黃杞葉總黃酮的提取純化工藝優(yōu)化及3種有效成分的含量測定Δ

鄭義靜，單 淇，周福軍，華 潔，王紅敏，侯文彬#（1.天津醫(yī)科大學(xué)研究生院，天津 300070；2.天津藥物研究院，天津 300193；3.天津市中藥質(zhì)量控制技術(shù)工程實驗室，天津 300193；.天津中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，天津 300193）

黃杞葉總黃酮的提取純化工藝優(yōu)化及3種有效成分的含量測定Δ

鄭義靜1＊，單 淇2，3，周福軍2，3，華 潔2，3，王紅敏4，侯文彬2，3#（1.天津醫(yī)科大學(xué)研究生院，天津 300070；2.天津藥物研究院，天津 300193；3.天津市中藥質(zhì)量控制技術(shù)工程實驗室，天津 300193；4.天津中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，天津 300193）

目的：優(yōu)化黃杞葉總黃酮的提取與純化工藝，并建立其中3種有效成分的含量測定方法。方法：以落新婦苷的提取轉(zhuǎn)移率為指標(biāo)，采用單因素試驗對提取工藝中的提取溶劑、提取方式、滲漉溶劑乙醇的體積分?jǐn)?shù)、滲漉料液比、滲漉前浸泡時間、滲漉速度和AB-8樹脂純化工藝中洗脫劑乙醇的體積分?jǐn)?shù)進(jìn)行考察，并采用正交試驗優(yōu)化提取工藝。采用高效液相色譜法對純化后黃杞葉總黃酮中3種有效成分（落新婦苷、花旗松素、黃杞苷）進(jìn)行含量測定。結(jié)果：優(yōu)化后的黃杞總黃酮的提取工藝為以70%乙醇體積為提取和滲漉溶劑，采用滲漉法提取，滲漉前浸泡8 h，滲漉料液比1∶16（g/ml），滲漉速度30 ml/（min·kg）；純化工藝為取滲漉液加水稀釋至0.5 g（生藥）/ml，乙酸乙酯萃取，萃取液蒸干后以50%乙醇溶解，AB-8樹脂上樣，50%乙醇洗脫，濃縮、干燥；驗證試驗中落新婦苷提取轉(zhuǎn)移率＞80%（RSD=0.42%，n=3）。純化后黃杞葉總黃酮中落新婦苷、花旗松素、黃杞苷的含量分別為57.94%、3.72%、2.83%，三者含量之和占總黃酮的64.00%。結(jié)論：建立的提取和純化工藝穩(wěn)定、合理、可靠；黃杞葉總黃酮中3種有效成分的含量測定方法準(zhǔn)確、簡單、重復(fù)性好。

黃杞葉；總黃酮；提取工藝；純化工藝；正交試驗；AB-8樹脂；落新婦苷；花旗松素；黃杞苷；含量測定

黃杞葉為胡桃科黃杞屬植物黃杞（Engelhardia roxburghi- ana Wall）的干燥葉，主要分布在廣東、廣西、云南、福建等地，資源豐富。在廣西等地，黃杞葉又被稱為羅漢茶，具有清熱解毒、生津止渴、解暑勝濕的功效，可以消除暑熱口渴、食滯、腹痛［1-3］。孫彤等［4］分離并鑒定了來源于廣西的黃杞葉中的13個黃酮類化合物。落新婦苷、花旗松素和黃杞苷等二氫黃酮是黃杞葉中的主要活性成分［5］，其中，尤以落新婦苷的含量非常高［6］?，F(xiàn)代研究表明，落新婦苷能夠降低膽固醇［7］，保護(hù)肝臟以及具有鎮(zhèn)痛、抗水腫作用［8］；此外，落新婦苷還具有選擇性免疫抑制等多種生物活性作用［9］?；ㄆ焖伤貫槁湫聥D苷的苷元，具有抗癌、抗炎、抗病毒［10］等作用；黃杞苷為二氫黃酮醇類化合物，有較強(qiáng)的抗氧化活性［11］。為更合理地利用黃杞葉資源，本試驗以落新婦苷為指標(biāo)成分，對黃杞葉中總黃酮的提取工藝進(jìn)行了研究；并以落新婦苷、花旗松素、黃杞苷為有效成分，對黃杞葉總黃酮的質(zhì)量控制方法進(jìn)行了研究。

