負壓屏障設(shè)施實驗動物獸醫(yī)的職責*

鹿雙雙 李曉燕 榮 蓉 師曉萌 盧選成*

負壓屏障設(shè)施實驗動物獸醫(yī)的職責*

鹿雙雙①李曉燕①榮 蓉①師曉萌①盧選成①*

目的：闡述在負壓屏障設(shè)施工作中實驗動物獸醫(yī)的職責。方法：文獻評閱實驗動物獸醫(yī)相關(guān)的文獻和資料，結(jié)合實際工作經(jīng)驗，對負壓屏障設(shè)施內(nèi)實驗動物獸醫(yī)的職責提煉總結(jié)。結(jié)果：通過參考有關(guān)文獻關(guān)于實驗動物獸醫(yī)職責的論述，對負壓屏障設(shè)施實驗動物獸醫(yī)的職責進行歸納總結(jié)。結(jié)論：循證研究負壓屏障設(shè)施實驗動物獸醫(yī)的職責，可為負壓屏障設(shè)施的管理提供參考。

負壓屏障設(shè)施；實驗動物獸醫(yī)；職責

［First-author’s address］ Chinese Center for Disease Control and Prevention， Beijing 102206，China.

美國“實驗動物管理和使用指南”（Animals，Guide，1996）［1］中實驗動物獸醫(yī)是指具有獸醫(yī)學位且由認證獲得相應資質(zhì)、或有相應實驗動物科學或者相關(guān)實驗動物種系的培訓或工作經(jīng)驗的獸醫(yī)［2］。實驗動物獸醫(yī)是具有獸醫(yī)資質(zhì)且從事實驗動物管理、繁育、疾病診斷防治以及動物試驗和研究的人員，通常實驗動物獸醫(yī)是指實驗動物臨床獸醫(yī)或?qū)嶒瀯游镏鞴塬F醫(yī)［3］。

1 實驗動物獸醫(yī)職責

各國對實驗動物獸醫(yī)職責的描述都有一定的法律法規(guī)。根據(jù)“實驗動物管理和使用指南”以及實驗動物管理和使用委員會（institutional animal care use Committee，IACUC）［4］中對獸醫(yī)職責的描述，實驗動物獸醫(yī)的職責包括：①參與動物有關(guān)研究項目的審核；②動物的購買和運輸；③預防醫(yī)學，包括動物隔離檢疫、隔離以及監(jiān)控、診斷、治療和控制疾病；④處理實驗相關(guān)的疾病或后遺癥；⑤動物福利的評價；⑥恰當?shù)氖中g(shù)和術(shù)后護理，包括適當?shù)逆?zhèn)痛和麻醉；⑦安樂死［5］。

2 負壓屏障設(shè)施的特點

2.1 屏障環(huán)境

按照空氣凈化的控制程度，實驗動物環(huán)境分為普通環(huán)境、屏障環(huán)境和隔離環(huán)境［6］。屏障環(huán)境適用于飼育清潔級實驗動物及無特定病原體級實驗動物。屏障環(huán)境分為正壓和負壓兩種［7］。正壓環(huán)境的動物實驗室適合飼養(yǎng)生產(chǎn)各種實驗動物以及進行非感染動物實驗（如藥物安全評價、各種免疫實驗等普通實驗）；而負壓環(huán)境的動物實驗室則適合于非烈性傳染病的感染動物實驗［8］。

2.2 屏障設(shè)施

獨立通風籠盒系統(tǒng)（individual ventilated cages，IVC）廣泛應用于嚙齒類實驗動物的實驗，在屏障設(shè)施內(nèi)IVC更是得到廣泛的應用［9］。將感染的嚙齒類實驗動物飼養(yǎng)在負壓屏障設(shè)施的負壓IVC內(nèi)是為了防止感染性動物實驗對環(huán)境造成污染以及防止人與實驗動物交叉感染，同時使動物實驗的結(jié)果更準確和可信。其他種類的負壓隔離器，如犬猴負壓飼養(yǎng)柜、雞負壓隔離器以及兔負壓飼養(yǎng)柜等分別用于犬猴、雞和兔等的感染性實驗［10-12］。動物負壓隔離器即具有獨立的送排風裝置，在負壓屏障設(shè)施內(nèi)使用負壓隔離器能有效的防止環(huán)境、動物與人員之間的交叉感染［13］。

