鹿特異性復合麻醉劑對大鼠大腦皮層Na+—K+—ATP酶活性的影響

馮雪 付連軍 林博 等

摘要：通過測定鹿特異性復合麻醉劑麻醉下大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性的變化，探討了其麻醉與大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶的關(guān)系。將32只純種SD大鼠隨機分成對照組、誘導組、麻醉組和催醒組，對照組大鼠按30 mL/kg體重腹腔注射生理鹽水，其余各組按30 mg/kg體重腹腔注射鹿特異性復合麻醉劑，于各時間點冰上采集各組大鼠大腦皮層，采用比色法測定其Na+-K+-ATP酶活性。結(jié)果顯示，藥物作用后大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性顯著低于對照組（P<0.05或P<0.01）。該結(jié)果提示大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性變化與鹿特異性復合麻醉劑的麻醉作用具有相關(guān)性。

關(guān)鍵詞：鹿特異性復合麻醉劑；大鼠；大腦皮層；Na+-K+-ATP酶

中圖分類號：S859.79+1 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）04-0964-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.04.037

Effects of Specificity Anesthetic for Deer on Na+-K+-ATPase Activity

in Cerebral Cortex of Rats

FENG Xue， FU Lian-jun， LIN Bo， CHANG Nai-yuan， LI Jing-cheng， LI Wen-xuan， YIN Bai-shuang

（Department of Animal Medicine， Jilin Agricultural Science and Technology， Jilin 132101，Jilin，China）

Abstract： This experiment was aimed to determine the activity of Na+-K+-ATPase in rats' cerebral cortex region and investigate the relationship between specificity anesthetic for deer and Na+-K+-ATPase in cerebral cortex. 32 SD rats were randomly divided into control group， induction group， anesthesia group and the wake group. Rats of the control were injected with saline（30 mL/kg），rats of the other group were injected with drug （30 mg/kg）. The samples of cerebral cortex in different period were separated and the activities of Na+-K+-ATPase were determined by using colorimetry methods. The results showed that the activities of Na+-K+-ATPase in cerebral cortex after administration were decreased obviously compared with that in the control group（P<0.05 or P<0.01）. It indicated that the changes of the activity of Na+-K+-ATPase in the cerebral cortex were correlated with the specificity anesthetic for deer.

Key words： specificity anesthetic for deer； rats； cerebral cortex； Na+-K+-ATPase

在哺乳動物腦組織中Na+-K+-ATP酶含量豐富，該酶在維持神經(jīng)細胞的興奮性、傳導性及調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)代謝等方面發(fā)揮著重要作用[1]。動物在麻醉過程中腦組織神經(jīng)細胞處于抑制狀態(tài)，神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)導作用受阻。過去的研究表明，多種麻醉藥物均可引起跨膜信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)中Na+-K+-ATP酶活性降低，從而調(diào)節(jié)細胞內(nèi)Ca2+濃度，控制神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，抑制神經(jīng)細胞之間及神經(jīng)細胞與肌肉或腺體細胞之間的興奮傳遞，產(chǎn)生麻醉現(xiàn)象[2]。鹿特異性復合麻醉劑是吉林農(nóng)業(yè)科技學院動物外科學教研室自行研制成功的以賽拉嗪、替來他明及強痛寧為主要成分的鹿專屬復合麻醉劑，臨床應用麻醉效果顯著，對鹿的生理指標影響輕微，無副作用。本試驗通過研究鹿特異性復合麻醉劑對大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性的影響，以初步探討其全麻作用的跨膜信號轉(zhuǎn)導機制。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

32只純種SD大鼠，雌雄兼?zhèn)?，體重（180±20） g，購于吉林大學實驗動物中心，實驗室環(huán)境下飼養(yǎng)2周后進行試驗。

1.2 試驗藥品及試劑

鹿特異性復合麻醉劑（噻啦嗪∶替來他明∶強痛寧=0.90∶0.82∶0.26，吉林農(nóng)業(yè)科技學院動物外科學教研室自行研制）；Na+-K+-ATP酶測定試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20130821），考馬斯亮藍蛋白質(zhì)含量測定試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20130816）。

1.3 樣品采集與處理

對照組大鼠按30 mL/kg體重腹腔注射生理鹽水，其余各組按30 mg/kg體重腹腔注射鹿特異性復合麻醉劑，分別于誘導期、麻醉期和催醒期斷頭取腦，分離大腦皮層，稱重后置于10倍體積的生理鹽水介質(zhì)中勻漿，1 000 r/min 離心10 min，收集上清液，沉淀用預冷的生理鹽水混懸后再次1 000 r/min 離心10 min，收集上清液，合并兩次上清液，然后以17 000 r/min 離心55 min，棄去上清液。

1.4 檢測方法

利用比色法測定Na+-K+-ATP酶活性。按考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量。

酶活力測定：酶活力以每小時每毫克組織蛋白分解ATP產(chǎn)生1 μmol無機磷的量為1個ATP酶活力單位。即微摩爾分子磷/毫克蛋白·小時[μmol

Pi/mg（prot）·h]。

1.5 試驗數(shù)據(jù)的分析與統(tǒng)計

應用SPSS 16.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進行分析，Microsoft Excel 2003 對試驗數(shù)據(jù)制圖。

2 結(jié)果與分析

試驗結(jié)果見圖1。由圖1可見，大鼠腹腔注射鹿特異性復合麻醉劑后誘導期大腦皮層Na+-K+-ATP 酶活力顯著低于對照組（P<0.05）；麻醉期和催醒期大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP 酶活力與對照組比較差異極顯著（P<0.01）。

3 討論

全麻狀態(tài)下動物的意識消失主要由大腦皮層抑制所致，各種感覺及來自大腦、小腦、脊髓及顱神經(jīng)的沖動首先在網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)匯集并進行信號處理，然后通過上行通路與丘腦及下丘腦（與醒覺及痛覺有關(guān)）中的各神經(jīng)核群發(fā)生聯(lián)系，最終對大腦皮層的活動產(chǎn)生影響[3，4]。張宇等[5]研究指出Na+-K+-ATP酶活性的降低影響了突觸的電化學傳遞，氯胺酮、靜松靈以及復合麻醉劑對小型豬不同腦區(qū)中Na+-K+-ATP酶活性的抑制是其產(chǎn)生麻醉作用的主要原因之一[6]；范宏剛等[7]研究發(fā)現(xiàn)小型豬復合麻醉劑的全麻作用與抑制大腦皮層、小腦等腦區(qū)突觸體Na+-K+-ATP酶活性相關(guān)；高利等[2]研究提出噻拉嗪對山羊麻醉的作用機制可能與抑制跨膜信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)中Na+-K+-ATP酶活性有關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)，鹿特異性復合麻醉劑抑制大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶的活性，使動作電位在峰電流期間產(chǎn)生的膜外高K+和膜內(nèi)高Na+的狀態(tài)不能及時消除，導致動作電位后時相電位時程延長，細胞的相對不應期延長，興奮性閾值增高，引起受抑制區(qū)域所支配的各項生理功能暫時性喪失或減退，產(chǎn)生麻醉效應。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，鹿特異性復合麻醉劑抑制大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性可能是其產(chǎn)生麻醉作用的機理之一。

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