高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定太白貝母與暗紫貝母中9種核苷類成分的含量

游靜，張德全，潘興嬌，張華，周濃,*，俞姣姣，王雅正

1(重慶三峽學(xué)院 生命科學(xué)與工程學(xué)院，重慶，404000) 2(大理大學(xué) 藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，大理，671000)

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高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定太白貝母與暗紫貝母中9種核苷類成分的含量

游靜1，張德全2，潘興嬌2，張華1，周濃1,2*，俞姣姣1，王雅正1

1(重慶三峽學(xué)院 生命科學(xué)與工程學(xué)院，重慶，404000) 2(大理大學(xué) 藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，大理，671000)

建立太白貝母和暗紫貝母中9種核苷類成分(尿嘧啶、胞苷、鳥(niǎo)嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷)的高效液相色譜法(HPLC)分析方法，并對(duì)核苷類的含量進(jìn)行比較。采用VenusilMPC18(2)(4.6mm×250mm，5μm)色譜柱，甲醇-水為流動(dòng)相，梯度洗脫，流速1.0mL/min，柱溫35 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)260nm為分析條件。在設(shè)定的試驗(yàn)條件下，9種核苷在30min內(nèi)實(shí)現(xiàn)了良好的分析，待測(cè)核苷成分在各自線性范圍內(nèi)，峰面積積分值與進(jìn)樣量質(zhì)量濃度呈良好的線性關(guān)系(r= 0. 999 0～0. 999 9)，平均回收率為96.68 %～101.35 %(RSD<3%)。結(jié)果表明：不同品種及同一品種不同商品名稱的太白貝母和暗紫貝母中均含有9種核苷類成分，但含量上均存在差異，其中尿苷、鳥(niǎo)苷和腺苷含量較高，而尿嘧啶、胞苷、鳥(niǎo)嘌呤、腺嘌呤、胸苷、2′-脫氧腺苷含量較低。松貝中核苷類成分的含量略低于青貝。太白貝母中胞苷、尿苷、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷及其總含量整體上呈現(xiàn)出隨著生長(zhǎng)年限(花生大貝、花生小貝>大尖、中尖、小尖>松尖)增加而含量降低趨勢(shì)，但尿嘧啶、鳥(niǎo)嘌呤、腺嘌呤含量呈現(xiàn)出隨著生長(zhǎng)年限增加而增加的趨勢(shì)。從整體上看，太白貝母中核苷類成分的含量高于暗紫貝母，具有化學(xué)等同性，2種基源的川貝母作為同一藥材使用是可行的。

太白貝母；暗紫貝母；高效液相色譜法；核苷；商品規(guī)格；同時(shí)測(cè)定

川貝母為百合科植物太白貝母(Fritillaria taipaiensisP.Y.Li)、暗紫貝母(Fritillaria unibracteataHsiaoetK.C.Hsia)等貝母屬植物的干燥鱗莖，為馳名中外的藥材，有著悠久的應(yīng)用歷史，為潤(rùn)肺止咳的要藥，療效顯著[1-2]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，以川貝母為原料生產(chǎn)的中成藥多達(dá)200種以上[3]，同時(shí)，常用于清咽潤(rùn)喉和糖尿病類的保健食品配方中[4]。因此，川貝母在疾病治療或日常食療中扮演著日益重要的角色，與人民健康密切相關(guān)。

據(jù)文獻(xiàn)記載，太白貝母與暗紫貝母中主要含生物堿、皂苷、核苷、多糖等[2]，其中水溶性成分主要是核苷類成分[5-6]。研究表明，暗紫貝母等祛痰有效成分主要集中在其水提物中[7]，而川貝母的傳統(tǒng)用藥方法主要是水煎劑[5-6]，因此，對(duì)川貝母水溶性成分的研究具有重要意義。目前，針對(duì)太白貝母和暗紫貝母中核苷類含量的檢測(cè)報(bào)道較多[5-6, 8-9]，但太白貝母和暗紫貝母核苷類含量的檢測(cè)與比較文獻(xiàn)很少。