2.3 負壓屏障設(shè)施

負壓屏障設(shè)施的飼養(yǎng)間的壓力最小，這樣“污染源”就集中在飼養(yǎng)間。飼養(yǎng)間內(nèi)使用負壓飼養(yǎng)設(shè)備，設(shè)備是屋內(nèi)采風，排風經(jīng)初、中、高效過濾后排到室外環(huán)境的空氣中。負壓屏障設(shè)施制定了一系列的規(guī)章制度和標準操作規(guī)程（standard operation procedures，SOP），以此規(guī)范工作人員和實驗人員的操作。每年根據(jù)需要修訂或者新增相關(guān)的SOP，以適應負壓屏障設(shè)施的發(fā)展。

3 負壓屏障設(shè)施存在的問題

隨著國內(nèi)實驗動物行業(yè)的發(fā)展，實驗動物的管理等方面也逐漸和國際接軌。1988年國家科學技術(shù)委員會第2號令發(fā)布施行了“實驗動物管理條例”，2006年科技部發(fā)布了“關(guān)于善待實驗動物的指導性意見”［14-15］。近十余年，各相關(guān)部門又相繼出臺了一些指導意見等，實驗動物享有五大“福利”：①生理福利，即無饑渴之憂慮；②環(huán)境福利，即讓動物有適當?shù)木铀?；③衛(wèi)生福利，主要是減少動物的傷病；④行為福利，應保證動物表達天性的自由；⑤心理福利，即減少動物恐懼和焦慮的心情。

3.1 環(huán)境豐富度欠缺

按照實驗動物福利的要求，飼養(yǎng)在負壓屏障設(shè)施內(nèi)的實驗動物應設(shè)置玩具供其玩耍以滿足其表達天性的自由。由于負壓屏障設(shè)施內(nèi)大多數(shù)實驗都是感染性動物實驗，各實驗之間病原微生物的種類也不盡相同，為避免交叉污染，負壓屏障區(qū)內(nèi)未放置玩具。因此，負壓屏障區(qū)在兼顧環(huán)境豐富度和生物安全方面可能有所欠缺。

3.2 負壓屏障設(shè)施監(jiān)管不利存在的問題

（1）實驗人員經(jīng)紫外線傳遞窗傳遞實驗用品時不規(guī)范。不填寫“傳遞窗傳入記錄表”、傳入實驗用品時不打開包裝袋以及某些實驗用品未經(jīng)紫外線照射20 min即取出在屏障區(qū)內(nèi)使用

（2）實驗過程中的交叉污染問題。在做感染性實驗的飼養(yǎng)間內(nèi)擅自打開IVC籠盒，在做完感染性實驗后進入其他進行感染性實驗的飼養(yǎng)間，造成有些經(jīng)氣溶膠傳播的病原微生物相互之間的交叉污染，給實驗結(jié)果帶來不確定性。

（3）飼養(yǎng)過程中的問題。有時飼養(yǎng)人員更換IVC籠盒時未將IVC籠盒復位，IVC籠盒內(nèi)微環(huán)境的溫濕度會相應變化，不同等級的實驗動物飼養(yǎng)在同一飼養(yǎng)間內(nèi)。

（4）負壓屏障設(shè)施本身的問題。負壓屏障設(shè)施內(nèi)濕度不恒定，受外界天氣影響較大，IVC籠盒內(nèi)微環(huán)境的濕度也會因此受到影響。

（5）實驗過程中涉及到的福利倫理問題。有些實驗中IVC籠盒內(nèi)飼養(yǎng)密度偏大，動物的有效活動空間變小，實驗過程中動物數(shù)量不斷增加或者時間不斷延長。

