九龍蟲(chóng)散對(duì)慢性支氣管炎大鼠模型氧自由基及內(nèi)皮素-1的影響

胡小杰 潘朝旺

鄂州職業(yè)大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北 鄂州 436000

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九龍蟲(chóng)散對(duì)慢性支氣管炎大鼠模型氧自由基及內(nèi)皮素-1的影響

胡小杰 潘朝旺

鄂州職業(yè)大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北 鄂州 436000

目的：觀察九龍蟲(chóng)對(duì)脂多糖煙霧誘導(dǎo)慢性支氣管炎模型大鼠超氧自由基和內(nèi)皮素-1(ET-1)的影響。方法：取雄性SD大鼠60只，用脂多糖煙霧誘導(dǎo)法復(fù)制慢性支氣管炎模型，經(jīng)給藥治療后，測(cè)定血清和肺組織中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和內(nèi)皮素-1(ET-1)含量。結(jié)果：與正常組比較，模型組血清和肺組織SOD水平降低(P<0.01)，MDA和ET-1含量升高(P<0.01)；各給藥組與模型組比較，以上指標(biāo)均有改善(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論：九龍蟲(chóng)具有抗慢性支氣管炎作用，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)SOD、MDA和ET-1水平有關(guān)。

九龍蟲(chóng)；慢性支氣管炎；超氧化物歧化酶；丙二醛；內(nèi)皮素-1

慢性支氣管炎是臨床上一種常見(jiàn)病和多發(fā)病，以咳嗽、咳痰或伴有氣喘等反復(fù)發(fā)作為主要癥狀。本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)在研究九龍蟲(chóng)對(duì)慢性支氣管炎模型大鼠血清和肺組織SOD、MDA和ET-1的影響，探討其抗慢性支氣管炎作用機(jī)制。

1 儀器與材料

1.1 動(dòng)物 清潔級(jí)雄性SD大鼠，體重(200±20)g，由成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，許可證號(hào):SCXK(川2013-24)。

1.2 藥物與試劑 九龍蟲(chóng)散(本院自制，用前配成混懸液)； SOD(批號(hào)：20160115)、ET-1(批號(hào)：20151223)等試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所；桂龍咳喘寧膠囊(批號(hào)：20160106，桂龍藥業(yè)(安徽)有限公司)。

1.3 儀器 PT-MR3100D組織勻漿機(jī)(瑞士Polytron公司)；Z160M微量高速離心機(jī)(德國(guó)HERMLE)；臺(tái)式冷凍離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器公司)； UV754紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海佑科儀器儀表有限公司)。

2 方法

2.1 動(dòng)物造模及分組給藥 隨機(jī)抽10只大鼠，為正常組。其余54只參照文獻(xiàn)[1]建立脂多糖煙霧誘導(dǎo)慢性支氣管大鼠模型：實(shí)驗(yàn)第1、14天將大鼠麻醉，固定，將0.1%脂多糖200μL用靜脈導(dǎo)管針套管快速注入氣管；從第2天開(kāi)始，將大鼠分置在自制的2個(gè)煙室中，煙室大小為100cm×60cm×40cm，每個(gè)煙室放置27只大鼠，用硫磺1.5 g及煙葉、刨花、鋸末各10g混勻，點(diǎn)燃熏煙，每天2次，每次1h，持續(xù)到第28天(第14天除外)，第29天，將造模大鼠隨機(jī)抽取4只，取肺組織切片，觀察造模是否成功。正常組在無(wú)煙環(huán)境中正常飼養(yǎng)。將以上造模成功的大鼠混合并隨機(jī)分為5組，即模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、九龍蟲(chóng)高、中、低劑量組，加上正常組共6組，正常組及模型組給予生理鹽水15mL/kg·d，陽(yáng)性對(duì)照組給予桂龍咳喘寧膠囊混懸液0.75g/kg·d，九龍蟲(chóng)高、中、低劑量組分別給予九龍蟲(chóng)混懸液0.04、0.02、0.01g/kg·d，連續(xù)給藥15d。

2.2 觀察指標(biāo)

2.2.1 血清SOD、MDA和ET-1的測(cè)定 末次給藥24h后，將大鼠斷頭取血約8mL，3000 r/min離心15min，制備血清，按試劑盒說(shuō)明測(cè)定血清中SOD、MDA和ET-1含量。

2.2.2 肺組織SOD、MDA和ET-1的測(cè)定 大鼠處死后，在右肺中葉距離肺門(mén)1/3取肺組織約0.5g，用4℃生理鹽水漂洗，吸濕，稱重，剪碎，加入預(yù)冷的9倍生理鹽水，用組織勻漿機(jī)制成10%的肺組織勻漿。3000 r/min離心15min，按試劑盒說(shuō)明測(cè)定SOD、MDA和ET-1含量。