本試驗(yàn)采用高效液相色譜法分別測(cè)定太白貝母和暗紫貝母的核苷類含量，并對(duì)它們的核苷類化合物進(jìn)行了含量分析及種類差異的相關(guān)性研究。

1　材料與方法

1.1儀器與設(shè)備

LC-20A型高效液相色譜儀，日本島津集團(tuán)；DZF-6050MBE型電熱恒溫真空干燥箱，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司；SB-5200DTN型超聲波清洗機(jī)，寧波新芝生物科技股份有限公司；TDZ5-WS型多管架自動(dòng)平衡離心機(jī)，湖南賽特湘儀離心機(jī)儀器有限公司；CP225D型分析天平，德國(guó)Sartorius公司。

1.2材料與試劑

太白貝母于2011年7月采自重慶市巫溪縣蘭英鄉(xiāng)太白貝母種植基地，經(jīng)重慶三峽學(xué)院生命科學(xué)與工程學(xué)院周濃副教授鑒定為百合科植物太白貝母F. taipaiensis的干燥鱗莖，根據(jù)不同生長(zhǎng)年限而藥材形狀和大小分為6個(gè)商品名稱，分別稱作松尖、小尖、中尖、大尖、花生小貝和花生大貝。暗紫貝母于2011年6月采自四川省松潘縣，經(jīng)重慶三峽學(xué)院生命科學(xué)與工程學(xué)院周濃副教授鑒定為百合科植物暗紫貝母F. unibracteata的干燥鱗莖，根據(jù)形態(tài)特征不同分為松貝、青貝(見(jiàn)表4)，留樣憑證存放于重慶三峽學(xué)院生物與食品基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心。

尿嘧啶、鳥(niǎo)嘌呤、尿苷、腺嘌呤、胸苷和腺苷對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)分別為：100469-200401、140631-201205、110887-200202、886-200001、101215-201401、110879-200202)，胞苷、鳥(niǎo)苷、2′-脫氧腺苷對(duì)照品(南京都萊生物技術(shù)有限公司，純度經(jīng)HPLC峰面積歸一化法計(jì)算大于98%)。甲醇色譜純?yōu)槊绹?guó)Fisher公司，水為娃哈哈牌純凈水。

1.3色譜條件

色譜柱為VenusilMPC18(2)柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動(dòng)相為A相為甲醇，B相為水，梯度洗脫(0min→10min→15min→20min→30min，1%A→5%A→15%A→20%A→30%A)；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm；體積流量為1.0mL/min；進(jìn)樣量為20μL；柱溫為35 ℃。

1.4對(duì)照品溶液的制備

分別精密稱取減壓干燥至恒重的尿嘧啶、胞苷、鳥(niǎo)嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷對(duì)照品適量，加純凈水溶解并制成質(zhì)量濃度分別為107.8、105.7、102.8、105.9、107.0、317.4、105.2、882.0、106.1μg/mL的對(duì)照品貯備液。

1.5供試品溶液的制備

精密稱取樣品粉末(過(guò)3號(hào)篩)1.0g，置50mL具塞錐形瓶中，精密加蒸餾水10mL，混勻，室溫下超聲提取 60min(超聲功率300W，工作頻率40kHz)，取出，放至室溫，搖勻，倒入離心管中，4 000r/min離心10min，過(guò)濾，濾渣重復(fù)操作1次，合并濾液，以蒸餾水定容至25mL量瓶中，用前4 000r/min離心15min后0. 45μm微孔濾膜過(guò)濾，即得試品溶液。

1.6線性關(guān)系考察

分別精密吸取1.4項(xiàng)下各對(duì)照品貯備溶液適量，以純凈水溶解并稀釋制成6個(gè)不同質(zhì)量濃度的系列對(duì)照品混合溶液。分別在1.3項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，以各對(duì)照品的峰面積積分值(y)與其相應(yīng)的質(zhì)量濃度(x)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性范圍。

1.7精密度實(shí)驗(yàn)

取同一對(duì)照品混合溶液，按1.3項(xiàng)下方法連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄各核苷的色譜峰面積，通過(guò)計(jì)算RSD以考察儀器的精密度。

