運動訓(xùn)練結(jié)合針刺對坐骨神經(jīng)損傷大鼠肌力和神經(jīng)纖維恢復(fù)的影響

董 英 徐 昂 姜 影 馬 紅

1 濱州醫(yī)學(xué)院康復(fù)醫(yī)學(xué)院康復(fù)臨床教研室 煙臺 264003；2 濱州醫(yī)學(xué)院康復(fù)醫(yī)學(xué)院傳統(tǒng)康復(fù)教研室

?

運動訓(xùn)練結(jié)合針刺對坐骨神經(jīng)損傷大鼠肌力和神經(jīng)纖維恢復(fù)的影響

董 英1徐 昂1姜 影1馬 紅2

1 濱州醫(yī)學(xué)院康復(fù)醫(yī)學(xué)院康復(fù)臨床教研室 煙臺 264003；2 濱州醫(yī)學(xué)院康復(fù)醫(yī)學(xué)院傳統(tǒng)康復(fù)教研室

目的 對比運動訓(xùn)練、針刺療法、運動訓(xùn)練結(jié)合針刺療法對坐骨神經(jīng)損傷大鼠肌力和神經(jīng)纖維恢復(fù)情況的影響，為周圍神經(jīng)損傷患者的康復(fù)治療提供可靠的參考依據(jù)。方法 將75只SD大鼠隨機分為對照組、運動訓(xùn)練組、針刺組、運動訓(xùn)練結(jié)合針刺組、假手術(shù)組，鉗夾法制造大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型。于造模后第3、4、5周電生理檢測不同組別大鼠股二頭肌的單收縮力與強直收縮力，通過電鏡觀察計算再生神經(jīng)纖維髓鞘厚度的平均值變化情況。結(jié)果 運動訓(xùn)練組、針刺組及運動訓(xùn)練結(jié)合針刺組肌肉的單收縮力和強直收縮力均高于對照組，其中，運動訓(xùn)練結(jié)合針刺組高于運動訓(xùn)練組和針刺組。運動訓(xùn)練組、針刺組、運動訓(xùn)練結(jié)合針刺組三組的髓鞘厚度的平均值均高于對照組髓鞘厚度平均值，運動訓(xùn)練結(jié)合針刺組的髓鞘厚度平均值高于運動訓(xùn)練組和針刺組。結(jié)論 運動訓(xùn)練結(jié)合針刺療法可更好地促進SD大鼠的肌力和神經(jīng)纖維的恢復(fù)。

運動訓(xùn)練；針刺；神經(jīng)損傷；髓鞘

運動訓(xùn)練是以功能訓(xùn)練為主要手段的方法，按照科學(xué)性、針對性、循序漸進的原則，最大程度地恢復(fù)和改善已經(jīng)喪失或減弱的器官功能。針刺療法是指使用不同的針具和非針具刺激機體的腧穴，以降低功能障礙的方法。本研究的目的是通過研究運動訓(xùn)練結(jié)合針刺療法對坐骨神經(jīng)損傷大鼠的肌力和神經(jīng)纖維恢復(fù)情況的影響，為周圍神經(jīng)損傷的康復(fù)治療提供可靠的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 75只普通級雄性SD大鼠，體質(zhì)量為(200±20)g，全部由濱州醫(yī)學(xué)院醫(yī)藥研究中心提供。自然光照，自由飲食。

1.2 儀器與試劑 動物跑臺(西安萬得電子電器公司)，華佗牌針灸針，JEM-200c型透射電鏡(日本電子株式會社)，石蠟包埋儀器(北京昊諾斯科技有限公司)，石蠟切片機(德國徠卡儀器公司)，手術(shù)器械。

1.3 實驗分組 SD大鼠飼養(yǎng)7 d后，隨機將其分為對照組、運動訓(xùn)練組、針刺組、運動訓(xùn)練結(jié)合針刺組和假手術(shù)組5組，每組15只。

