蟲(chóng)草益腎顆粒對(duì)高糖培養(yǎng)下人腎小球系膜細(xì)胞增殖和CAT、MDA表達(dá)水平的影響*

宋立群劉 爽宋業(yè)旭贠 捷張 睿欒仲秋△

（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江哈爾濱 150040）

蟲(chóng)草益腎顆粒對(duì)高糖培養(yǎng)下人腎小球系膜細(xì)胞增殖和CAT、MDA表達(dá)水平的影響*

宋立群1劉 爽2宋業(yè)旭2贠 捷1張 睿2欒仲秋1△

（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江哈爾濱 150040）

目的 觀察蟲(chóng)草益腎顆粒對(duì)高糖培養(yǎng)下人腎小球系膜細(xì)胞（HMC）的增殖及過(guò)氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）表達(dá)水平的影響，探討其防治糖尿病腎?。―KD）的作用機(jī)制。方法 將HMC隨機(jī)分為6組:正常組、高糖組、福辛普利組、蟲(chóng)草益腎顆粒低、中、高劑量組，分別給予相應(yīng)的含藥血清處理后，用2-（2-甲氧基-4-硝苯基）-3-（4-硝苯基）-5-（2，4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽（CCK-8）檢測(cè)24 h、48 h及72 h細(xì)胞增殖情況；收集48 h和72 h細(xì)胞上清液，用比色法分別檢測(cè)各組CAT、MDA的表達(dá)水平。結(jié)果 HMC經(jīng)高糖刺激后表現(xiàn)出明顯增殖現(xiàn)象，且在24～48 h時(shí)增殖速度最快，48～72 h時(shí)增殖速度受抑制。各治療組對(duì)高糖刺激下的HMC增殖均有抑制作用（P＜0.01），且蟲(chóng)草益腎顆粒對(duì)HMC增殖的抑制作用呈時(shí)間與劑量依賴(lài)性關(guān)系。48 h、72 h時(shí)，與正常組比較，各組的CAT活性均明顯下降（P＜0.01），各組的MDA含量均明顯上升（P＜0.01），與高糖組比較，福辛普利組、蟲(chóng)草益腎顆粒低、中、高劑量組的CAT活性有明顯上升趨勢(shì)（P＜0.05或P＜0.01），MDA含量有明顯下降的趨勢(shì)（P＜0.01）。結(jié)論 蟲(chóng)草益腎顆粒益腎顆粒防治DKD的作用機(jī)制可能與促進(jìn)自由基清除，抑制或阻斷自由基引起的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，增強(qiáng)CAT活性，提高機(jī)體抗氧化能力有關(guān)。

蟲(chóng)草益腎顆粒 腎小球系膜細(xì)胞 糖尿病腎病 氧化應(yīng)激

糖尿病腎病（DKD）是糖尿病最嚴(yán)重的慢性微血管并發(fā)癥之一，現(xiàn)已成為終末期腎?。‥SRD）患者的最常見(jiàn)病因［1］。DKD的基本病理改變?yōu)榧?xì)胞外基質(zhì)聚集，基膜增厚，晚期出現(xiàn)彌漫性腎小球硬化，最終導(dǎo)致腎衰竭［2］。在這一變化中，腎小球系膜細(xì)胞（MC）起了重要的作用，所以，利用體外培養(yǎng)MC進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)研究，對(duì)深入了解腎臟病理生理變化及發(fā)病機(jī)制具有十分重要的作用［3-4］。近年來(lái)，關(guān)于DKD發(fā)病機(jī)制的研究顯示，細(xì)胞的氧化應(yīng)激反應(yīng)對(duì)糖尿病微血管并發(fā)癥的病情發(fā)展起著重要作用，氧化反應(yīng)可使腎臟細(xì)胞內(nèi)的抗氧化酶發(fā)生糖化或氧化，腎組織抗氧化能力降低［5］。而高糖、血管活性物質(zhì)以及細(xì)胞因子等因素是刺激MC的主要因素。本研究在既往研究的基礎(chǔ)上［6-7］，通過(guò)觀察蟲(chóng)草益腎顆粒含藥血清對(duì)高糖培養(yǎng)下人腎小球系膜細(xì)胞（HMC）增殖和氧化應(yīng)激的影響，探究蟲(chóng)草益腎顆粒防治DKD的作用機(jī)制，尋找DKD新的抗氧化治療方案，為蟲(chóng)草益腎顆粒的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)研究及臨床應(yīng)用提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雄性Wistar大鼠50只，體質(zhì)量（220±20）g，購(gòu)于哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，許可證號(hào):SCXK（黑）2015-001。飼養(yǎng)溫度:（20±2）℃。相對(duì)濕度:30%～35%，通風(fēng)良好，自然光照。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室為清潔級(jí)。實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物的處理方法符合中華人民共和國(guó)科學(xué)技術(shù)部頒發(fā)的 《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見(jiàn)》［8］。

