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    加味黃芪建中顆粒對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠相關(guān)細(xì)胞因子及免疫球蛋白影響的實(shí)驗(yàn)研究

    2015-10-25 02:31:49高金良
    中國(guó)醫(yī)藥指南 2015年20期
    關(guān)鍵詞:飴糖雷公藤風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎

    高金良

    (長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院風(fēng)濕科,吉林 長(zhǎng)春 130117)

    加味黃芪建中顆粒對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠相關(guān)細(xì)胞因子及免疫球蛋白影響的實(shí)驗(yàn)研究

    高金良

    (長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院風(fēng)濕科,吉林 長(zhǎng)春 130117)

    目的 探討加味黃芪建中顆粒對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠相關(guān)細(xì)胞因子及免疫球蛋白的影響。方法 選取清潔級(jí)Wistar大鼠48只,隨機(jī)分4組,正常組、模型組、雷公藤多苷片組、加味黃芪建中顆粒組,每組12只,均行細(xì)胞因子、免疫球蛋白檢測(cè)。結(jié)果 模型組細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、ESR、RF、CRP)、關(guān)節(jié)炎指數(shù)、免疫球蛋白(IgM、IgG、IgA)高于正常組,細(xì)胞因子(IL-4、IL-10)低于正常組。雷公藤多苷片組與加味黃芪建中顆粒組細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、ESR、RF、CRP)、關(guān)節(jié)炎指數(shù)、免疫球蛋白(IgM、IgG、IgA)較模型組降低,細(xì)胞因子(IL-4、IL-10)較模型升高,加味黃芪建中顆粒組變異幅度大于雷公藤多苷片組(P<0.05)。結(jié)論 加味黃芪建中顆??娠@著改善類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠的細(xì)胞因子及免疫球蛋白狀況。

    加味黃芪建中顆粒;類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎;細(xì)胞因子;免疫球蛋白;影響

    類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是以關(guān)節(jié)滑膜慢性炎癥為主的自身免疫性疾病,傳統(tǒng)治療方案中,多采用抗風(fēng)濕藥物治療,患者幾年后常常會(huì)出現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)[1],逐漸失去臨床療效結(jié)果多數(shù)患者的病情不能得到長(zhǎng)期有效的控制,因此合理用藥,在疾病的早期控制病情的發(fā)展和轉(zhuǎn)歸,已成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。中藥治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是具有一定優(yōu)勢(shì)的[2],不良反應(yīng)小,安全性較高,報(bào)道如下。

    1 材料與方法

    1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:雄性Wistar大鼠48只,體質(zhì)量180~250 g。

    1.2試劑:加味黃芪建中顆粒:藥物組成:飴糖30 g、桂枝15 g、芍藥18 g、生姜9 g、大棗6枚、黃芪30 g、炙甘草6 g、秦艽10 g、雞矢藤10 g。采用免煎顆粒制劑,取自正規(guī)醫(yī)院顆粒藥房,每日1劑。雷公藤多苷片:10毫克/片,浙江普洛康裕天然藥物有限公司生產(chǎn),國(guó)藥準(zhǔn)字Z33020778。

    1.3方法:取凍干卡介苗素1支(50 mg),80 ℃、1 h滅活,混入滅菌液體石蠟油和羊毛脂(2∶1)10 mL中,制成Freund's完全佐劑。除正常組外,在每鼠右后足拓皮內(nèi)注射Freund's完全佐劑0.05 mL致炎,復(fù)制佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠模型。致炎后第19天開始給藥,連續(xù)30 d,各組的給藥量相當(dāng)于臨床用量的5倍,具體給藥方法如下:①正常對(duì)照組:給予9 g/L氯化鈉溶液灌胃,10 mL/kg,每天1次。②模型對(duì)照組:給予9 g/L氯化鈉溶液灌胃,10 mL/kg,每天1次。③雷公藤多甙治療組:將雷公藤多苷片研成細(xì)末,加9 g/L氯化鈉溶液,配制成混懸液,按照10 mL/kg的劑量灌胃,每天1次。④加味黃芪建中顆粒治療組:將加味黃芪建中顆粒,加9 g/L氯化鈉溶液,配制成混懸液,按照10 mL/kg的劑量灌胃,每天1次。末次用藥24 h后,用20 g/L烏拉坦溶液按大鼠體質(zhì)量5 mL/kg劑量,腹腔注射麻醉,由腹主動(dòng)脈抽取4~6 mL血液,4000 r/min,離心10 min,取血清測(cè)定細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、IL-4、IL-10、ESR、RF、CRP)及免疫球蛋白(IgM、IgG、IgA),均采用ELISA法測(cè)定,嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。檢測(cè)指標(biāo)的時(shí)間節(jié)點(diǎn)為末次用藥24 h。

