紫外分光光度法測定柚子中維生素C的含量

胡慶蘭， 豐 蒙

(湖北第二師范學院 化學與生命科學學院， 武漢 430205)

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紫外分光光度法測定柚子中維生素C的含量

胡慶蘭， 豐 蒙

(湖北第二師范學院 化學與生命科學學院， 武漢 430205)

建立以pH=1的鹽酸溶液為溶劑，用紫外分光光度法直接測定柚子中維生素C的含量的方法。維生素C在4—140μg/mL濃度范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為：y=0.0253x+0.1450，R2=0.9974。加標回收率在94.9039%-96.3079%之間,RSD為1.85%。

柚子； 維生素C； 紫外分光光度法

維生素C又叫L-抗壞血酸，在日常生活中具有十分顯著的作用，也是一種常見的水溶性維C。主要生理功能有：促進骨膠原的生物合成，促進氨基酸中絡氨酸和色氨酸的代謝，利于組織創(chuàng)傷口的更快愈合，延長機體壽命；改善鐵、鈣和葉酸的利用；改善脂肪和類脂特別是膽固醇的代謝，增強機體對外界環(huán)境的抗應激能力和免疫力，預防心血管疾?。环乐寡来渤鲅?，促進牙齒和骨骼的生長。測定方法主要有2，6-二氯靛酚滴定法[1]碘量法[2]可見光分光光度法[3-5]紫外分光光度法[4-10]。測定維生素C的方法有很多，為了能夠達到快速簡便的檢測柚子中維生素C的含量的目的，本次試驗采用直接紫外分光光度法測定柚肉中維生素C的含量，效果顯著，所得結(jié)果快速準確。

1 實驗部分

1.1 實驗儀器和試劑

儀器：分析天平(FA2004B電子天平，上海精密科學儀器有限公司)、TU-1810紫外分光光度計(北京普析儀器有限責任公司)、電熱鼓風干燥箱(上海蘇進儀器設(shè)備廠監(jiān)制，南通滬南科學儀器有限公司制造)、臺式離心機80-2(常州國華電器有限公司)

試劑：抗壞血酸、硫酸、氫氧化鈉、濃鹽酸和硝酸(以上均為分析純)新鮮的柚子

1.2 實驗原理

紫外分光光度法是在紫外光區(qū)(200-400nm)的特定波長處或者一定范圍內(nèi)的吸光度，對物質(zhì)進行定性和定量分析。根據(jù)維生素C具有對紫外產(chǎn)生吸收和對堿的不穩(wěn)定性特征，在pH=1的條件下，于236nm處測定樣品液與堿處理液兩者吸光度之差，根據(jù)標準曲線方程，計算得出樣品中Vc的含量。

1.3 樣品的處理

取柚肉20.00g于研缽中，加入10.00mL10%HCl,研磨成勻漿，然后放入離心管中，以8000r/s 離心10min，取上層清液，即為提取液。

1.4 最大吸收波長的測定

在200-400nm對溶液進行掃描，得出最大吸收波長為236nm

1.5 pH的選擇

由于抗壞血酸易被空氣氧化，而它在酸性條件下較穩(wěn)定，因此，在此試驗中，應在酸性環(huán)境下進行測量，在不同pH條件下，測量維生素C的吸光度，并由此選擇最適宜的pH。本實驗維生素C標準溶液及樣品處理液最適宜的pH為1。

1.6 標準曲線的繪制

先取一定量的抗壞血酸標準溶液，用TU-1810紫外分光光度計以上述鹽酸溶液為參比，在200nm-400nm范圍內(nèi)測繪Vc的吸收光譜，以確定其最大吸收波長。

分別用移液管取上述抗壞血酸標準溶液2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL于50mL容量瓶中，用上述鹽酸溶液定容，備用。

標準曲線的繪制：

稱取抗壞血酸100mg(精確到0.1mg)，用上述鹽酸溶液溶解，小心轉(zhuǎn)移到1L容量瓶中，并稀釋至刻度，混勻備用。此時抗壞血酸的濃度為100mg/L。吸取2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL抗壞血酸標準溶液于50mL容量瓶，并用上述鹽酸溶液定容混勻備用。此時它們的溶液濃度分別為4mg/L、8mg/L、12mg/L、16mg/L、20mg/L。以鹽酸溶液為參比溶液于波長為236nm處，測定標準系列抗壞血酸的吸光度。以吸光度值與抗壞血酸的濃度Cvc繪制標準曲線。

表1 標準曲線的測量

得出y=0.0253x+0.1450 R2=0.9974

1.7 樣品吸光度的測定

取柚肉20.00g于研缽中，加入10.00mL1%HCl,研磨成勻漿，然后放入離心管中，以8000r/s 離心10min，取上層清液，配制成樣品標準溶液100mL。平行實驗三次，標記為1、2、3。測得結(jié)果取平均值，通過標準曲線 中的線性方程y=0.0253x+0.1450，以及計算中維生素C含量的計算公式計算獲得柚子中維生素C的含量。

表2 樣品吸光度的測定

1.8 加標回收率

為了保證分析結(jié)果的可靠性，了解試樣中干擾物質(zhì)的影響，應用本法對樣品進行加標回收實驗。

A組取1.00ml提取液，放入盛有4ml鹽酸溶液(均為上述溶液配制中的鹽酸溶液)的50ml容量瓶中，用去離子水定容至刻度，搖勻備用。

B組取1.00ml提取液，并加入盛有1.00ml標準抗壞血酸溶液，放入盛有4ml鹽酸溶液的50ml容量瓶中，用去離子水定容至刻度，搖勻備用。

C組吸取1.00ml提取液，并加入4ml上述氫氧化鈉溶液，混勻，15min左右(讓樣品中的維生素C與氫氧化鈉充分反應)，加入4.00ml鹽酸溶液，再用去離子水定容至刻度，搖勻備用。

以C組為空白對照，測定相應的吸光度值，并記錄。

表3 加標回收率

2 結(jié)論

本實驗采用直接紫外分光光度法在pH=1的條件下來測定柚子中維生素C的含量。線性方程為： y=0.0253x+0.1450，R2=0.9974。線性范圍為：4-140μg/mL。

使用紫外分光光度法測定維生素C含量，方法簡單，快速，結(jié)果較為準確，且不會因為樣品本身顏色而導致影響實驗結(jié)果。此次實驗，所得結(jié)果較為低下，但用此種方法，仍然可以在較短時間內(nèi)獲取結(jié)果，說明紫外分光光度法不受限于較低含量的維生素C的測定。

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Determination of Vitamin C in Pomelo by Uv Spectrophotometry

HU Qing-lan, FENG Meng

(College of Chemistry and Life Sciences, Hubei University of Education, Wuhan 430205, China)

This paper attempts to establish a pH=1 hydrochloric solution as the solvent and draw direct determination of the content of vitamin C in pomelo by UV. Vitamin C in the 4-140μg / mL concentration range and absorbance was linear. And the regression equation is:y=0.0253x+0.1450, R2=0.9974.The detection limit is 0.12μg / mL, the recoveries in between94.9039%-96.3079%. The RSD is 1.8523%.

pomelo; Vitamin C; Uv spectrophotometry

2016-07-03

胡慶蘭(1965-)女 ，高級工程師，研究方向為分析化學。

O65

A

1674-344X(2016)08-0005-03