1.2 試藥與儀器 蟲(chóng)草益腎顆粒（組成:發(fā)酵蟲(chóng)草菌絲粉、黃芪、貓須草、制大黃、水蛭）由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院制備，規(guī)格為12 g/袋，發(fā)酵蟲(chóng)草菌絲粉由江西金水寶制藥有限公司提供，其余藥材飲片均從黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院中草藥局一次性選購(gòu)。福辛普利（蒙諾）購(gòu)于中美上海施貴寶制藥有限公司，規(guī)格:10 mg/片，批號(hào):1405054。改良型RPMI-1640培養(yǎng)液，胎牛血清（FBS），胰酶，PBS，均為Hy Clone公司產(chǎn)品（美國(guó)），購(gòu)自上海恒斐生物科技有限公司（北京）。細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒CCK-8:日本同仁；25 cm2一次性培養(yǎng)瓶，96孔板，24孔板:美國(guó)Corning公司；細(xì)胞級(jí)葡萄糖干粉:美國(guó)SIGMA公司。丙二醛（MDA）和過(guò)氧化氫酶（CAT）試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。倒置相差顯微鏡（ZEISS公司，Vert.A1），超凈工作臺(tái)（北京王堂藍(lán)翼科技有限公司，WT-IND），低速水平臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠，TDL-4），二氧化碳培養(yǎng)箱（上海力申科學(xué)儀器有限公司，HF 151UV），電熱恒溫水浴鍋（上海一恒科技儀器有限公司，HWS-24），紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司，UV754N）。酶標(biāo)儀（芬蘭Labsystems公司，Multiskan 354）。

