西寧地區(qū)農(nóng)戶散養(yǎng)生豬藍(lán)耳病感染情況調(diào)查

甄森萍

（青海省西寧市畜牧獸醫(yī)站，青海西寧 810003）

西寧地區(qū)農(nóng)戶散養(yǎng)生豬藍(lán)耳病感染情況調(diào)查

甄森萍

（青海省西寧市畜牧獸醫(yī)站，青海西寧 810003）

應(yīng)用 ELISA試劑診斷盒對(duì)西寧市郊的160份生豬血清，進(jìn)行了PRRS的血清抗體檢測(cè)，共檢出陽(yáng)性血清7份。

豬藍(lán)耳病；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

豬藍(lán)耳?。≒RRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的豬的一種高度接觸性傳染病，不同年齡、品種和性別的豬均能感染，但以妊娠母豬和1月齡以內(nèi)的仔豬最易感；該病以母豬流產(chǎn)、死胎、弱胎、木乃伊胎以及仔豬呼吸困難、敗血癥、高死亡率等為主要特征。1992年國(guó)際獸醫(yī)組織將其定為B類傳染病。該病1987年首先在美國(guó)報(bào)道，其后在德國(guó)、加拿大、日本和荷蘭等發(fā)達(dá)國(guó)家相繼報(bào)道。1996年郭寶清等專家首次從國(guó)內(nèi)發(fā)病豬群中分離出PRRSV，從而證實(shí)我國(guó)存在本病［1］，1997年以后有青海省發(fā)現(xiàn)本病的報(bào)道［2］，［3］。為了更加詳細(xì)了解PRRS在西寧市的最新感染情況，我們于2015年9月對(duì)農(nóng)戶散養(yǎng)生豬進(jìn)行了PRRS 的血清學(xué)調(diào)查，現(xiàn)報(bào)告如下：

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 檢測(cè)樣品 隨機(jī)從西寧市郊農(nóng)戶散養(yǎng)生豬采集血液160份，分離血清，置于4℃冰箱備用，采集生豬均沒有注射豬藍(lán)耳病疫苗。

1.1.2 ELISA試劑盒 美國(guó)IDEXX公司生產(chǎn)，購(gòu)自上海羅曼動(dòng)物保健公司。

1.2 方法

（1）將待檢血清用稀釋液40倍稀釋，取100μl加于酶標(biāo)板的病毒（PRRSV）包被孔和正常宿主細(xì)胞（NHC）對(duì)照孔中，同時(shí)做2份陽(yáng)性對(duì)照和1份陰性對(duì)照，室溫孵化30min。

（2）棄去酶標(biāo)板中的溶液，每孔加300μl洗滌液洗滌3～5次，每次靜置2～3min，最后一次用吸水紙拍干。

（3）每孔加酶標(biāo)二抗100μl，室溫孵化30min。

（4）重復(fù)（2）步驟，每孔加底物溶液100μl，室溫孵化15min。

（5）每孔加終止液100μl終止反應(yīng)，用酶標(biāo)儀測(cè)定OD650值。

1.3 結(jié)果判定

檢測(cè)結(jié)果若出現(xiàn)陽(yáng)性對(duì)照PRRS孔OD值與陰性對(duì)照PRRS孔OD值之差≥0.15，陽(yáng)性對(duì)照NHC孔OD值≤0.12，陰性對(duì)照NHC孔OD值≤0.25者，判定為有效，否則判結(jié)果無效，必須重做。PRRS抗體的檢測(cè)結(jié)果根據(jù)樣品與陽(yáng)性對(duì)照的比值S/P計(jì)算：

當(dāng)S/P≥0.40時(shí)被檢樣品判為陽(yáng)性；當(dāng)S/P＜ 0.40時(shí)被檢樣品判為陰性。

2 檢測(cè)結(jié)果

整個(gè)調(diào)查共采血160份，檢出陽(yáng)性結(jié)果7份，陽(yáng)性率為4.38%。

3 小結(jié)與討論

（1）本次結(jié)果顯示，PRRS感染的陽(yáng)性率為4.38%，低于王生祥［2］、馬利青［3］的報(bào)道，這與當(dāng)時(shí)豬藍(lán)耳病流行有關(guān)。

（2）目前，國(guó)內(nèi)外診斷PRRS常用的血清學(xué)方法較多，有間接熒光抗體試驗(yàn)（IFA）、免疫過氧化物酶單層試驗(yàn)（IPMA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、血清中和試驗(yàn)（SN）［4］。本試驗(yàn)選用IDEXX公司的ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，該方法用正常細(xì)胞培養(yǎng)物包被孔作為對(duì)照，血清作40倍稀釋，減少了血清與細(xì)胞成分間的非特異性反應(yīng)，降低了試驗(yàn)誤差，提高了準(zhǔn)確度，所測(cè)結(jié)果穩(wěn)定，重復(fù)性好，操作簡(jiǎn)單快速，可用于大規(guī)模血樣檢測(cè)。

（3）豬藍(lán)耳病的傳播常發(fā)生于豬只之間的密切接觸，因此豬只移動(dòng)成為最主要的傳播方式。加強(qiáng)對(duì)調(diào)運(yùn)生豬的監(jiān)管，嚴(yán)格執(zhí)行生豬運(yùn)輸?shù)膱?bào)檢制度，這些措施對(duì)控制本病的流行和傳播具有十分重要的意義。

（4）由于散養(yǎng)農(nóng)戶的仔豬來源主要是外地販運(yùn)仔豬，并且飼養(yǎng)管理較差，因此，大力發(fā)展母豬養(yǎng)殖，提高生豬自販自育水平，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，也是防治本病流行的重要途徑之一。

（5）目前疫苗注射仍然是防治本病的最重要的手段之一，因此，在生豬飼養(yǎng)的各個(gè)環(huán)節(jié)注重疫苗免疫注射，注意注射方法和注射劑量，確保免疫抗體達(dá)到保護(hù)水平，對(duì)控制和凈化豬藍(lán)耳病病具有決定性的意義。

［1］ 郭寶清，陳章水，劉文興，等.應(yīng)用間接血凝法從國(guó)內(nèi)生殖障礙綜合征豬群中測(cè)定生殖和呼吸系統(tǒng)綜合征抗體的研究［J］.中國(guó)獸醫(yī)科技，1996，26（30）：3-5.

［2］ 王生祥，王裕敦，許丙根，等.用ELISA檢測(cè)豬生殖和呼吸綜合征血清抗體［J］.青海畜牧獸醫(yī)雜志，1997，27（6）：20-21.

［3］ 馬利青.豬繁殖與呼吸綜合征的血清學(xué)調(diào)查［J］.青海畜牧獸醫(yī)雜志，2000，30（4）：29.

［4］ 朵紅.豬生殖和呼吸系統(tǒng)綜合征診斷技術(shù)研究進(jìn)展［J］.青海畜牧獸醫(yī)雜志，2003，33（5）：47-48.