（6）實驗動物傳出負壓屏障設(shè)施涉及的生物安全問題。有些實驗人員需要將感染后的實驗動物傳出負壓屏障設(shè)施進行后續(xù)的實驗，若帶到更高級別的實驗室進行實驗則不涉及生物安全，但如在普通實驗室進行解剖或者取樣則涉及生物安全問題。此外，實驗人員若不按規(guī)定包裝，在運輸過程中會涉及到生物安全問題。

4 負壓屏障環(huán)境的實驗動物獸醫(yī)主要職責

在負壓屏障環(huán)境中遇到的一些問題不僅給屏障設(shè)施的運行管理帶來了麻煩，也違背了實驗動物福利倫理的要求，而實驗動物獸醫(yī)的職責主要是保障實驗動物的健康和福利，以確保實驗的順利進行。

（1）完善防疫相關(guān)的規(guī)章制度、工作計劃及標準操作規(guī)程和實驗人員上崗前的培訓等。為規(guī)范進出負壓屏障環(huán)境人員的活動及行為，獸醫(yī)需要起草及制定相應的規(guī)章制度和標準操作規(guī)程（standard operation procedures，SOP）。如實驗動物的接收與檢疫、獸醫(yī)檢查、采血、外科手術(shù)、疾病控制、麻醉及安樂死以及瀕死或死亡動物的處理等規(guī)程。凡是進入負壓屏障設(shè)施的人員，包括工作人員和實驗人員都應嚴格遵循SOP以杜絕疾病的引入和傳播。實驗人員進入負壓屏障設(shè)施前，獸醫(yī)需要對其進行崗前培訓，以便實驗人員了解和掌握進入負壓屏障設(shè)施的操作規(guī)程和注意事項等。

（2）實驗動物的健康和福利倫理工作。在接收實驗動物實驗申請時要經(jīng)過福利倫理委員會的審核，審核中由獸醫(yī)給實驗提供建議，可監(jiān)督檢查實驗人員在實驗操作過程中是否有違背福利倫理的行為。實驗方案中如涉及實驗動物手術(shù)的步驟，在手術(shù)后獸醫(yī)需要提供及時的術(shù)后護理，使實驗動物更快康復。由于負壓屏障設(shè)施內(nèi)多為感染性實驗，因此在感染性實驗后期，如動物遭受巨大痛苦，在不影響實驗結(jié)果的前提下，經(jīng)實驗負責人同意后，可對該動物進行安樂死。實驗結(jié)束后（非人靈長類除外）實驗動物需要進行安樂死。

（3）感染性實驗的風險評估。負壓屏障設(shè)施內(nèi)的實驗多數(shù)為感染性實驗，涉及的病原微生物比較復雜，因此在進行動物實驗前應對其進行風險評估，其中包括病原微生物的種類、致病性、傳播途徑、感染后的潛伏期、臨床癥狀、診斷治療措施、如何有效消毒和預防以及病原微生物的動物感染實驗是否與“人間傳染的病原微生物名錄”的要求相一致等。評估后，獸醫(yī)出具“風險評估報告”，并對內(nèi)部工作人員進行培訓，確保工作人員在工作過程中避免感染相應的病原微生物。

（4）實驗動物進出設(shè)施的檢疫相關(guān)工作。實驗動物進出負壓屏障設(shè)施需填寫相應表格進行記錄。實驗動物進入設(shè)施前應檢查動物的包裝運輸盒是否與訂購動物的等級相符合以及運輸盒是否完整。實驗動物傳入設(shè)施后應檢查動物的數(shù)量、性別、品種及品系等是否與包裝運輸單和質(zhì)量合格證上的信息一致，并檢查實驗動物的被毛、皮膚以及精神狀態(tài)。實驗期間或者實驗結(jié)束后死亡動物需要裝入高壓滅菌袋內(nèi)，經(jīng)雙扉高壓鍋高壓滅菌后從負壓屏障設(shè)施中傳出，以免已感染病原微生物的實驗動物污染環(huán)境，高壓后的實驗動物由相應的機構(gòu)統(tǒng)一處理。如果實驗人員需要在實驗期間將實驗動物運至更高級別的實驗室進行后續(xù)實驗，需經(jīng)實驗動物獸醫(yī)或者負壓設(shè)施負責人同意，并填寫“實驗動物傳出記錄表”；實驗動物轉(zhuǎn)移至IVC籠盒內(nèi)并經(jīng)過嚴格的生物安全包裝后，再運輸?shù)礁呒墑e的實驗室。