1.3 含藥血清的制備 健康雄性Wistar大鼠50只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，隨機(jī)分為5組:正常組，福辛普利組，蟲(chóng)草益腎顆粒低、中、高劑量組。按人與大鼠體表面積換算等效劑量法，以成人臨床等效劑量為低劑量組［3.24 g/（kg·d）］，低劑量組2倍為中劑量組 ［6.48 g/（kg·d）］，低劑量組的4倍為高劑量組［12.96 g/（kg·d）］，福辛普利組［0.9 mg/（kg·d）］灌胃，正常組給予等體積0.9%氯化鈉注射液灌胃，每組每日灌胃1次，連續(xù)給藥7 d，自由飲食。于末次給藥后2 h，在無(wú)麻醉情況下予以眼眶取血，3000 r/min離心15 min取上清液，將各組相同時(shí)間點(diǎn)的藥物血清混合，56℃水浴鍋30 min滅活補(bǔ)體，超凈臺(tái)內(nèi)經(jīng)0.22 μm孔徑針頭過(guò)濾器過(guò)濾除菌，分裝后-80℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 細(xì)胞培養(yǎng) HMC 7～10代，由哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院腎內(nèi)科焦軍東教授惠贈(zèng)，接種于含10%的FBS的RPMI-1640培養(yǎng)液的25 cm2培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)箱環(huán)境:37℃、含5%CO2、恒溫。細(xì)胞培養(yǎng)至生長(zhǎng)狀態(tài)良好，至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.5 分組與給藥 將正常培養(yǎng)的HMC隨機(jī)分為6組:正常組 （含10%正常大鼠血清+RPMI-1640培養(yǎng)液），高糖組 （含10%正常大鼠血清+30 mmol/L葡萄糖+RPMI-1640培養(yǎng)液），福辛普利組（含10%福辛普利含藥血清+30 mmol/L葡萄糖+RPMI-1640培養(yǎng)液），蟲(chóng)草益腎顆粒低劑量組（含10%蟲(chóng)草益腎顆粒低劑量大鼠血清+30 mmol/L葡萄糖+RPMI-1640培養(yǎng)液），蟲(chóng)草益腎顆粒中劑量組（含10%蟲(chóng)草益腎顆粒中劑量大鼠血清+30 mmol/L葡萄糖+RPMI-1640培養(yǎng)液），蟲(chóng)草益腎顆粒高劑量組（含10%蟲(chóng)草益腎顆粒高劑量大鼠血清+30 mmol/L葡萄糖+RPMI-1640培養(yǎng)液）。

1.6 觀察項(xiàng)目 1）CCK-8法檢測(cè)不同處理方法對(duì)HMC增值的影響:待細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)，用0.25%的胰酶消化后吹散成單細(xì)胞懸液，以7～8×103/孔接種于96孔板中，置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁，換無(wú)血清RPMI-1640培養(yǎng)液培養(yǎng)24 h，同步化各組細(xì)胞。按24 h、48 h、72 h 3個(gè)時(shí)間點(diǎn)分3塊96孔板，每塊板隨機(jī)分成6組，每組設(shè)10個(gè)副孔，按組分別加入配置好的含不同藥物血清濃度的培養(yǎng)液，置入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待到指定時(shí)間點(diǎn)（24 h、48 h、72 h）時(shí)，每孔加入10 μL CCK8溶液，置于培養(yǎng)箱中孵育4 h后取出，用酶標(biāo)儀檢測(cè)在450 nm波長(zhǎng)時(shí)各孔吸光度。2）MDA、CAT檢測(cè):待細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)，用0.25%的胰酶消化后吹散成單細(xì)胞懸液，以（2～3）×104接種于24孔板中，置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁，換無(wú)血清RPMI-1640培養(yǎng)液培養(yǎng)24 h，同步化各組細(xì)胞，按上述方法分組與給藥，每組設(shè)8個(gè)副孔，并于48 h、72 h分別收集各組細(xì)胞上清液，1500 r/min離心10 min后待測(cè)。采用比色法測(cè)細(xì)胞上清液中MDA、CAT水平，均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。計(jì)量資料以（±s）表示，多組數(shù)據(jù)之間采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用Dunnet t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組含藥血清對(duì)HMC在不同作用時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞增殖的影響 見(jiàn)圖1，表1。與正常組比較，高糖（30 mmol/L）條件下，HMC在24 h、48 h、72 h 3個(gè)時(shí)間點(diǎn)均有細(xì)胞增殖的效應(yīng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。尤其在24～48 h時(shí)HMC增殖速度最快，而48～72 h時(shí)，高糖環(huán)境下細(xì)胞增殖速度降低。高糖組內(nèi)HMC在48 h與72 h的增殖情況比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在24 h時(shí)，與高糖組相比，福辛普利組、蟲(chóng)草益腎顆粒低、中劑量組對(duì)HMC的增殖作用未起到明顯的抑制效應(yīng) （P＞0.05），而蟲(chóng)草益腎顆粒高劑量組的OD值降低 （P＜0.05），可有效抑制HMC的增殖。隨著給藥時(shí)間的延長(zhǎng)，48 h和72 h時(shí)，與高糖組比較，福辛普利組與蟲(chóng)草益腎顆粒低、中、高劑量組均出現(xiàn)了對(duì)HMC生長(zhǎng)的抑制作用（P＜0.05或 P＜0.01），提示蟲(chóng)草益腎顆粒對(duì)高糖條件下HMC生長(zhǎng)抑制作用有劑量-效應(yīng)依賴(lài)關(guān)系及時(shí)間-效應(yīng)依賴(lài)關(guān)系。