1.4 模型制備 制作SD大鼠坐骨損傷模型前應(yīng)禁食24 h，飲水自由。參照文獻[1]利用10%水合氯醛(4 mL/kg)對其腹腔注射麻醉后，俯臥位固定于手術(shù)臺，清除大腿和右臀部毛發(fā)，從中間向外周涂擦碘酒，再用酒精脫碘，將孔巾鋪于距尾根1 cm處，做弧形切口，將周圍組織和肌肉分離，使坐骨神經(jīng)置于視野中，利用止血鉗在神經(jīng)干中間部鉗夾，每次時間為30 s，間隔15 s，每個位置進行3次。在鉗夾部位下2 mm處再重復(fù)上述操作[2]。記下精確位置。造模成功的標(biāo)志為右側(cè)后肢無力，不能支持身體，踝關(guān)節(jié)不能屈曲或屈曲困難，只能被拖動前進[3-4]。游離假手術(shù)組中大鼠右側(cè)坐骨神經(jīng)并置于視野中，不夾閉，直接對皮膚進行縫合。操作均由一人完成。

1.5 實驗方法 造模第7天進行干預(yù)。運動訓(xùn)練組在30°傾斜度的電動跑臺上以20 m/min的速度訓(xùn)練，每次20 min[5]，跑臺最下端有電流擾頻器，若大鼠停止運動，電流擾頻器會在尾部給予電刺激，使其繼續(xù)運動。針刺組斜刺SD大鼠兩側(cè)夾脊穴，深度為0.6～0.9 mm，20 min后起針[6-7]。運動訓(xùn)練結(jié)合針刺組給予運動訓(xùn)練及針刺療法相結(jié)合對其進行治療。上述干預(yù)方法每天1次，每周6天，休息1天，共5周。

1.6 觀測指標(biāo)及方法

1.6.1 電生理檢測 檢測患腿股二頭肌的單收縮力和其強直收縮力的大小[8-9]并進行記錄。

1.6.2 再生神經(jīng)纖維髓鞘厚度 參照Fakhrian等[10]的方法，將再生神經(jīng)纖維超微結(jié)構(gòu)照片放大20 000倍，等距測試線隨機疊加于照片上，計算測試線和每一個斷面內(nèi)外界線的相交點數(shù)，將交點按照一定的順序編序，1作為總數(shù)，隨機選取前1/4為第二個測試點，則第三個測試點是第二個測試點所在位置+1/4，與上相同第四個測試點是第三個所處位置+1/4，在以上4個點的位置上測量髓鞘的內(nèi)外界線最短長度，取其平均值為髓鞘厚度。

1.7 統(tǒng)計學(xué)方法 用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，采用完全隨機設(shè)計的單因素方差分析。

2 結(jié)果

2.1 電生理檢測 股二頭肌單收縮力檢測值見表1，其強直收縮力的大小見表2。經(jīng)分析可知，運動訓(xùn)練結(jié)合針刺組的股二頭肌在單收縮力與強直收縮力兩方面優(yōu)于運動訓(xùn)練組和針刺組，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

表1 各組大鼠股二頭肌單收縮力的測定 g

注：與對照組比較，*P<0.05；與運動訓(xùn)練組比較，△P<0.05；與針刺組比較，▲P<0.05。

表2 各組大鼠股二頭肌強直收縮力的測定 g

注：與對照組比較，*P<0.05；與運動訓(xùn)練組比較，△P<0.05；與針刺組比較，▲P<0.05。

2.2 已損傷SD大鼠再生神經(jīng)纖維髓鞘厚度的測定 運動訓(xùn)練結(jié)合針刺組髓鞘厚度平均值均高于運動訓(xùn)練組和針刺組，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義，見表3。

