚集率(LTAMAR%);PL-11測 得 最 大聚 集率(maximum aggregation rate,PL-MAR%)。

    5 統(tǒng)計學(xué)處理

    用EXCEL2007整理數(shù)據(jù),用SPSS13.0軟件包進(jìn)行對照組與患者組的配對t檢驗以及所有觀察對象2種測試方法測得參數(shù)的雙變量相關(guān)性分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    結(jié)果

    1 對照組與患者組觀察指標(biāo)(參數(shù))

    LTA 測得的LTA-MAR%;PL-11測得的MAR%。請參見表1。

    表1 LTA,PL-11測得對照組與患者組組參數(shù)對比(±s)

    表1 LTA,PL-11測得對照組與患者組組參數(shù)對比(±s)

    注:*代表非正態(tài)分布,用中位數(shù)表示,并用 Mann-Whitney兩獨立樣本秩和檢驗法;其余參數(shù)值均服從正態(tài)分布,用配對t檢驗

    項目對照組患者組P 值結(jié)果LTA-MAR%71.4±13.844.5±14.2<0.01有統(tǒng)計學(xué)差異PL-MAR%70.1±9.051(P50)*<0.01有統(tǒng)計學(xué)差異

    2 PL-MAR%,LTA-MAR%參數(shù)雙變量相關(guān)性分析

    所有觀察對象的參數(shù)首先通過單變量方差分析進(jìn)行斜率差異性檢驗,結(jié)果均為P>0.05,即直線斜率、截距無差異;然后進(jìn)行PL-MAR%,LTA-MAR%兩個參數(shù)雙變量相關(guān)性分析,得到r=0.889,即兩個參數(shù)相關(guān)性良好。

    討論

    血小板是血栓形成的重要因素,檢測血小板聚集功能對于早期血栓形成的風(fēng)險評估,闡明相關(guān)疾病的病理機(jī)制及臨床選擇正確的治療方案等有重要意義。

    光學(xué)比濁血小板聚集功能檢測是將PRP置于比色杯中,加入誘導(dǎo)劑后,用涂硅小磁粒進(jìn)行攪拌,血小板逐漸聚集。光探測器接收這一血小板聚集反應(yīng)體系中連續(xù)變化的光信號,經(jīng)過轉(zhuǎn)換,最終將透射光的強(qiáng)度變化通過光強(qiáng)度-時間變化曲線描繪出來,就可直接通過圖表觀察到血小板聚集的全過程,以此反映出血小板聚集的速度、程度、血小板解聚等方面的參數(shù)和信息[4]。PL-11血小板分析儀是通過在抗凝全血中加入誘聚劑使血小板發(fā)生聚集,儀器均勻選取若干測試點測定非聚全血中的血小板數(shù)量,通過與ADP誘聚前最開始測得的兩次血小板數(shù)量平均值對比得出血小板聚集率,以此反映血小板聚集功能,所測參數(shù)有血小板最大聚集率(MAR%)、血小板最大聚集點(MAP%)、血小板平均聚集率(AAR%)、血小板數(shù)量、平均血小板體積(MPV)、紅細(xì)胞數(shù)量、平均紅細(xì)胞體積(MCV)7個參數(shù)。

    本實驗中,首先,從表1結(jié)果可以看出健康對照組與患者組相比:LTA-MAR%、PL-MAR%參數(shù)在2組之間都有顯著性差異;這說明:①氯吡格雷具有一定的抗血小板聚集功能,只是藥效不是很強(qiáng)[5]。造成這種情況的原因很多,如遺傳變異性、患者依從性差、氯吡格雷劑量不足以及CYP3A4相關(guān)的藥物間相互作用等;②PL-11作為新型血小板分析儀,測得患者PL-MAR%結(jié)果的中位數(shù)是51(P50),與對照組MAR%結(jié)果70.1±9.0相比,約減低27%,同時LTA測得的LTA-MAR%約減低38%,兩者結(jié)果有可比性。分析可能的原因:①LTA使用的是離心血漿,它的檢測狀態(tài)與體內(nèi)全血的凝集狀態(tài)有一定差異,因為它去除了紅細(xì)胞參與聚集所產(chǎn)生的效果,而紅細(xì)胞對于體內(nèi)血栓的形成是十分重要的。

    PL-11測得的PL-MAR%與LTA測得的LTAMAR%相關(guān)性良好(r=0.889),與關(guān)杰等[6]的結(jié)果一致。而目前國際上仍公認(rèn)LTA是血小板聚集功能檢測的金標(biāo)準(zhǔn)[1]。所以,兩種儀器檢測結(jié)果各參數(shù)之間的良好相關(guān)性證明了PL-11檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