圖1 不同時(shí)間高糖對(duì)人腎小球系膜細(xì)胞CCK-8的OD值影響

表1 各組含藥血清對(duì)HMC在不同時(shí)間點(diǎn)OD值比較（±s）

表1 各組含藥血清對(duì)HMC在不同時(shí)間點(diǎn)OD值比較（±s）

與正常組同時(shí)間比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與高糖組同時(shí)間比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；與同組48 h比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。下同。

組別 n 72 h正常組 10 0.988±0.094高糖組 10 1.393±0.069**福辛普利組 10 1.111±0.122**△△▲24 h 48 h 0.339±0.085▲▲0.975±0.136 0.663±0.108**▲▲1.373±0.098**0.573±0.119**▲▲1.215±0.108**△△蟲(chóng)草益腎顆粒低劑量組 10 1.206±0.051**△△0.633±0.100**▲▲1.251±0.117**△蟲(chóng)草益腎顆粒中劑量組 10 0.614±0.099**▲▲1.221±0.116**△1.149±0.069**△△▲蟲(chóng)草益腎顆粒高劑量組 10 0.515±0.055**△△▲▲1.184±0.093**△△1.096±0.059*△△▲

2.2 各組含藥血清對(duì)HMC的CAT活力和MDA含量影響 見(jiàn)表2。1）各組CAT活力的比較，48 h或72 h時(shí)，與正常組比較，高糖組、福辛普利組、蟲(chóng)草益腎顆粒低、中、高劑量組的CAT活力均明顯下降（P＜0.01），提示在高糖環(huán)境下，HMC的抗氧化能力下降。與高糖組比較，福辛普利組、蟲(chóng)草益腎顆粒低、中、高劑量組的CAT活性有明顯上升趨勢(shì)（P＜0.05或P＜0.01），提示各治療組均有療效，可改善HMC抗氧化能力。其中以福辛普利組和蟲(chóng)草益腎顆粒高劑量組效果最明顯。2）各組MDA含量的比較，48 h或72 h時(shí)，與正常組比較，高糖組、福辛普利組、蟲(chóng)草益腎顆粒低、中、高劑量組的MDA含量均明顯上升（P＜0.01），提示高糖環(huán)境下，HMC的脂質(zhì)過(guò)氧化程度明顯加劇。與高糖組比較，福辛普利組、蟲(chóng)草益腎顆粒低、中、高劑量組的MDA含量有明顯下降的趨勢(shì)（P＜0.01），提示各治療組均有療效，可減輕活性氧對(duì)生物膜的損傷，其中以蟲(chóng)草益腎顆粒高劑量組的療效最顯著。