1 材料

1.1 儀器

Agilent-1260高效液相色譜（HPLC）儀，包括四通道梯度泵、自動進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測器（美國Agilent公司）；BP211D分析天平（德國Sartorius公司）；SB-3200DTN超聲波清洗機(jī)（寧波新芝生物科技有限公司）；DZF-6050真空干燥箱（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）。

1.2 藥材、藥品、試劑與樹脂

黃杞葉產(chǎn)地為廣西［采摘日期：2014年10月，經(jīng)天津藥物研究院中藥部侯文彬研究員鑒定為胡桃科植物黃杞（Engelhardia roxburghiana Wall）的干燥葉］；落新婦苷對照品（批號：111798-201303，純度：92.4%）、黃杞苷對照品（批號：111906-201102，純度：93.7%）、花旗松素對照品（批號：111816-201102，純度：98.9%）均來源于中國食品藥品檢定研究院；磷酸、甲醇、乙醇（95%）均為分析純；水為純凈水（杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司）。

AB-8大孔吸附樹脂（南開大學(xué)化工廠）。

2 方法與結(jié)果

2.1 藥材中落新婦苷的含量測定

2.1.1 色譜條件 參考2015年版《中國藥典》（一部）［12］土茯苓中落新婦苷的含量測定方法和文獻(xiàn)［3，13］方法，并對其進(jìn)行優(yōu)化，最終確定以下色譜條件：色譜柱為Acchrom Unitary C1（8250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為甲醇（A）-0.1%甲酸水（B），梯度洗脫（0～35 min，33%A；35～50 min，33%～40%A；50～65 min，40%～50%A；65～75 min，50%～70%A；75～80 min，70%～90%A；80～90 min，100%A；90.1～100 min，33% A）；流速為1.0 ml/min；檢測波長為290 nm；進(jìn)樣量為10 μl；柱溫為30 ℃ 。

2.1.2 對照品溶液的制備 取落新婦苷對照品適量，精密稱定，用60%甲醇充分溶解并定容至50 ml，即得0.039 6 mg/ml落新婦苷對照品溶液。

2.1.3 供試品溶液的制備 取2份黃杞葉粗粉250 mg，精密稱定，置于100 ml三角瓶中，加入60%甲醇50 ml，精密稱定，超聲60 min（180 W，40 kHz，30 ℃），再用60%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，稀釋10倍即得。

2.1.4 落新婦苷的含量測定 方法學(xué)考察內(nèi)容見“2.4.2”項。經(jīng)測定，藥材中落新婦苷的含量為8.06%。

2.2 總黃酮提取工藝

2.2.1 提取溶劑選擇 稱取10份黃杞葉粉末，每份2.5 g，每2份藥材為1組，各組藥材分別以50 ml水和30%、50%、70%、95%乙醇超聲提取1 h。提取液稀釋100倍，進(jìn)樣測定，根據(jù)藥材中落新婦苷的含量計算提取轉(zhuǎn)移率（藥材提取溶液中落新婦苷的含量×提取溶液體積/藥材中應(yīng)含落新婦苷的量×藥材質(zhì)量×100%）。結(jié)果，以水和30%、50%、70%、95%乙醇為溶劑的提取轉(zhuǎn)移率依次為53.7%、83.9%、88.9%、95.8%、75.6%（以落新婦苷計，n=2）。據(jù)此確定以70%乙醇為提取溶劑進(jìn)行進(jìn)一步考察。

2.2.2 提取方法選擇 稱取6份黃杞葉粉末，每份100 g，每2份藥材為1組，各組藥材分別以冷浸、回流和滲漉方式進(jìn)行提取。冷浸組以70%乙醇浸泡藥材24 h；回流組以1 000 ml 70%乙醇回流提取，連續(xù)提取2次；滲漉組以70%乙醇滲漉提取，滲漉速度控制在10 ml/（min·kg）（kg為藥材量）。每份藥材的提取總?cè)軇┝烤鶠? 000 ml，提取液稀釋100倍后進(jìn)樣檢測，根據(jù)藥材中落新婦苷的含量，計算提取轉(zhuǎn)移率。結(jié)果，冷浸、回流、滲漉3種提取方式的平均提取轉(zhuǎn)移率分別為70.1%、87.9%、95.3%（n=2），以滲漉提取的轉(zhuǎn)移率最高。因此選擇滲漉法提取黃杞葉中的落新婦苷。

