云嶺牛染色體G帶分析

虧開(kāi)興，楊 凱，佴文惠，和霽恬，金顯棟，王安奎，胡映開(kāi)，和占星，張繼才，黃必志

（1.云南省草地動(dòng)物科學(xué)研究院，昆明 650212；2.云南省肉牛工程技術(shù)研究中心，昆明 650212；3.中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所遺傳資源與進(jìn)化國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650223）

云嶺牛染色體G帶分析

虧開(kāi)興1，2，楊 凱1，佴文惠3，和霽恬1，金顯棟1，王安奎1，胡映開(kāi)2，和占星1，2，張繼才1，黃必志1

（1.云南省草地動(dòng)物科學(xué)研究院，昆明 650212；2.云南省肉牛工程技術(shù)研究中心，昆明 650212；3.中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所遺傳資源與進(jìn)化國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650223）

通過(guò)對(duì)云嶺牛外周血及耳組織成纖維細(xì)胞培養(yǎng)制作染色體G帶標(biāo)本，結(jié)果顯示，云嶺牛染色體數(shù)目為2n=60，公牛核型為60，XY；母牛核型為60，XX。其中1～29號(hào)染色體全部為端著絲粒染色體，X染色體為亞中著絲粒染色體，Y染色體為一較小的端著絲粒染色體，Y染色體為瘤牛型的Y染色體。云嶺牛染色體G帶明暗相間，與其他牛品種間的帶紋特征差異還需進(jìn)一步研究。

云嶺牛；染色體；G帶

云嶺牛新品種選育始于中-澳技術(shù)合作計(jì)劃“云南牲畜和草場(chǎng)發(fā)展”項(xiàng)目（1983—1991），隨后在“八五”期間，由云南省科技廳立項(xiàng)攻關(guān)研究計(jì)劃，最終從11個(gè)雜交組合中篩選出BMY組合作為選育素材，其血緣構(gòu)成為1/2婆羅門(mén)牛、1/4莫累灰牛、1/4云南黃牛［1-3］。隨后，“九五”、“十五”持續(xù)由云南省攻關(guān)研究計(jì)劃立項(xiàng)實(shí)施熱帶亞熱帶肉牛新品種選育，旨在通過(guò)雜交育種，結(jié)合人工授精、MOET及群選群育開(kāi)放式育種等技術(shù)，經(jīng)過(guò)雜交創(chuàng)新、橫交選育、自群繁育形成云嶺牛新種群，以改變?cè)颇宵S牛體型較小、生長(zhǎng)速度慢、個(gè)體產(chǎn)品率低，莫累灰牛耐熱抗蜱、耐粗飼能力差，婆羅門(mén)牛產(chǎn)肉和繁殖性能低等缺陷；同時(shí)保留并融合云南黃牛適應(yīng)性強(qiáng)、耐粗飼、肉風(fēng)味好，莫累灰牛生長(zhǎng)快、繁殖性能高、肉質(zhì)好，婆羅門(mén)牛耐熱抗蜱易飼養(yǎng)管理等優(yōu)良特性，經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的選種選育和擴(kuò)繁，最終培育出適合我國(guó)南方熱帶亞熱帶氣候環(huán)境的專(zhuān)門(mén)化肉牛新品種［1-5］。前期作者等曾以BMY牛（即云嶺牛）為研究對(duì)象進(jìn)行了細(xì)胞遺傳學(xué)觀察，比較分析了云嶺牛與婆羅門(mén)牛等品種的核型差異，補(bǔ)充和積累了云嶺牛的遺傳學(xué)基礎(chǔ)資料［6］。本研究對(duì)云嶺牛染色體G帶進(jìn)行研究，為其細(xì)胞遺傳學(xué)研究、基因定位和疾病診斷等提供遺傳學(xué)資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

外周血和耳組織采自于云南省草地動(dòng)物科學(xué)研究院小哨示范牧場(chǎng)云嶺牛核心群4頭（2、2♀）。公牛為種用公牛，母牛隨機(jī)采取。用含有肝素鈉抗凝的注射器從每頭牛頸靜脈抽取外周血2～5mL，隨冰塊低溫保存，送昆明動(dòng)物研究所昆明野生動(dòng)物細(xì)胞庫(kù)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

1.2 方法

按劉瑞清等［7］、Peng等［8］和宋敏艷等［9］方法，稍作修改進(jìn)行外周血淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)、細(xì)胞收獲和染色體標(biāo)本制備。對(duì)顯帶和分散最好的分裂相用Cyto Vision System （Applied Imaging）軟件進(jìn)行圖像拍攝和分析，染色體G帶分析依染色體長(zhǎng)度遞減排列染色體和編號(hào)。