表2 各組含藥血清對(duì)人腎小球系膜細(xì)胞CAT活力和MDA含量的影響（±s）

表2 各組含藥血清對(duì)人腎小球系膜細(xì)胞CAT活力和MDA含量的影響（±s）

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3 討 論

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察HMC在高糖環(huán)境下3個(gè)時(shí)間點(diǎn)（24 h、48 h、72 h）的增殖情況，發(fā)現(xiàn)在早期（24～48 h）系膜細(xì)胞增殖速度增快，而長(zhǎng)期（48～72 h）高糖環(huán)境下細(xì)胞增殖速度降低，由此可見(jiàn)，高糖環(huán)境下HMC的增殖呈現(xiàn)雙相過(guò)程［9-11］，并證實(shí)了高糖刺激HMC增殖研究選擇的時(shí)間點(diǎn)有意義。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:48 h的高糖組與72 h的高糖組比較，HMC的增殖情況變化不明顯，對(duì)于同一處理因素（同一給藥組）的不同作用時(shí)間（48 h、72 h）下的兩組，可進(jìn)行觀察同一處理因素在不同作用時(shí)間對(duì)指標(biāo)的影響，結(jié)果提示，在同一藥物濃度作用下，比較不同作用時(shí)間組（48 h或72 h），發(fā)現(xiàn)作用72 h的要比作用48 h的療效更好 （即HMC增殖受抑制更明顯），故可認(rèn)為蟲(chóng)草益腎顆粒的效果具有時(shí)間依賴(lài)性。在同一作用時(shí)間（48 h或72 h），比較蟲(chóng)草益腎顆粒不同劑量組細(xì)胞增殖情況，發(fā)現(xiàn)隨著劑量的增高，HMC的增殖情況呈下降趨勢(shì)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，故可認(rèn)為蟲(chóng)草益腎顆粒的效果具有濃度依賴(lài)性。

正常情況下，機(jī)體具有一個(gè)完整的抗氧化防御系統(tǒng)，可通過(guò)抗氧化清除活性氧，使細(xì)胞的氧化和還原處于動(dòng)態(tài)平衡［12］。人體存在兩類(lèi)抗氧化系統(tǒng)［13］:一類(lèi)是酶抗氧化系統(tǒng)，包括超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和CAT；另一類(lèi)是非酶抗氧化系統(tǒng)，包括維生素C、維生素E、褪黑色素、類(lèi)胡蘿卜素等。其中，CAT是一種以鐵卟啉為輔基的酶，它能催化H2O2釋放新生態(tài)氧以氧化某些酚類(lèi)和胺類(lèi)物質(zhì)，使其失去活性氧的作用，保護(hù)機(jī)體［14］，因此，CAT活力的高低可間接反映細(xì)胞抗氧化能力的強(qiáng)弱［15］。MDA是氧自由基攻擊細(xì)胞膜中的不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化作用并因此形成的脂質(zhì)過(guò)氧化物，測(cè)試MDA的含量可反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度以及細(xì)胞膜損傷的程度，并間接反映體內(nèi)氧自由基的水平，體內(nèi)自由基長(zhǎng)期維持高水平的結(jié)果是導(dǎo)致酶抗氧化系統(tǒng)活性下降［16-17］，損傷機(jī)體。本研究結(jié)果表明，在高糖條件下，HMC增殖明顯，并產(chǎn)生了大量的自由基，對(duì)DNA、蛋白質(zhì)和生物膜的損傷增加，MDA升高，CAT活性下降，觀察48 h、72 h各給藥組的指標(biāo)變化，與高糖組比較各治療組的CAT活力均升高、MDA含量均減少，且隨著蟲(chóng)草益腎顆粒藥物濃度的增加或時(shí)間延長(zhǎng)，MDA含量顯著降低，表明細(xì)胞內(nèi)抗氧化物酶活性增強(qiáng)，對(duì)自由基的清除能力上升，由此可推斷，蟲(chóng)草益腎顆?？梢种艸MC增殖，并可改善高糖作用下引起的氧化應(yīng)激反應(yīng)，使CAT活性增高、MDA明顯降低，這可能是蟲(chóng)草益腎顆粒所含成分具有明顯的抗氧化作用，中藥清除超氧自由基、過(guò)氧化氫、差羥自由基等，使得CAT活力增加，也減少了氧自由基對(duì)組織和細(xì)胞的攻擊，使MDA含量下降，進(jìn)而達(dá)到防治DKD的功效。