    綜上所述,PL-11作為新型的血小板聚集分析儀,通過對與LTA平行測定結(jié)果的研究分析,發(fā)現(xiàn)其有一定特點:①采用“自動連續(xù)檢測”的方法,直接對血樣中誘聚劑加入后血小板數(shù)量、體積的變化進(jìn)行持續(xù)監(jiān)測,測得聚集前、后血小板數(shù)量的變化,計算得出血小板聚集功能水平,與LTA依靠光濁度變化間接信息推斷相比,檢測信號更加直接,干擾因素少,不受溶血、脂血、黃疸等標(biāo)本濁度的影響;②采用抗凝全血作為測試樣本,基本保持與體內(nèi)血液組成狀態(tài)一致,白細(xì)胞、紅細(xì)胞參與檢測過程,更符合體內(nèi)真實的血小板聚集狀況;③PL-11儀與LTA相比,準(zhǔn)確性較好,精密度更高;④儀器同時還能提供血小板平均體積(MPV)、紅細(xì)胞數(shù)量、平均紅細(xì)胞體積(MCV)等參數(shù),一次測定,便可對樣本多個方面分析評價,更加全面。⑤儀器操作簡便、快速、檢測費用低廉。以上幾點,說明PL-11可以作為臨床醫(yī)生進(jìn)行抗血小板藥物藥效監(jiān)測,血小板聚集功能檢測的新途徑。

    [1]任軍偉,張艷萍,叢玉隆,等.血栓彈力圖與光電比濁法檢測氯吡格雷抗血小板功能.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2014,29(6):48-51.

    [2]吳濤,劉景漢,李卉,等.亞硝基谷胱甘肽對冰凍血小板聚集及一氧化氮.中國實驗血液學(xué)雜志,2012,20(2):386-389.

    [3]譚大偉,朱平,李小鷹.氯吡格雷抑制血小板功能的兩種檢測方法比較:血小板聚集實驗與血小板膜糖蛋白檢測.中國組織工程研究與臨床康復(fù),2007,11(11):2021-2024.

    [4]鄒雄,叢玉隆,陳瑜,等.臨床檢驗儀器.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010,110-116.

    [5]蔣娟娟,田蕾,韓璐璐,等.CYP2C9和CYP2C19基因多態(tài)性對健康中國人口服氯吡格雷后藥效動力學(xué)的影響.中國新藥學(xué)雜志,2011,20(13):1217-1221.

    [6]關(guān)杰,李莉,朱遠(yuǎn),等.PL-11兩種誘導(dǎo)劑監(jiān)測健康人服用氯吡格雷后的血小板功能變化.解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2014,35(3):238-241.

    (潘子昂編輯)

    Evaluation and Comparison of a Newly Developed Platelet Function Analyzer with Light Transmission Aggregometry

    CHU Du-wu1,REN Jun-wei2,CONG Yu-long3
    (1.Department of Clinical Laboratory,Beijing Shijitan Hospital,Beijing 100038,China;2.Department of Clinical Laboratory,Beijing North Hospital of China North Industries Group Corporation(CNGC),Beijing 100089,China;3.Department of Clinical Laboratory,West Building of Chinese PLA General Hospital,Beijing 100853,China)

    Objective To evaluate the performance of PL-11 platelet function analyzer and compare it with LTA(light transmittance aggregometry).Methods Use LTA(results shown as LTA-MAR%)and PL-11(results expressed as PL-MAR%)to test the platelet aggregation function in control group and clopidogrel patient group(patient group)at the same time.In the test,ADP were used as the agonist for PL-11<A system.Results①the results between control group and patients group were statistically different with both analyzers(P<0.01);② all the results of PL-MAR%and LTA-MAR%were positively correlated(r= 0.889).Conclusion①Clopidogrel is effective drug in anti-platelet therapy.②The PL-11 platelet analyzer is a new platelet function analyzer,the results have a high correlation with the results of LTA.

    Platelet aggregation; PL-11; Light transmittance aggregometry; ADP

    10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.09.031

    2016-04-22;

    2016-06-11

    楚杜武、任軍偉為并列第一作者。楚杜武(1976—),男,主管技師,專業(yè):醫(yī)學(xué)檢驗。E-mail:1575265282@qq.com;任軍偉,男,碩士研究生,主管技師,專業(yè):臨床檢驗診斷學(xué),免疫學(xué)。Tel:13661149064;E-mail:renjw678@126.com

    叢玉隆,主任醫(yī)師,教授,博士生導(dǎo)師,主要研究血液學(xué)、血栓與止血學(xué)。E-mail:yulongc@263.net

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