1.8重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取太白貝母(S8)和暗紫貝母(S1)樣品粉末各6份，每份1.0g，精密稱定，按1.5項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按1.3項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，記錄各核苷的色譜峰面積，通過(guò)計(jì)算RSD以考察本方法的重復(fù)性。

1.9穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

取同一太白貝母(S8)和暗紫貝母(S1)供試品溶液，分別在0、2、4、6、8、12h按1.3項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，記錄各核苷的色譜峰面積，通過(guò)計(jì)算RSD以考察本樣品的穩(wěn)定性。

1.10加樣回收率實(shí)驗(yàn)

精密稱取已知含量的太白貝母(S8)和暗紫貝母(S1)樣品粉末約0.50g，各6 份，分別精密加入各核苷對(duì)照品貯備溶液適量，按1.5項(xiàng)下方法制備供試品溶液，驗(yàn)證本方法的準(zhǔn)確性，計(jì)算加樣回收率。

1.11樣品含量測(cè)定

按1.5項(xiàng)下方法制備8批供試品溶液，按1.3項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定其9種核苷類成分的含量。

2　結(jié)果與分析

2.1樣品的HPLC色譜測(cè)定結(jié)果

太白貝母、暗紫貝母樣品及9種混合對(duì)照品分離的HPLC色譜圖(圖1)。結(jié)果顯示，在1.3項(xiàng)下色譜條件下25min左右樣品中核苷和堿基可被全部洗脫，9種核苷和堿基能在30min有效分離，且峰形良好，雜質(zhì)干擾少，因此該流動(dòng)相是可行的。同時(shí)，太白貝母和暗紫貝母的HPLC圖整體上具有一定的相似性，進(jìn)一步說(shuō)明不同川貝母品種在該流動(dòng)相下存在各核苷類成分量比關(guān)系的不同，但還存在自身的特征峰。

1-尿嘧啶；2- 胞苷；3- 鳥(niǎo)嘌呤；4- 尿苷；5- 腺嘌呤；6- 鳥(niǎo)苷；7- 胸苷；8- 腺苷；9- 2′-脫氧腺苷?qǐng)D1　混合對(duì)照品(A)、太白貝母(B)、暗紫貝母(C)HPLC色譜圖Fig.1　The Chromatograms of Standand (A), Fritillaria taipaiensis(B)and Fritillaria unibracteata(C)

2.2線性關(guān)系考察的結(jié)果

9種核苷類成分標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程見(jiàn)表1，相關(guān)系數(shù)r均大于0. 999 0，說(shuō)明峰面積與核苷含量之間具有顯著的線性相關(guān)性。

2.3精密度試驗(yàn)

尿嘧啶、胞苷、鳥(niǎo)嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷RSD分別為0.43 %、0.53 %、0.76 %、0.79 %、1.91 %、0.92 %、1.15 %、1.27 %、1.64 %，說(shuō)明檢測(cè)儀器檢測(cè)時(shí)精密度良好。

表1　9種核苷成分的線性關(guān)系和范圍

2.4重復(fù)性試驗(yàn)

太白貝母(S8)中尿嘧啶、胞苷、鳥(niǎo)嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷的含量分別為22.599 1、10.599 8、15.397 9、123.011 5、10.247 4、94.558 2、7.307 2、143.146 1、10.753 3μg/g，RSD分別為2.54 %、1.25 %、1.45 %、1.81 %、1.02 %、2.63 %、1.85 %、2.73 %、1.79 %；暗紫貝母(S1)中尿嘧啶、胞苷、鳥(niǎo)嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷的含量分別為8.752 9、20.659 8、3.304 6、71.527 1、6.208 6、62.144 0、25.651 1、84.612 7、30.367 0μg/g，RSD分別為1.68 %、2.01 %、2.12 %、1.69 %、0.92 %、1.94 %、2.65 %、1.57 %、2.78 %，表明本方法的重復(fù)性較好。

2.5穩(wěn)定性試驗(yàn)