3 結(jié)果

3.1 對(duì)血清SOD、MDA和ET-1的影響 與正常組比較，模型組血清SOD水平降低(P<0.01)，MDA和ET-1含量升高(P<0.01)；各給藥組與模型組比較，SOD水平升高(P<0.05或P<0.01)，MDA和ET-1含量明顯降低(P<0.05或P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 九龍蟲(chóng)對(duì)慢性支氣管炎大鼠血清SOD、MDA、ET-1的影響

組別劑量/g/kg動(dòng)物數(shù)量/只SOD/U/mLMDA/nmol/mLET-1/pg/mL正常組蒸餾水10 69.4±11.7**6.53±1.15**64.75±10.22**模型組蒸餾水743.5±6.4 8.78±1.50 119.86±18.23 陽(yáng)性對(duì)照組0.759 60.1±10.0**6.62±1.13**75.15±12.03**九龍蟲(chóng)高劑量組0.049 68.5±11.2**62.1±9.3** 6.56±1.03**九龍蟲(chóng)中劑量組0.028 6.63±1.20**75.54±12.32**82.32±14.38**九龍蟲(chóng)低劑量組0.01854.6±9.4*6.94±1.45* 95.63±16.24*

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

3.2 對(duì)肺組織SOD、MDA和ET-1的影響 與正常組比較，模型組肺組織SOD水平明顯降低(P<0.01)，MDA和ET-1含量明顯升高(P<0.01)；各給藥組與模型組比較，SOD水平明顯升高(P<0.05或P<0.01)，MDA和ET-1含量明顯降低(P<0.05或P<0.01)。見(jiàn)表2。

表2 九龍蟲(chóng)對(duì)慢性支氣管炎大鼠肺組織勻漿SOD、MDA、ET-1的影響 ±s)

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

4 討論

研究表明[3]，氧化應(yīng)激可引起和促進(jìn)氣道中多種炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，從而導(dǎo)致慢性支氣管炎。SOD是一種清除體內(nèi)氧自由基的重要酶，是機(jī)體抵抗氧化損傷的保護(hù)屏障之一，可以保護(hù)呼吸道細(xì)胞免受氧化損傷，減少炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，從而維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，具有非常重要的意義。MDA作為機(jī)體細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的一種產(chǎn)物，其含量越高表示機(jī)體氧化損傷程度越大，炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生就會(huì)越多，容易引起和加重慢性支氣管炎的病情。研究結(jié)果顯示，九龍蟲(chóng)可有效提高慢性支氣管炎大鼠血清和肺組織SOD水平，而降低MDA含量。(P<0.05)。

ET-1是目前發(fā)現(xiàn)最強(qiáng)的縮血管物質(zhì)，是由內(nèi)皮細(xì)胞合成內(nèi)源性肽類物質(zhì)，可引起肺血管收縮、支氣管收縮以及氣道和肺血管平滑肌增生，并且上調(diào)炎癥反應(yīng)，在慢性支氣管炎的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，九龍蟲(chóng)可有效降低慢性支氣管炎大鼠血清和肺組織ET-1含量(P<0.05)。

綜上所述，九龍蟲(chóng)具有抗慢性支氣管炎的作用，其機(jī)制可能與提高機(jī)體血清和肺組織SOD水平，降低MDA和ET-1含量有關(guān)。

[1]張良芝，謝文英，常學(xué)輝.愛(ài)羅咳喘寧口服液對(duì)慢性支氣管炎大鼠模型LTB4、IL-8 表達(dá)的影響[J].中醫(yī)學(xué)報(bào)，2014，29(19)：1267-1268．

[2]王勤，鄧家剛，楊柯，等. 芒果苷對(duì)慢性支氣管炎大鼠炎癥因子及小鼠巨噬細(xì)胞環(huán)氧化酶-2表達(dá)的影響[J].中國(guó)中藥雜志，2011，36(10)：1348-1352．

[3]MENG Y，YU C，LI T，et al. Expression and significance of Toll-like receptor-4 in rats lung established by passive smoking orassociated with intratracheal instillation of lipopolysaccharide[J]. Chin Med J，2013，93(28)：2230-2234.

(編輯：梁志慶)

2016-07-20

湖北省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(B2016537)。

胡小杰(1981-)，男，講師，主要從事醫(yī)學(xué)教學(xué)與研究。

R285.5

A

1007-8517(2016)20-0016-02