（5）實驗動物疾病的監(jiān)測、預防、初步診斷及治療工作。新進入負壓屏障設(shè)施的實驗動物需先經(jīng)獸醫(yī)檢查無明顯異常后進行隔離檢疫，在隔離期內(nèi)獸醫(yī)應密切關(guān)注實驗動物的狀態(tài)，以免新進動物處于某些疾病的潛伏期。在隔離期內(nèi)發(fā)現(xiàn)如動物有異常死亡等現(xiàn)象應分析原因后采取相應的措施，如果由于動物處于某種疾病的潛伏期導致，應將此批次的動物一起退回；如果由于動物個體差異導致則繼續(xù)進行隔離觀察。經(jīng)過隔離期后進入負壓設(shè)施的實驗動物與同設(shè)施內(nèi)已有的動物一起飼養(yǎng)。在正常飼養(yǎng)期內(nèi)，飼養(yǎng)人員一旦發(fā)現(xiàn)實驗動物有異常情況需要立即向獸醫(yī)匯報，以便獸醫(yī)及時處理。負壓屏障實驗動物獸醫(yī)應區(qū)分實驗動物的異常情況是否是由感染的病原微生物所導致，如其異常情況不為實驗預期結(jié)果，獸醫(yī)則需要與實驗人員商議確定解決方案。此外，獸醫(yī)應定期抽查實驗動物的健康狀況。

（6）監(jiān)督、檢查動物設(shè)施的飼養(yǎng)管理及衛(wèi)生條件。實驗動物獸醫(yī)在負壓屏障設(shè)施內(nèi)，尤其在某些特殊的感染性實驗中，應指導飼養(yǎng)人員如何正確飼養(yǎng)實驗動物。實驗動物獸醫(yī)要定期檢查負壓屏障設(shè)施的衛(wèi)生狀況以使其達到動物福利和國標要求。

（7）負責麻醉、安定及鎮(zhèn)痛類藥品的采購及使用管理。根據(jù)IACUC對獸醫(yī)的要求，實驗動物獸醫(yī)應負責麻醉品等藥物的采購和使用，負壓屏障設(shè)施內(nèi)麻醉藥、鎮(zhèn)痛藥等藥品的使用必須經(jīng)獸醫(yī)同意，并在其監(jiān)督下使用。獸醫(yī)應定期對麻醉品等藥物查看，如發(fā)現(xiàn)有過期的麻醉品則需要經(jīng)專門的機構(gòu)處理。

（8）根據(jù)負壓屏障設(shè)施的特點，及時對實驗動物獸醫(yī)的知識進行更新。作為實驗動物獸醫(yī)應及時了解實驗動物最新動態(tài)消息，為負壓屏障設(shè)施內(nèi)各種實驗平臺的建立提供相應的理論和技術(shù)支持。實驗動物獸醫(yī)每年要定期進行培訓，確保知識不斷的更新，為實驗提供更好的服務。

5 結(jié)語

實驗動物中心若獲得國際實驗動物評估和認證協(xié)會的認證，實驗動物獸醫(yī)對實驗動物的醫(yī)護和福利倫理的改善至關(guān)重要。實驗動物獸醫(yī)應積極改善實驗動物的福利，如在小鼠獨立通氣籠盒（individual ventilated cages，IVC）內(nèi)放置筑巢材料，在某些非感染性實驗籠盒內(nèi)放置耐高壓的玩具等。實驗動物獸醫(yī)職責繁重而復雜，需要較高的理論和實踐水平、科學素養(yǎng)和法律法規(guī)遵循理念［13］。實驗動物獸醫(yī)在負壓屏障設(shè)施的工作中需要持之以恒的學習，在更好的善待實驗動物的同時為科研人員提供更優(yōu)質(zhì)的服務。

［1］Institute of Laboratory Animal Resources，Commission of Life Sciences，National Research Council.Guide for the care and use of laboratory animals［M］.Washington DC：National Academy Press，1996.