    1.4評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)節(jié)炎指數(shù)[3]:全身病變按5級(jí)評(píng)分法評(píng)價(jià),根據(jù)未注射佐劑的其余3只肢體的病變程度合計(jì)積分,計(jì)算出關(guān)節(jié)炎指數(shù)。①0分:無(wú)紅腫。②1分:小趾關(guān)節(jié)紅腫。③2分:趾關(guān)節(jié)和足拓腫脹。④3分:踝關(guān)節(jié)以下的足爪腫脹。⑤4分:包括踝關(guān)節(jié)在內(nèi)的全部足爪腫脹。滿分12分,分?jǐn)?shù)越高,關(guān)節(jié)炎越嚴(yán)重。

    1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:SPSS16.0軟件行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,組間差異用方差分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1各組大鼠細(xì)胞因子與關(guān)節(jié)炎指數(shù)比較:模型組細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、ESR、RF、CRP)、關(guān)節(jié)炎指數(shù)高于正常組,細(xì)胞因子(IL-4、IL-10)低于正常組。雷公藤多苷片組與加味黃芪建中顆粒組細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、ESR、RF、CRP)、關(guān)節(jié)炎指數(shù)較模型組降低,細(xì)胞因子(IL-4、IL-10)較模型升高,加味黃芪建中顆粒組變異幅度大于雷公藤多苷片組(P<0.05)。見表1。

    2.2各組大鼠免疫球蛋白比較:模型組免疫球蛋白(IgM、IgG、IgA)高于正常組。雷公藤多苷片組與加味黃芪建中顆粒組免疫球蛋白(IgM、IgG、IgA)較模型組降低,加味黃芪建中顆粒組降低幅度大于雷公藤多苷片組(P<0.05)。見表2。

    表1 各組大鼠細(xì)胞因子與關(guān)節(jié)炎指數(shù)比較()

    表1 各組大鼠細(xì)胞因子與關(guān)節(jié)炎指數(shù)比較()

    注:TNF-α為腫瘤壞死因子α,IL-1為白細(xì)胞介素1,IL-4為白細(xì)胞介素4,IL-10為白細(xì)胞介素10,ESR為血沉,RF為類風(fēng)濕因子,CRP為C反應(yīng)蛋白。與正常組比較,aP<0.05。與模型組比較,bP<0.05。與雷公藤多苷片組比較,cP<0.05

    組別 例數(shù) TNF-α(g/L) IL-1(μg/L) IL-4(μg/L) IL-10(μg/L)正常組 12 7.8±1.2 0.7±0.3 7.8±1.0 52.8±6.7模型組 12 27.1±2.6a 2.0±0.9 a 4.3±1.2 a 15.6±1.9 a雷公藤多苷片組 12 15.4±2.3ab 1.4±0.7ab 5.2±0.8ab 31.4±2.3ab加味黃芪建中顆粒組 12 8.6±1.4 abc 0.8±0.2abc 7.1±1.3abc 46.7±4.1abc組別 例數(shù) ESR(mm/h) RF(ng /L) CRP(mg/L) 關(guān)節(jié)炎指數(shù)(分)正常組 12 0.8±0.2 33.1±4.8 1.6±0.4 0.0±0.0模型組 12 12.7±2.9a 89.2±17.6a 3.7±1.3a 6.8±2.9a雷公藤多苷片組 12 4.3±1.5ab 64.7±10.3ab 2.3±1.0ab 4.2±1.2ab加味黃芪建中顆粒組 12 1.2±0.5abc 38.5±6.2abc 1.7±0.6abc 1.7±0.3abc