蟲(chóng)草益腎顆粒由發(fā)酵蟲(chóng)草菌絲粉、黃芪、貓須草、制大黃、水蛭5味中藥組成，方中蟲(chóng)草為君藥，補(bǔ)肺、益腎；黃芪、制大黃為臣，補(bǔ)脾、活血、泄?jié)?；貓須草（別名腎茶）、水蛭為佐使，利濕、破血逐瘀、芳化濕濁，全方溫、清、補(bǔ)、消并用，共奏養(yǎng)護(hù)正氣、祛痰逐瘀、推陳致新之功效，對(duì)治療DKD患者正虛不足，痰瘀互結(jié)，久病失養(yǎng)有明顯療效［18］。通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，蟲(chóng)草益腎顆粒能抑制高糖環(huán)境下HMC的過(guò)度增殖，增強(qiáng)CAT活力，通過(guò)清除超氧自由基、過(guò)氧化氫、羥自由基等，減緩腎小球硬化，延緩病情進(jìn)展，起到保護(hù)腎臟的作用。與西藥比較中醫(yī)藥防治慢性腎臟病具有多靶點(diǎn)，不易產(chǎn)生耐藥性，長(zhǎng)期使用副作用少，臨床療效肯定等優(yōu)點(diǎn)，因此，對(duì)蟲(chóng)草益腎顆粒進(jìn)行基因、蛋白水平的進(jìn)一步研究具有重要意義，以期待尋找其抗氧化防治DKD的具體靶點(diǎn)和作用機(jī)制，這將是我們今后研究的主要目標(biāo)與方向。

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Effect of Chongcao Yishen Decoction on HMC Proliferation and Expression of CATMDA

SONG Liqun，LIU Shuang，SONG Yexu，et al. Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine，Heilongjiang，Harbin 150040，China.

Objective:To observe the effect of Chongcao Yishen Decoction on HMC proliferation and expression of CATMDA and to explore the mechanism of Chongcao Yishen Decoction in the treatment of DKD（Diabetic kidney disease）.Methods:HMC were divided into six groups:the control group，the glucose group，F(xiàn)osinopril group，and the Chongcao Yishen Decoction low，medium and high dosage groups.Cells were collected after respectively given the appropriate treatment.The human glomerular mesangial cells proliferative degree within 24，48 and 72 hours were detected by CCK-8 colorimetry；cells supernatant in 48 and 72 hours was collected，and according to the specifications，the expression of CATMDA was detect with colorimetric method（DNS method）. Results:In vitro cultured glomerular mesangial cells were obviously proliferated under the stimulation of high glucose.In the period from 24 h to 48 h，the speed of proliferation was highest，while in the period from 48 h to 72 h，the speed was inhibited.Each group had an inhibition on proliferation of HMC under the stimulation of high glucose（P＜0.01）.Chongcao Yishen Decoction had a significant inhibition on proliferation of HMC，and certain time and dose dependence has been detected.In 48 and 72 hours，compared with control group，CAT activity of other groups was significantly decreased（P＜0.01）；the expression of MDA was significantly increased（P＜0.01）. Compared with the high glucose group，CAT activity in Fosinopril group and Chongcao Yishen Decoction low，medium and high dosage groups obviously tend to ascent（P＜0.05 or P＜0.01）；the expression of MDA had a significant lower tendency（P＜0.01）.Conclusion:The possible therapeutic mechanism of Chongcao Yishen Decoction for DKD is related to inhibiting lipid peroxidation，eliminating free radicals，raising CAT activities and im-proving the antioxidant capacity.

Chongcao Yishen Decoction；Human glomerular memangial cell；Diabetic kidney disease；Oxidative stress

·研究報(bào)告·

R587.2

A

1004-745X（2016）10-1833-05

10.3969/j.issn.1004-745X.2016.10.001

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81273911）；教育部高等學(xué)校博士學(xué)科重點(diǎn)專(zhuān)項(xiàng)科研基金資助項(xiàng)目（20112327110002）；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)研究生創(chuàng)新科研項(xiàng)目（yjscx2016005）

△（電子郵箱：530542700@qq.com）

（2016-06-20）