2.2.3 滲漉溶劑選擇 稱取6份黃杞葉粉末，每份100 g，每2份藥材為1組，各組藥材分別以60%、70%、80%乙醇浸泡8 h后進(jìn)行滲漉提取。每份藥材的提取總?cè)軇┝烤鶠? 000 ml，提取液稀釋100倍后進(jìn)樣檢測，根據(jù)藥材中落新婦苷的含量，計算提取轉(zhuǎn)移率。結(jié)果，60%、70%、80%乙醇的平均提取轉(zhuǎn)移率分別為93.9%、95.5%、90.1%（n=2）。故確定以70%乙醇為滲漉溶劑。

2.2.4 料液比選擇 稱取5份黃杞葉粉末，每份100 g，以藥材量5、10、15、20、25倍（即料液比為1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25，g/ml）體積的70%乙醇浸泡8 h后，進(jìn)行滲漉提取，滲漉速度為30 ml/（min·kg），計算落新婦苷的提取轉(zhuǎn)移率。結(jié)果，各倍量下提取轉(zhuǎn)移率分別為75.2%、97.7%、98.5%、98.7%、94.5%。為節(jié)約溶劑，選取中間水平的料液比1∶8、1∶12、1∶16進(jìn)行下一步考察。

2.2.5 浸泡時間選擇 稱取4份黃杞葉粉末，每份100 g，藥材浸泡4、8、16、24 h后以藥材量10倍體積（ml）的70%乙醇進(jìn)行滲漉提取，滲漉速度為30 ml/（min·kg），計算落新婦苷的提取轉(zhuǎn)移率，結(jié)果分別為80.0%、98.2%、98.5%、98.7%。為提高提取效率，選取浸泡時間為8、16、24 h進(jìn)行下一步考察。

2.2.6 滲漉速度選擇 稱取3份黃杞葉粉末，每份100 g，藥材浸泡8 h后以藥材量10倍體積（ml）的70%乙醇進(jìn)行滲漉提取，滲漉速度分別為10、30、50 ml/（min·kg），計算落新婦苷的提取轉(zhuǎn)移率，結(jié)果分別為98.5%、98.1%、80.7%。選取滲漉速度為10、20、30 ml/（min·kg）進(jìn)行下一步考察。

2.2.7 正交試驗法優(yōu)化滲漉條件 結(jié)合落新婦苷的提取轉(zhuǎn)移率，確定提取料液比（A）為1∶8、1∶12、1∶16，浸泡時間（B）為8、16、24 h，滲漉速度（C）為10、20、30 ml/（min·kg）進(jìn)行正交試驗。因素與水平見表1。

表1 因素與水平Tab 1 Factors and levels

稱取9份黃杞葉粉末，每份100 g，各份藥材進(jìn)行正交試驗后取樣檢測，計算提取轉(zhuǎn)移率。正交設(shè)計及試驗結(jié)果、方差分析結(jié)果分別見表2、表3。

由表2、表3可知，因素A有顯著性，考慮試驗效率和操作的方便，優(yōu)化的滲漉工藝確定為A3B1C3：滲漉前浸泡8 h，以藥材量16倍的70%乙醇滲漉，滲漉速度控制在30 ml/（min·kg）。

稱取3份黃杞葉粉末，每份100 g，各份藥材按優(yōu)化后的滲漉條件進(jìn)行提取。結(jié)果落新婦苷的提取轉(zhuǎn)移率分別為97.8%、98.0%、98.1%（RSD=0.16%，n=3），表明該滲漉提取工藝穩(wěn)定、可靠。