太白貝母(S8)中尿嘧啶、胞苷、鳥(niǎo)嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷色譜峰面積的RSD分別為2.57 %、2.24 %、0.39 %、2.01 %、2.20 %、0.99 %、2.82 %、2.68 %、2.48 %；暗紫貝母(S1)中尿嘧啶、胞苷、鳥(niǎo)嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷色譜峰面積RSD分別為2.81 %、1.89 %、1.28 %、1.06 %、2.93 %、0.62 %、1.98 %、2.10 %、2.54 %，說(shuō)明樣品溶液至少在12h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6加樣回收率實(shí)驗(yàn)

太白貝母(S8)中9種核苷的平均回收率在97.16 %～101.35 %，RSD1.01 %～2.77 %，符合分析要求，結(jié)果見(jiàn)表2。暗紫貝母(S1)中9種核苷的平均回收率在96.68 %～100.73 %，RSD1.44 %～2.56 %，符合分析要求，結(jié)果見(jiàn)表3。表明上述實(shí)驗(yàn)方法的準(zhǔn)確度較高，能應(yīng)用于川貝母中核苷和堿基類活性成分的檢測(cè)與分析。

表2　加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=6)

續(xù)表2

化合物本底值/μg加標(biāo)量/μg測(cè)定值/μg回收率/%平均回收率/%RSD/%鳥(niǎo)嘌呤7.70207.196014.763198.1397.161.017.69907.196014.589195.757.70057.196014.694197.1961.518163.5400125.9380101.3861.530463.5400122.889196.57尿苷61.542763.5400124.437898.9998.942.1561.530463.5400122.798696.4261.505863.5400125.7431101.1061.518163.5400124.541899.195.12475.350010.362497.905.12575.350010.6377103.035.12685.350010.5546101.46腺嘌呤5.12575.350010.292596.5899.442.395.12375.350010.398698.605.12475.350010.425599.0847.288647.610095.3161100.8847.298047.610096.8379104.05鳥(niǎo)苷47.307547.610096.6858103.71101.192.6047.298047.610093.928997.9447.279147.610094.072698.2947.288647.610095.9698102.253.65434.20807.814898.873.65514.20807.748197.27胸苷3.65584.20807.697196.0497.882.073.65514.20807.806498.653.65364.20807.9017100.953.65434.20807.672195.4871.587470.5600142.3372100.2771.601770.5600145.4248104.62腺苷71.616070.5600142.089699.88101.352.1371.601770.5600143.3776101.7271.573170.5600141.243898.7471.587470.5600144.1815102.885.37775.305010.432395.285.37885.305010.465095.882'-脫氧5.37995.305010.545697.3897.251.48腺苷5.37885.305010.623198.865.37675.305010.546497.455.37775.305010.611598.66

表3　加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=6)

續(xù)表3

化合物本底值/μg加標(biāo)量/μg測(cè)定值/μg回收率/%平均回收率/%RSD/%胞苷10.334010.570020.388295.1298.152.5610.346410.570021.1521102.2310.340210.570020.779198.7610.332010.570020.600897.151.65262.05603.608795.141.65232.05603.676098.43鳥(niǎo)嘌呤1.65302.05603.668198.0197.161.681.65492.05603.633896.251.65402.05603.625195.871.65262.05603.693499.2635.770731.770067.299299.2435.763631.770066.637797.18尿苷35.777931.770067.6782100.4197.621.9335.820831.770066.758497.3835.799331.770066.187395.6535.770731.770066.219195.843.10493.21006.292199.293.10433.21006.189196.10腺嘌呤3.10553.21006.268398.5396.801.743.10933.21006.187795.903.10743.21006.185195.883.10493.21006.158395.1231.078231.740061.758196.6631.072031.740061.367895.45鳥(niǎo)苷31.084431.740062.595999.2896.921.4431.121731.740062.106397.6231.103131.740061.487895.7331.078231.740061.799396.7912.828110.520023.255599.1212.825610.520023.184698.47胸苷12.830710.520022.932096.0298.341.4612.846110.520023.300999.3812.838410.520023.073397.2912.828110.520023.323999.7742.314844.100087.3718102.1742.306444.100086.203599.54腺苷42.323344.100087.8566103.25100.732.2042.374044.100085.296597.3342.348744.100086.364999.8142.314844.100087.4115102.2615.186515.915030.818298.2215.183515.915030.361695.372'-脫氧15.189615.915030.991699.2996.681.77腺苷15.207815.915030.427395.6315.198715.915030.555196.4915.186515.915030.320195.09