    表2 各組大鼠免疫球蛋白比較()

    表2 各組大鼠免疫球蛋白比較()

    注:IgM為免疫球蛋白M,IgG為免疫球蛋白G,IgA為免疫球蛋白A。與正常組比較,aP<0.05。與模型組比較,bP<0.05。與雷公藤多苷片組比較,cP<0.05

    組別 例數(shù) IgM(mg/L) IgG(mg/L) IgA(mg/L)正常組 12 261.5±24.3 395.7±34.6 71.2±5.8模型組 12 517.2±43.8a 978.1±91.7a134.7±13.2a雷公藤多苷片組 12 397.4±35.0ab672.9±80.3ab109.8±10.6ab加味黃芪建中顆粒組 12 272.7±31.8abc449.5±51.7abc80.3±6.4abc

    3 討 論

    類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展與體內(nèi)諸多因子的改變密切相關(guān)[4]。中藥治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的效果較好[5]。黃芪建中湯加秦艽、雞矢藤、青風(fēng)藤、三七、薏苡仁組成核心方:加味黃芪建中湯。方中重用黃芪、飴糖為君增強(qiáng)益氣建中之力,臣以辛溫之桂枝溫陽(yáng)氣,祛寒邪;酸甘之白芍養(yǎng)營(yíng)陰;生姜溫胃散寒,甘溫質(zhì)潤(rùn)之飴糖,溫補(bǔ)中焦,緩急止痛大棗補(bǔ)脾益氣;佐以秦艽、雞矢藤、青風(fēng)藤助黃芪、飴糖健脾祛風(fēng)濕,舒筋絡(luò),散瘀止痛,解毒消腫;薏苡仁健脾舒筋,祛濕除痹。方中在健脾祛濕的基礎(chǔ)上加三七,活血化瘀生新,入胃經(jīng),養(yǎng)胃止血不留瘀,化瘀通絡(luò)不傷正。炙甘草為使藥益氣和中,調(diào)和諸藥。其中飴糖配桂枝,辛甘化陽(yáng),溫中焦而補(bǔ)脾虛;芍藥配甘草,酸甘化陰,緩肝急協(xié)調(diào)雞矢藤而止痛。秦艽、雞矢藤、青風(fēng)藤微寒以劫黃芪、桂枝而升陽(yáng)助火,祛濕邪;黃芪、飴糖、薏苡仁益氣固本扶正祛邪;三七化瘀通絡(luò)貫穿疾病的始終;諸藥合用,共奏健脾益氣,散寒祛濕、通絡(luò)止痛之功效。本次研究的結(jié)果表明,雷公藤多苷片與加味黃芪建中顆粒均是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的有效治療藥物,且加味黃芪建中顆粒的治療效果更佳,可顯著改善類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠的細(xì)胞因子及免疫球蛋白狀況。但此次研究也存在一定的弊端,樣本量較少,仍需要進(jìn)一步擴(kuò)大。加味黃芪建中顆粒是否可以徹底治愈類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,仍需要進(jìn)一步研究。

    [1]王旻晉,武永康,林輝.甲氨蝶呤治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的不良反應(yīng)及應(yīng)對(duì)措施[J].華西醫(yī)學(xué),2013,28(6):940-943.

    [2]王俊杰,范永升.中藥治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2013,31(7):1588-1590.

    [3]陳建雙,于海榮,張玉玲,等.赤雹根總皂甙對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠血清細(xì)胞因子的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2012,23(5):1097-1098.

    [4]施曉柯.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相關(guān)細(xì)胞因子的研究進(jìn)展[J].中山大學(xué)研究生學(xué)刊(自然科學(xué)·醫(yī)學(xué)版),2012,33(4):1-5.

    [5]曾海坤,曾灶英,郭大敏,等.中藥生地馬錢丸配合來氟米特治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)的療效及安全性[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2012,18(16):153-154.

    R593.22

    B

    1671-8194(2015)20-0052-02

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