2.3 總黃酮純化工藝

2.3.1 萃取除雜 由于落新婦苷等二氫黃酮苷具有一定的脂溶性，故考慮采用有機(jī)溶劑萃取的方法來除去部分極性大的雜質(zhì)。

表2 正交試驗設(shè)計與結(jié)果Tab 2 Orthogonal design and test results

表3 方差分析結(jié)果Tab 3 Analysis results of variance

將黃杞葉滲漉液（5 kg藥材加入80 L滲漉液）濃縮至無醇味，再以水稀釋至20 L［相當(dāng)于0.25 g（生藥）/ml］。加入同體積的乙酸乙酯萃取，50 ℃ 加熱破乳分層，重復(fù)萃取2次，第3次無需加熱。將3次萃取液合并蒸干，得干膏686.56 g（1 g干膏相當(dāng)于7.28 g藥材）。經(jīng)檢測得落新婦苷的含量由粗提物（未經(jīng)除雜）的35%富集至48%，提取物色澤較深，仍有進(jìn)一步純化的必要。

2.3.2 萃取后再純化 （1）樹脂動態(tài)洗脫曲線的繪制。前期研究表明，大孔樹脂對落新婦苷的吸附和解析性能較好。取AB-8大孔樹脂40 ml（水中）裝柱，以蒸餾水平衡。取黃杞葉萃取后干膏適量，用水溶解至落新婦苷質(zhì)量濃度約10 mg/ml，將析出的沉淀過濾，濾液上樣120 ml，再分別用水和10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇洗脫。色譜法檢測洗脫液中的落新婦苷的質(zhì)量濃度，以確定洗脫劑乙醇體積分?jǐn)?shù)。AB-8大孔樹脂的動態(tài)洗脫曲線見圖1。

圖1 動態(tài)洗脫曲線Fig 1 Dynamic elution curves

（2）樹脂純化 由動態(tài)洗脫曲線可知，當(dāng)乙醇的體積分?jǐn)?shù)為50%以上時落新婦苷的累積洗脫量幾乎不再增大。因此，采用2.5倍柱體積（BV）的50%乙醇進(jìn)行復(fù)溶上樣（樹脂量約為藥材量的5倍，V/m），之后用50%乙醇洗脫，洗脫液與上樣流出液合并蒸干，稱質(zhì)量。經(jīng)測定并計算得落新婦苷含量為57.2%，總轉(zhuǎn)移率（相對于藥材）為84.3%。

萃取后再經(jīng)樹脂純化所得的含落新婦苷的總黃酮中，落新婦苷的含量接近60%，顏色微黃。

2.3.3 驗證試驗 取100 g黃杞葉樣品，按上述確定的提取純化工藝制備3批黃杞葉總黃酮，測定落新婦苷總轉(zhuǎn)移率，結(jié)果分別為85.1%、85.3%、85.8%（RSD＜2%）。3批總轉(zhuǎn)移率相近，表明該工藝穩(wěn)定，可用于提取純化黃杞葉中的總黃酮。

2.4 純化后質(zhì)量控制

2.4.1 含量測定 由于黃杞苷、花旗松素的紫外吸收特征與落新婦苷基本一致，因此可在同一波長（290 nm）按“2.1.1”項相同條件下對3個化合物進(jìn)行測定。

（1）對照品溶液的制備。取落新婦苷、黃杞苷、花旗松素對照品適量，精密稱定，加甲醇充分溶解制成含落新婦苷、黃杞苷、花旗松素質(zhì)量濃度分別為0.579 0、0.177 2、0.135 2 mg/ml的對照品貯備液各25 ml；從中均分別精密量取0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml，以甲醇稀釋定容至10 ml，制成各對照品的濃度梯度溶液。（2）供試品溶液的制備。稱取純化后黃杞葉總黃酮5 mg，精密稱定，置于25 ml量瓶中，以甲醇充分溶解并定容至刻度，過濾得供試品溶液。取落新婦苷、黃杞苷、花旗松素對照品與供試品溶液進(jìn)樣分析，結(jié)果3個指標(biāo)峰的純度分別達(dá)到999.408、999.209、998.653，色譜圖見圖2。

圖2 高效液相色譜圖Fig 2 HPLC chromatograms

2.4.2 方法學(xué)考察 （1）線性關(guān)系考察。取落新婦苷、黃杞苷、花旗松素對照品各濃度梯度溶液10 μl注入色譜儀，以質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)、峰面積（y）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并進(jìn)行線性回歸分析，結(jié)果見表4。