2.7樣品的含量測(cè)定

按標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量，分別計(jì)算太白貝母和暗紫貝母藥材中9種核苷類成分的含量，結(jié)果見(jiàn)表4。

結(jié)果表明，太白貝母和暗紫貝母中核苷類成分比較相似，均含有尿嘧啶、胞苷、鳥(niǎo)嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷，尿苷、鳥(niǎo)苷、腺苷為其主要成分，其含量較高，這與太白貝母[5]、暗紫貝母[6]的水溶性成分的研究結(jié)果一致。不同商品規(guī)格太白貝母和暗紫貝母樣品中核苷類成分的含量具有明顯差異，太白貝母栽培品核苷含量相對(duì)高于暗紫貝母，這與曹新偉等[9]對(duì)川貝母中核苷含量比較的結(jié)果相一致，與沈力等[10]對(duì)其兩者祛痰藥效學(xué)研究結(jié)果基本一致，進(jìn)一步顯示太白貝母栽培品作為擴(kuò)大川貝母藥材資源具有較大的核苷類含量?jī)?yōu)勢(shì)。因此，從水溶性活性成分角度來(lái)看，2010年版《中國(guó)藥典》已將太白貝母列為川貝母項(xiàng)下具有一定的科學(xué)依據(jù)。

由表4還可知，太白貝母中胞苷、尿苷、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷及其總含量水平整體上呈現(xiàn)出隨著生長(zhǎng)年限(花生大貝、花生小貝>大尖、中尖、小尖>松尖)增加而減小的趨勢(shì)，與彭銳[8]、王懷玉[11]等人的研究結(jié)果基本一致，說(shuō)明太白貝母的最適生長(zhǎng)與其次生代謝物質(zhì)合成對(duì)生態(tài)環(huán)境條件的要求有一定的矛盾，導(dǎo)致核苷類含量和產(chǎn)量不能同步增長(zhǎng)，表明人工栽培技術(shù)在提高太白貝母品質(zhì)方面尚未成熟。但尿嘧啶、鳥(niǎo)嘌呤、腺嘌呤含量水平整體上呈現(xiàn)出隨著生長(zhǎng)年限增加而增加的趨勢(shì)，說(shuō)明生長(zhǎng)年限對(duì)太白貝母不同核苷類成分的影響不一致，應(yīng)根據(jù)臨床需要確定合理采收年限。同時(shí)，松貝中9種核苷及其總含量略低于青貝，提示著松貝作為川貝母藥材中的止咳佳品，其發(fā)揮藥效特色的不僅是核苷類成分。

表4　太白貝母和暗紫貝母中9種核苷類成分的含量(n=3)μg/g

3　結(jié)論

(1)本實(shí)驗(yàn)采用HPLC法同時(shí)檢測(cè)太白貝母與暗紫貝母中尿嘧啶、胞苷、鳥(niǎo)嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鳥(niǎo)苷、胸苷、腺苷、2′-脫氧腺苷的含量測(cè)定方法，并首次測(cè)定川貝母中2′-脫氧腺苷的含量，所建立的方法準(zhǔn)確性、重復(fù)性和穩(wěn)定性良好，可用于精確測(cè)定川貝母中核苷類成分的含量，適用于川貝母藥材、飲片及其成方制劑生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制指標(biāo)，均能起到一定的指導(dǎo)作用。

(2)鑒于核苷類成分顯著的生物活性及其在川貝母藥材中含量豐富，同時(shí)尿苷、鳥(niǎo)苷、腺苷含量較高，提示尿苷、鳥(niǎo)苷、腺苷可作為川貝母質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)，因此在對(duì)川貝母生物堿進(jìn)行含量測(cè)定的同時(shí)建立對(duì)尿苷、鳥(niǎo)苷、腺苷的定量檢測(cè)方法能使川貝母的內(nèi)在質(zhì)量控制更加全面、更加合理。