表3 再生神經(jīng)纖維髓鞘厚度的測定 nm

注：與對照組比較，*P<0.05；與運動訓(xùn)練組比較，△P<0.05；與針刺組比較，▲P<0.05。

3 討論

筆者采用鉗夾法損傷大鼠坐骨神經(jīng)，應(yīng)用電子顯微鏡對實驗后坐骨神經(jīng)髓鞘厚度進行記錄，實驗結(jié)果用來判斷損傷坐骨神經(jīng)在給予不同干預(yù)后的再生情況以及功能恢復(fù)程度。結(jié)果提示，適當(dāng)?shù)倪\動訓(xùn)練、針刺療法對坐骨神經(jīng)損傷后的肌力和神經(jīng)纖維的恢復(fù)有著積極的效果，且兩療法結(jié)合后的治療效果和單一療法相比更加明顯。

周圍神經(jīng)損傷這類疾病發(fā)病率較高，且療效不理想?？v觀其損傷機理，神經(jīng)損傷后受其支配的肌肉肌力的康復(fù)和神經(jīng)纖維的恢復(fù)是復(fù)雜的過程，其相應(yīng)脊髓節(jié)段和效應(yīng)器都會受到不同程度的影響。影響周圍神經(jīng)再生的因素有：神經(jīng)本身的原因，其受損后再生速度相對緩慢，通常約為1 mm/d；神經(jīng)損傷導(dǎo)致感覺或運動喪失、廢用性肌萎縮、關(guān)節(jié)攣縮會影響患者日常生活活動能力[11]。周圍神經(jīng)損傷早期應(yīng)該積極去除病因，保持連續(xù)性[12]。決定預(yù)后最關(guān)鍵的因素是軸索和髓鞘損傷嚴(yán)重與否。如果受損髓鞘沒有發(fā)生華勒氏變性，僅僅為暫時性阻斷，則幾周乃至幾個月自我修復(fù)后，受損神經(jīng)的功能很有可能完全恢復(fù)[13]。在本研究中，對大鼠坐骨神經(jīng)進行損傷造模，神經(jīng)損傷程度恰好是可以發(fā)生華勒氏變性，但內(nèi)膜沒有受損，所以神經(jīng)功能恢復(fù)有較大的可能性。

本研究按照科學(xué)性、針對性的原則設(shè)計跑臺訓(xùn)練來恢復(fù)和改善SD大鼠運動器官功能和促進神經(jīng)再生。肌力恢復(fù)和神經(jīng)纖維修復(fù)與其周圍血液供應(yīng)密不可分。跑臺訓(xùn)練有利于大鼠增強心肺功能以加快全身血液循環(huán)速度，肌肉和神經(jīng)周圍血液供應(yīng)豐富度增加。大鼠在運動時需消耗體內(nèi)能源，加速了廢物代謝。而且，運動可以刺激大鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，使其維持一定的興奮性，以神經(jīng)生理學(xué)、發(fā)育學(xué)為基礎(chǔ)減輕損傷后對肢體運動功能的影響。針刺療法可以起到降低功能障礙、調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)的作用。針刺大鼠夾脊穴可以刺激血液運輸，使動脈壁細胞上的受體興奮性增加，血流量增加，組織含氧量增加，從而刺激相應(yīng)脊髓階段，進一步加快損傷軸突的恢復(fù)或再生。

[1] 郝虎萍,丁坦,王繼猛,等.組織工程神經(jīng)支架復(fù)合FK506修復(fù)周圍神經(jīng)長節(jié)段缺損以及痛覺變化的研究[J].中國矯形外科雜志,2013,21(18):1863-1869.

[2] Chen R,Li Y J,Li J Q,et al.Electrical injury alters ion channel expression levels and electrophysiological properties in rabbit dorsal root ganglia neurons[J].Burns,2011,37(2):304-311.

[3] Coert J H.Pathophysiology of nerve regeneration and nerve reconstruction in burned patient[J].Burns,2010,36(5):593-598.