表4 3種對照品的線性關(guān)系考察Tab 4 Linear relationship of 3kinds of substance control

（2）定量限考察。分別取“2.4.1（1）”項下對照品溶液，等倍逐步稀釋，進(jìn)樣測定，記錄峰面積。當(dāng)信噪比為10∶1時，得落新婦苷、黃杞苷、花旗松素的定量限分別為3.2、3.1、0.9 ng。

（3）精密度試驗。分別精密吸取質(zhì)量濃度為115.80 μg/ml的落新婦苷、8.64 μg/ml的黃杞苷和6.76 μg/ml的花旗松素對照品溶液10 μl，各連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果3種成分峰面積的RSD分別為0.12%、0.21%、0.29%（n=6），表明儀器精密度較好。

（4）重復(fù)性試驗。按“2.4.1（2）”項下方法制備6份供試品溶液，進(jìn)樣分析。結(jié)果落新婦苷、黃杞苷、花旗松素的平均含量分別為57.72%、3.35%、2.67%（RSD分別為0.31%、0.43%、0.36%，n=6），表明該方法重復(fù)性較好。

（5）穩(wěn)定性試驗。精密稱取“2.4.2（4）”項下供試品溶液10 μl，分別于制備后的0、3、6、9、12 h進(jìn)樣，記錄峰面積。結(jié)果落新婦苷、黃杞苷、花旗松素峰面積的RSD分別為0.72%、0.85%、0.91%（n=5），表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

（6）加樣回收率試驗。取已知含量的樣品共9份，每份5 mg，精密稱定，平均分為3組，各分別加入“2.4.1（1）”項下的落新婦苷對照品貯備液4.0、5.0、6.0 ml，黃杞苷和花旗松素對照品貯備液各0.8、1.0、1.2 ml，以甲醇稀釋定容至50 ml。進(jìn)樣測定，計算加樣回收率。結(jié)果，3種成分的平均回收率分別為100.41%、97.54%、98.70%（RSD分別為0.94%、1.40%、2.88%，n=3）。

2.4.3 樣品含量測定 取“2.3.3”項下制備的3批黃杞葉總黃酮按“2.4.1（1）”項下方法制成供試品溶液，各精密吸取10 μl進(jìn)樣分析，計算黃杞葉總黃酮中落新婦苷、花旗松素、黃杞苷的含量，結(jié)果見表5。

表5 3批純化后黃杞葉總黃酮中3種成分的含量測定結(jié)果Tab 5 Content determination results of 3 effective components in purified total flavonoids from 3 batches of E.roxburghiana

3 討論

本研究提取的總黃酮中主要成分是二氫黃酮類化合物，這也是黃杞總黃酮中的主要生物活性成分。落新婦苷在黃杞葉藥材中的含量達(dá)到了8.06%，在黃杞總黃酮中的含量高達(dá)50%以上，是黃杞葉中含量最為豐富的化合物。本試驗以落新婦苷以指標(biāo)，不僅因為其含量最高，還因為其理化性質(zhì)、極性等與其他類二氫黃酮成分相似，可以用同樣的方法提取純化得到。除此之外，采用高效液相色譜法測定落新婦苷的含量比采用紫外-可見分光光度法測定總黃酮的含量具有更強(qiáng)的專屬性。

不同填料對落新婦苷的吸附解析性能差異較大，本研究的前期工作完成了對聚酰胺（100目）、HPD-417、NKA-9、AB-8、HPD-100、HPD-400、D101-I等吸附填料的靜態(tài)、動態(tài)吸附以及解吸附數(shù)據(jù)的比較，優(yōu)選出了載樣量大且指標(biāo)成分能夠被中、低體積分?jǐn)?shù)的乙醇洗脫完全的AB-8和NKA-9樹脂?？紤]成本優(yōu)勢，最終在工藝研究中使用AB-8樹脂純化黃杞總二氫黃酮。

黃杞葉粗提物的水溶性不佳，混懸液上樣大孔樹脂后，大量固體析出阻塞樹脂，不僅造成操作不便，更影響樹脂的洗脫效果。本試驗增加了乙酸乙酯萃取這步操作，代替大孔樹脂的水洗或低體積分?jǐn)?shù)醇洗步驟，以除去大極性雜質(zhì)。萃取精制后的提取物可用一定體積的中等體積分?jǐn)?shù)（30%～60%）的乙醇溶解澄清。根據(jù)樹脂性能優(yōu)選乙醇體積分?jǐn)?shù)（50%）后，可在保證二氫黃酮類成分被洗脫的同時，實現(xiàn)脫色除雜的目的。