［2］師福山，龐萬勇，楊秀進，等.動物實驗中的獸醫(yī)作用［J］.中國比較醫(yī)學雜志，2011，21（10）：104-106.

［3］龐萬勇.實驗動物獸醫(yī)職責與培養(yǎng)［C］.中國獸醫(yī)發(fā)展論壇專題報告文集，2012：629-634.

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［5］王建飛，周燕，劉吉宏，等譯.實驗動物飼養(yǎng)管理和使用指南［M］.上海：上?？茖W技術(shù)出版社，2012.

［6］中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局. GB14925-2010實驗動物環(huán)境及設(shè)施［S］.中國國家標準化管理委員會，2010-12-23.

［7］中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局. GB50447-2008實驗動物設(shè)施建筑技術(shù)規(guī)范［S］.中國國家標準化管理委員會，2008-08-13.

［8］施正良，饒江寧.關(guān)于醫(yī)學實驗動物負壓實驗室的建立與應用探討研究［C］.全國人畜共患病學術(shù)研討會論文集，2008：460-461.

［9］施正良，仲曉萍，饒江寧，等.IVC應用研究初報［J］.上海實驗動物科學，2004，24（2）：109-110.

［10］吳福林，樊寶仁，程君生，等.正負壓不銹鋼隔離器的研制與使用［J］.中國獸藥雜志，2002，36（3）：52-54.

［11］黑龍江省實驗動物管理辦公室.“SARS”研究-猴用負壓隔離器研制獲得重大進展［J］.畜牧獸醫(yī)科技信息2003，19（6）：50.

［12］程水生.隔離器使用六要點［J］.農(nóng)產(chǎn)品市場周刊，2004（23）：19-20.

［13］付傅文，王勇，湯宏斌.動物負壓隔離器壓板等機構(gòu)裝置的設(shè)計改型研究［C］.第五屆中南地區(qū)實驗動物科技交流會，2005：10-11.

［14］國家科學技術(shù)委員會.國家科學技術(shù)委員會令第2號實驗動物管理條例［S］.國家科學技術(shù)委員會，1988.

［15］中華人民共和國科學技術(shù)部國科發(fā)財字［2006］398號關(guān)于發(fā)布《關(guān)于善待實驗動物的指導性意見》的通知［S］.科學技術(shù)部，2006-9-30.

［16］沈智，龐萬勇.淺談實驗動物獸醫(yī)的職責及實踐［J］.中國比較醫(yī)學雜志，2010，20（6）：1-6.

Responsibilities of laboratory animal veterinarians in negative pressure barrier facilities

LU Shuang-shuang， LI Xiao-yan， RONG Rong， et al// China Medical Equipment，2016，13（4）：123-126.

Objective： To introduce the responsibilities of laboratory animal veterinarians working in the negative pressure barrier facility. Methods： To summarize the responsibilities of laboratory animal veterinarians working in the negative pressure barrier facility， on the basis of my own working experience and the articles describing responsibilities of laboratory animal veterinarians. Results： In literature review to the documents of laboratory animal veterinarians， clarified the responsibilities of laboratory animal veterinarians working in the negative pressure barrier facility. Conclusion： This article introduced the responsibilities of laboratory animal veterinarians working in the negative pressure barrier facility and supplied reference to administrators in the negative pressure barrier facility.

Negative pressure barrier facility； Laboratory animal veterinarian； Responsibilities

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.04.039

1672-8270（2016）04-0123-04

R-332

A

2015-05-18

衛(wèi)生行業(yè)科研專項（201302006）“生物實驗中的人畜共患病安全問題及其對策研究”

①中國疾病預防控制中心實驗動物中心 北京 102206

*通訊作者：luxc@chinacdc.cn

鹿雙雙，女，（1989- ），碩士，研究實習員。中國疾病預防控制中心實驗動物中心，研究方向： 實驗動物獸醫(yī)。