[4] Jesuraj N J,Marquardt L M,Kwasa J A,et al.Glial cell line-derived neurotrophic factor promotes increased phenotypic marker expression in femoral sensory and motor-derived Schwann cell cultures[J].Exp Neurol,2014,257(1):10-18.

[5] 崔松彪,趙和榮,樸虎男,等.運動訓(xùn)練對周圍神經(jīng)損傷大白鼠神經(jīng)功能恢復(fù)的影響[J].中國臨床康復(fù),2004,14(4):237-239.

[6] Zou D W,Gao Y B，Zhu Z Y,et al.Traditional Chinese medicine tang-luo-ning ameliorates sciatic nerve injuries in streptozotocin-induced diabetic rats[J].Evid Based Complement Alternat Med,2013,2013:989670.

[7] 姜永霞,程博,樓新法,等.夾脊穴的淵源及研究進展[J].上海針灸雜志,2011,30(3):201-203.

[8] 莊伊洢.坐骨神經(jīng)功能指數(shù)的使用方法及存在問題[J].醫(yī)學(xué)信息,2013,19(25):78-78.

[9] 田德虎.周圍神經(jīng)損傷與康復(fù)[J].中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志,2007,22(2):99.

[10] Fakhrian K,Gamisch N,Schuster T,et al.Salvage radiotherapy in patients with recurrent esophageal carcinoma[J].Strahlenther Onkol,2012,188(2);136-142.

[11] Ribeiro C A,Fraga J S,Graos M,et al.The secretome of stem cells isolated from the adipose tissue and Wharton jelly acts differently on central nervous system derived cell populations[J].Stem Cell Res Ther,2012,3(3):18.

[12] 李春.周圍神經(jīng)損傷的康復(fù)治療[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2010,4(21):61-62.

[13] 王啟榮,周鈺杰.運動與單胺類神經(jīng)遞質(zhì)之間關(guān)系的研究進展[J].體育科研,2012,33(5):70-73.

The effect of exercise training and acupuncture on recover about muscle force and neuron fiber after sciatic nerve injure in rats

DONG Ying1XU Ang1JIANG Ying1MA Hong2

1 Teaching and Research Section of Clinical Rehabilitation, College of Rehabilitation, Binzhou Medical University, Yantai 264003，P.R.China;2 Teaching and Research Section of Traditional Rehabilitation,College of Rehabilitation, Binzhou Medical University

Objective To compare the effect of exercise training,acupuncture therapy, exercise training combined with acupuncture on sciatic nerve injury of rat muscle force and nerve fiber recovery to provide a reliable reference for the rehabilitation of patients with peripheral nerve injury.Methods Seventy-five SD mice were divided randomly into five groups including control group, exercise training group, acupuncture group, exercise training combined with acupuncture group and sham operation group. Sciatic nerve injury models in rats were made by forceps. The single contractile force and tetanic contractile force of biceps femoris muscle of different groups rats by electrophysiological were examined.The average changes of nerve fiber regeneration myelin sheath thickness were calculated by electron microscopy.Results Compared with control group, exercise training group, acupuncture group and exercise training combined with acupuncture group could increase the single contracton force and tonic contraction force of electrophysiological detection, and the latter was higher than exercise training group and acupuncture group.Compared with control group, other group could increase the average value of the myelin sheath thickness, and the average value of the myelin sheath thickness in exercise training combined with acupuncture group was higher than exercise training group and acupuncture group.Conclusion Exercise training combined with acupuncture could enhance muscle force and neuron fiber recover of mice with sciatic nerve injury.

exercise training, acupuncture, nerve injury, myelin sheath

濱州醫(yī)學(xué)院科技計劃(BY2013KJ69)；濱州醫(yī)學(xué)院大學(xué)生科技創(chuàng)新項目(BY2014DKCX131)

R493

A

1001-9510(2016)05-0327-03

2016-05-31)

董英，E-mail: 344399873@qq.com