(3)通過(guò)對(duì)同一產(chǎn)地不同商品規(guī)格太白貝母與暗紫貝母中核苷類提取物在本試驗(yàn)條件下的定性和定量綜合分析評(píng)價(jià)表明，從水溶性活性成分的角度來(lái)看，8批川貝母樣品整體活性成分組成相似、藥效亦相近，且太白貝母栽培品中核苷類含量均高于暗紫貝母野生品。因此，從核苷類活性成分來(lái)講，現(xiàn)已將太白貝母作為川貝母新的基源植物，具有一定的科學(xué)依據(jù)和良好的開(kāi)發(fā)前景，川貝母資源匱乏問(wèn)題有望能得到一定程度的緩解。

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Simultaneousdeterminationofninenucleosidescontentsusinghigh

performanceliquidchromatographyinFritillaria taipaiensisP.Y.LiandFritillaria unibracteataHsiaoetK.C.Hsia

YOUJing1,ZHANGDe-quan2,PANXing-jiao2,ZHANGHua2,ZHOUNong1,2*,YUJiao-jiao1,WANGYa-zheng1

1(CollegeofLifeScienceandEngineering,ChongqingThreeGorgesUniversity,Chongqing404000,China) 2(CollegeofPharmacyandChemistry,DaliUniversity,Dali671000,China)

Anewhighperformanceliquidchromatography(HPLC)methodforanalyzingninenucleosides(uracil,cytosine,guanine,uridine,adenine,guanosine,thymidine,adenosine,and2'-deoxyadenosine)wasestablishandthecontentsofnucleosideswerecomparedbetweenFritillaria taipaiensisP.Y.LiandFritillaria unibracteatHsiaoetK.C.Hsia.TheVenusilMPC18(2)chromatographiccolumn(4.6mm× 250mm, 5μm)wasused.HPLC-grademethanolandwaterwereusedasmobilephaseAandmobilephaseB,respectively.Theelutionconditionisgradientelutionataflowrateof1.0mL/minusingUVdetectorat260nm.Thetemperatureofcolumnwasmaintainedat35℃.Theresultsshowedthattheseparationeffectofninenucleosideswasgoodwithin30minusingthenewHPLCmethod.Thepeakareavaluesandconcentrationofninenucleosidestestedallshowedagoodlinearrelationship(r=0. 999 0～0. 999 9)withintheirlinearranges.Therecoveryratewas96.68 % ～ 101.35 % (RSD<3%).TheanalysisofnucleosidesinF. taipaiensisandF. unibracteatashowedthattheninenucleosideswasincludedindifferentvarietiesanddifferentcommercialnamesofthesamespecies.However,thecontentsvaried.Thecontentwasthehigherinuridine,guanosineandadenosine,butlowerinuracil,cytosine,guanine,adenine,thymidineand2'-deoxyadenosine.ThecontentofnucleosidesinSongbeiwasslightlylowerthanthatofQingbei.Thecontentofcytidine,uridine,guanosine,thymidine,adenosine, 2'-deoxyadenosineandthetotalnucleosidescontentdecreasedwiththegrowthyear,theorderofthecontentisHuashengdabei,Huashengxiaobei>thatofDajian,Zhongjian,Xiaojian>Songjian.However,thecontentofuracil,guanineandadenineshowedtheincreasingtendencywiththegrowthyear.Overall,thecontentofnucleosidesinF. taipaiensiswashigherthanthatofF. unibracteata.Theyhadtheequivalenceinchemicalcomponet.ItwasfeasiblethatthetwoFritillaria cirrhosawereusedassamemedicalherbs.

Fritillaria taipaiensisP.Y.Li; Fritillaria unibracteataHsiaoetK.C.Hsia;highperformanceliquidchromatography;nucleosides;commercialspecifications;simultaneousdetermination

10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201601032

學(xué)士(周濃為通訊作者，E-mail：erhaizn@126.com)。

重慶市基礎(chǔ)與前沿研究計(jì)劃項(xiàng)目(No.CSTC2013jcyjA10120)；國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31200180)資助

2015-05-05，改回日期：2015-07-29