2 結(jié)果與分析

2.1 云嶺牛的染色體數(shù)目

在顯微鏡下拍照、計(jì)數(shù)，選取背景清晰、長(zhǎng)短適中的中期分裂相計(jì)數(shù)，云嶺牛染色體數(shù)目為2n=60。

2.2 云嶺牛染色體G帶觀察

按前人對(duì)牛核型染色體的排列與同源配對(duì)［10-11］，依染色體大小遞減排列，依次為1～29，性染色體不編號(hào)，排列于最后（圖1、圖2）。由圖可見(jiàn)，云嶺牛的染色體數(shù)目為2n=60，染色體臂數(shù)NF=62，有29對(duì)端著絲粒染色體，X染色體為亞中著絲粒染色體，Y染色體為一條較小的端著絲粒染色體，屬于瘤牛型（indicus-type）［6，10-11］，完全符合云嶺牛育種的遺傳背景，與前期結(jié)果一致［6］。云嶺牛染色體G帶明暗相間，與其他牛品種間的帶紋特征差異還需進(jìn)一步研究。

圖1 云嶺牛公牛染色體G帶

圖2 云嶺牛母牛染色體G帶

3 討論

云嶺牛由婆羅門(mén)牛、莫累灰牛和云南黃牛三元雜交選育而來(lái)。育種過(guò)程中，先用莫累灰公牛與云南黃牛雜交，產(chǎn)生莫云雜，再以婆羅門(mén)牛為終端父本，最終形成含1/2婆羅門(mén)牛、1/4莫累灰牛、1/4云南黃牛血緣的專(zhuān)門(mén)化肉牛新品種。云嶺牛是肉牛品種中對(duì)自然生態(tài)環(huán)境適應(yīng)性最強(qiáng)的肉牛品種之一，能夠適應(yīng)熱帶亞熱帶氣候環(huán)境，且在高溫高濕條件下表現(xiàn)出較好的繁殖能力和生長(zhǎng)速度；云嶺牛有較強(qiáng)的耐粗飼能力，適宜于全放牧、放牧加補(bǔ)飼、全舍飼等飼養(yǎng)方式，對(duì)體內(nèi)外寄生蟲(chóng)等有較強(qiáng)的抵抗力，適應(yīng)性強(qiáng)［1-5］。

云嶺牛繼承了其終端父本婆羅門(mén)牛的Y染色體，其核型與婆羅門(mén)牛一致，并表現(xiàn)為瘤牛型的端著絲粒染色體［6］，與以前的報(bào)道一致［10-11］。云嶺牛與普通牛、瘤牛、牦牛的染色體數(shù)目一樣（2n=60），而與東南亞叢林的大額牛、云南野牛、泰國(guó)野牛相差較大，并表現(xiàn)為1～2個(gè)羅伯遜易位的差異［6，12］。本研究為云嶺牛積累了細(xì)胞遺傳學(xué)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，云嶺牛染色體G帶明暗相間，與其他牛品種間的帶紋特征差異還需進(jìn)一步研究。

［1］文際坤.云南熱帶亞熱帶肉牛品種雜交組合及選育研究總結(jié)［J］.黃牛雜志，1996，22（增刊）：1-10.

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Analysis on the G-binding of Chromosome in Yunling Cattle

Qu Kaixing1，2，Yang Kai1，Huang Bizhi1，et al
（1.Yunnan Academy of Grassland and Animal Science，Kunming650212，China；2.Beef Cattle Engineering and Technology Research Center of Yunnan Province，Kunming650212，China）

G-banding samples were made by peripheral blood lymphocyte culture to analyze the karyotype and G-banding pattern of the chromosomes in Yunling cattle.It showed that Yunling cattle had a karyotype of2n=60，displaying bull for XY and cow for XX，of which 1～29 autosomes were telocentric chromosomes and 1 pair of sex-chromosome，and X chromosome was submetacentric chromosome，Y chromosome was a small telocentric chromosomes belonged to zebu type.The G-bindings of the chromosomes in Yunling cattle showed alternately binding patterns，which needed further comparison of the binding characters with other cattle breeds.

Yunling cattle；chromosome；G-binding

S823.2

A

2095-3887（2016）04-0008-03

10.3969/j.issn.2095-3887.2016.04.003

2016-06-06

云南省基礎(chǔ)研究重大項(xiàng)目（2013FC004）；青年基金（2014FD076）；云南省草地畜牧業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)（2015HC001）；國(guó)家肉牛牦牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（CARS-38）

虧 開(kāi)興（1975-），男，副研究員，主要從事肉牛遺傳育種研究。

黃必志（1964-），男，研究員，主要從事肉牛育種和草產(chǎn)品開(kāi)發(fā)。