隨著對二氫黃酮類衍生物藥理活性的深入研究，該類成分的成藥性前景逐漸受到更多關(guān)注。天然來源的二氫黃酮成分具有儲量豐富、立體選擇性高的特點，成為新藥開發(fā)的重要資源。作為地方綠化樹種的黃杞是獲取落新婦苷等二氫黃酮類成分的理想來源，其葉中的落新婦苷含量遠(yuǎn)高于以此為指標(biāo)成分的百合科菝葜屬植物。黃杞可以落葉入藥，適于持續(xù)開發(fā)，成本低廉。

本研究通過對黃杞葉總黃酮制備純化工藝研究，可獲得高純度的總二氫黃酮。筆者曾采用紫外法測定了總黃酮的含量，在確定的工藝條件下制備的黃杞總黃酮中，總黃酮的含量為82.4%，落新婦苷、黃杞苷、花旗松素三者含量之和占總黃酮的77.7%；這與本試驗采用高效液相色譜法測定的結(jié)果有一定差異。

本試驗可為二氫黃酮類成分的富集純化以及該地方藥材品種的深入開發(fā)提供技術(shù)支持。

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Optimization of Extraction and Purification Technology of Total Flavonoids from Engelhardia roxburghiana and Content Determination of 3 Kinds of Effective Components

ZHENG Yijing1，SHAN Qi2，3，ZHOU Fujun2，3，HUA Jie2，3，WANG Hongmin4，HOU Wenbin2，3（1.Graduate School，Tianjin Medical University，Tianjin 300070，China；2.Tianjin Institute of Pharmaceutical Research，Tianjin 300193，China；3.Tianjin Engineering Laboratory for Quality Control Technology of Chinese Herbal Medicines，Tianjin 300193，China；4.Graduate School，Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China）

OBJECTIVE：To optimize the extraction and purification technology of total flavonoids from Engelhardia roxburghiana，and to establish the method for the content determination of 3 kinds of effective components.METHODS：Using the extraction transfer rate of astilbin as index，single factor test was used to investigate extraction solvent，extraction method，volume fraction of percolation solvent ethanol，percolation material-liquid ration，soaking time before percolation and percolation rate of extraction technology，and volume fraction of eluant ethanol in AB-8 resin purification technology.The contents of 3 effective components as astilbin，texifolin and engelitin in total flavonoids from E.roxburghiana were determined by HPLC.RESULTS：The optimal extraction technology was using 70%ethanol as extraction and percolation solvent，percolation extraction，soaking for 8 h before percolation，percolation material-liquid ratio of 1∶16（g/ml），percolation rate of 30 ml/（min·kg）.The purification technology was diluting the solution to 0.5 g（crude drug）/ml with water，ethyl acetate extraction，dissolved extract with 50%ethanol after evaporated to dryness，AB-8 resin for sampling，eluted with 50%ethanol，concentrating and drying.In verification test，extraction transfer rate of astilbin was more than 80%（RSD=0.42%，n=3）.The contents of astilbin，taxifolin and engeletin in total flavonoids from E.roxburghiana by purified were 57.94%，3.72%and 2.83%，respectively；the contents of 3 components accounted for 64.00%of total flavonoids.CONCLUSIONS：The extraction and purification technology is stable，rational and reliable；the content determination method of 3 effective components in total flavonoids of E.roxburghiana is accurate，simple and producible.

Engelhardia roxburghiana；Total flavonoid；Extraction technology；Purification technology；Orthogonal test；AB-8 resin；Astilbin；Taxifolin；Engeletin；Cotent determination

R284.2

A

1001-0408（2016）25-3545-04 DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.25.27

2016-04-12

2016-05-23）

（編輯：劉 萍）

天津市應(yīng)用基礎(chǔ)及前沿技術(shù)研究計劃（青年基金項目）（No.12JCQNJC08700）

＊碩士研究生。研究方向：天然藥物。E-mail：741465087@qq.com

研究員，博士。研究方向：天然藥物。電話：022-23006295。E-mail：houwb@tjipr.com