血清學技術(shù)在布魯氏菌病診斷上的應用研究現(xiàn)狀及評價

劉鑫

摘 要：布魯氏菌?。ㄒ韵潞喎Q“布病”）是布魯氏菌屬細菌引起的能在人和動物之間相互傳染的疾病，這種疾病病程較長，病情反復，廣泛分布于世界各個場所。家畜染上布病不僅會對畜牧業(yè)帶來一定的危害，而且嚴重威脅人類的健康。目前醫(yī)學上對此病的診斷主要依靠血清學技術(shù)。本文將對血清學技術(shù)在布病診斷上的應用研究現(xiàn)狀及評價進行研究。

關(guān)鍵詞：布魯氏菌病；血清學技術(shù)；現(xiàn)狀

中圖分類號：R516.7 文獻標識碼：B

1.凝集實驗

（1）試管凝集實驗（SAT）。試管凝集實驗可以在早期對發(fā)生在人類和動物身上的布病進行診斷，并且可以檢測出人類和動物感染布病獲得免疫后身體出現(xiàn)的血清抗體。SAT具有穩(wěn)定性和特異性，主要檢測人和動物體內(nèi)的IgG2和IgM型抗體，其中檢測IgM的敏感程度大于IgG2。如果單一使用，會造成結(jié)果的假陽性或假陰性。

（2）平板凝集實驗（PAT）。PAT也是布病常規(guī)的血清學診斷方式，可以對布病進行普查，實驗過程簡易方便，敏感程度高于SAT，但有的情況下會發(fā)生非特異性凝集。

（3）虎紅平板凝集實驗（RBPT）。RBPT可抑制非特異性反應的IgM與IgG的活化，實驗成本不高，適用布病的大范圍檢疫；不足之處是不能鑒定布病的發(fā)生是人工免疫還是自然感染的結(jié)果。

（4）乳膠凝集實驗（LAT）。采用改良后的LAT診斷布病存在95%的陽性率，和SAT與PAT比較，符合程度較高，適合在基層應用和推廣。

（5）間接血凝反應（IHAT）。在用凝集反應、補體參與反應和沉淀反應不能檢測出布氏菌抗體的情況下，IHAT可以檢測出微量的布氏菌抗體，從而診斷出布病。不足的是IHAT抗原的制備比較復雜。

（6）抗球蛋白實驗（AGT）。AGT可檢測人和動物體內(nèi)的IgG、IgM和IgA型抗體，可應用于布病的初期診斷，對慢性期布病的診斷價值更明顯。

2.沉淀實驗

應用于診斷布病的沉淀實驗有環(huán)狀沉淀實驗（RPT）、絮狀沉淀實驗 （FPT）和瓊脂擴散實驗（GDT），其中GDT應用比較廣泛。這種實驗方法簡單快捷，有較強特異性，但因?qū)嶒灻舾谐潭容^低而影響了其應用價值。

建立在沉淀反應原理之上的免疫電泳技術(shù)有對流免疫電泳、比較免疫電泳、定量免疫電泳等，其中對流免疫電泳技術(shù)大大提高了診斷布病的敏感程度和速度；不足之處在于這種診斷方法受較多因素影響，并且需要電泳設(shè)備，所以不能大范圍地進行推廣。

3.補體結(jié)合實驗（CFT）

補體可以和任何抗原抗體復合物結(jié)合，但是不可以同單獨的抗原或者抗體相結(jié)合，這就是CFT實驗的原理。相關(guān)研究表明，CFT實驗需要大量的不同試劑和對照組，實驗程序比較多，實驗的結(jié)果也受人的主觀意識影響。與此同時，CFT要求的實驗條件比較苛刻，因此不具備在基層推廣和現(xiàn)場實驗的條件。

4.標記抗體技術(shù)

（1）熒光抗體技術(shù)（FAT）。在布病爆發(fā)性流行時期，特別是被取樣的標本受到嚴重污染的時候，F(xiàn)AT就具有一定的優(yōu)勢，因為FAT在檢查布魯氏菌和布魯氏菌抗原上具有很強的敏感性和特異性，檢查速度也較快。不足之處在于需要熒光顯微鏡，實驗步驟和試劑的制備具有復雜性。

（2）酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）。ELISA技術(shù)具有相當于放射免疫分析的靈敏度，同時具有免疫熒光和放射免疫的優(yōu)勢，彌補了這兩種血清學技術(shù)的不足之處。ELISA可以鑒別牛布魯氏菌為自然感染還是疫苗免疫接種所致，具有自動化和診斷快捷等眾多優(yōu)勢，可應用于布病普查和診斷方面的實踐。

（3）抗氧化酶技術(shù)（PAP）。Meader

和Forster等研究表明，應用PAP技術(shù)對布病常規(guī)受檢標本進行檢驗，能夠快速和特異地給出診斷依據(jù)，其相關(guān)優(yōu)勢逐步受到人們的重視。

（4）斑點酶聯(lián)免疫吸附實驗（Dot-ELISA）。以SAT為對照，應用這項實驗對豬布病抗體進行檢測，結(jié)果顯示，在硝酸纖維素膜上進行的Dot-PPA-ELISA的操作時間在2小時之內(nèi)，不需要特殊的實驗條件，試劑用量少，反應膜片還可以長時間保存，人的肉眼可以判斷，而且靈敏度不低于SAT。

總而言之，目前對布病的診斷大多是應用血清學實驗和變態(tài)反應的方式。診斷布病的血清學檢測方式比較多，且都存在相對的優(yōu)勢和不足。但可聯(lián)合應用多種實驗方法來提高實驗的特異性和靈敏程度。

參考文獻：

[1]馮元璋.血清學技術(shù)在布病診斷上的應用研究現(xiàn)狀及評價[J].仲愷農(nóng)業(yè)技術(shù)學院學報，1997，（1）： 79-87.

[2]王 佳，徐衛(wèi)民.布魯氏菌病血清學診斷研究進展[J].中國病原生物學雜志，2008，（2）：149-152.