galectin-3、CK19和CD56在甲狀腺乳頭狀癌診斷中的價值

陳忠其，馮建洪，童亞群，陸　玲

(佛岡人民醫(yī)院病理科，廣東 佛岡 511600)

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galectin-3、CK19和CD56在甲狀腺乳頭狀癌診斷中的價值

陳忠其，馮建洪，童亞群，陸玲

(佛岡人民醫(yī)院病理科，廣東 佛岡 511600)

目的了解galectin-3、CK19和CD56在甲狀腺良惡性病變中的表達(dá)情況，探討其在甲狀腺乳頭狀癌診斷中的價值。方法采用免疫組織化學(xué)EnVision法檢測47例甲狀腺乳頭狀癌、30例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫和32例甲狀腺濾泡狀腺瘤中g(shù)alectin-3、CK19和CD56的表達(dá)。結(jié)果galectin-3和CK19在甲狀腺乳頭狀癌中均呈中等或強(qiáng)陽性表達(dá)，僅1例甲狀腺乳頭狀癌galectin-3呈弱陽性表達(dá)。在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫和甲狀腺濾泡狀腺瘤中g(shù)alectin-3和CK19均呈陰性表達(dá)，僅1例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫局部CK19弱陽性。CD56在甲狀腺乳頭狀癌中呈陰性表達(dá)，在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫和甲狀腺濾泡狀腺瘤中均呈陽性表達(dá)。結(jié)論甲狀腺乳頭狀癌中g(shù)alectin-3和CK19表達(dá)有增高，而CD56表達(dá)缺失。3種蛋白聯(lián)合標(biāo)記對甲狀腺乳頭狀癌的診斷有價值。

甲狀腺乳頭狀癌； galectin-3； CK19； CD56； 免疫組織化學(xué)； 診斷

甲狀腺乳頭狀癌是甲狀腺惡性腫瘤中最常見的組織學(xué)類型，在日常的病理外檢中診斷通常并不困難。典型的甲狀腺乳頭狀癌鏡下特征明顯，具體表現(xiàn)為：密集的乳頭狀結(jié)構(gòu)，乳頭為真性乳頭，乳頭中心有纖維血管軸心，乳頭被覆立方狀或柱狀上皮細(xì)胞，細(xì)胞排列擁擠、重疊，細(xì)胞核大，有不同程度核異型，核呈毛玻璃樣，核膜清晰，可見核溝及核內(nèi)假包涵體，間質(zhì)內(nèi)常見砂粒體形成等等。但當(dāng)這些特征不明顯或結(jié)節(jié)性甲狀腺腫伴乳頭狀增生活躍時，容易出現(xiàn)誤診和漏診。因此，需要利用免疫組織化學(xué)方法，尋求某些特異的腫瘤標(biāo)記物，來輔助臨床病理診斷。本研究通過檢測galectin-3、CK19和CD56在甲狀腺乳頭狀癌、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺濾泡狀腺瘤中的表達(dá)，探討這3種蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的診斷價值。

1　材料與方法

1.1臨床資料

收集佛岡人民醫(yī)院病理科2000年1月至2011年12月手術(shù)切除并經(jīng)病理診斷的甲狀腺乳頭狀癌47例，男5例，女42例，年齡26～74歲，平均43.5歲。其中經(jīng)典型36例、濾泡亞型3例、微小乳頭狀癌8例。另選取同期手術(shù)切除的結(jié)節(jié)性甲狀腺腫30例(男5例，女25例，年齡23～70歲，平均41歲)、甲狀腺濾泡狀腺瘤32例(男7例，女25例，年齡29～72歲，平均46.5歲)為對照。3種類型患者性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2檢測方法

所有標(biāo)本均經(jīng)4%中性甲醛溶液固定，常規(guī)組織處理，石蠟包埋，4 μm切片，HE染色。免疫組織化學(xué)采用EnVision二步法，操作按試劑說明書進(jìn)行，用已知陽性切片作陽性對照，以PBS代替一抗作陰性對照。galectin-3、CK19、CD56抗體及試劑均為中杉金橋公司產(chǎn)品。

1.3結(jié)果判定

galectin-3、CK19免疫組織化學(xué)定位于細(xì)胞質(zhì)，以細(xì)胞質(zhì)中見到棕黃色顆粒分布為陽性。CD56免疫組織化學(xué)定位于細(xì)胞膜伴/不伴細(xì)胞質(zhì)。采用半定量法，隨機(jī)選取10個高倍視野(×400)，計(jì)算陽性目標(biāo)細(xì)胞占目標(biāo)細(xì)胞總數(shù)的百分率。galectin-3、CK19和CD56以陽性細(xì)胞≤10%為陰性(-)；11%～25%陽性細(xì)胞為弱陽性(+)；26%～50%陽性細(xì)胞為中等陽性()；>50%陽性細(xì)胞為強(qiáng)陽性()。

敏感性=(癌的陽性數(shù)/癌的總數(shù))×100%，特異性=(良性病變的陰性數(shù)/良性病變總數(shù))×100%。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件對所得數(shù)據(jù)的處理行χ2檢驗(yàn)。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1galectin-3在甲狀腺病變組織中的表達(dá)

甲狀腺乳頭狀癌與結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺濾泡狀腺瘤galectin-3陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺濾泡狀腺瘤galectin-3陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。47例甲狀腺乳頭狀癌僅1例為弱陽性，其余均呈中等或強(qiáng)陽性(封四圖1)。30例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及32例甲狀腺濾泡狀腺瘤均呈陰性(封四圖2)。癌旁甲狀腺組織呈陰性或灶狀弱陽性表達(dá)。galectin-3在甲狀腺病變組織中的表達(dá)敏感性和特異性均為100%。

表1　galectin-3在甲狀腺病變組織中的表達(dá)

*P<0.01與良性病變比較。

2.2CK19在甲狀腺病變組織中的表達(dá)

47例甲狀腺乳頭狀癌均呈中等或強(qiáng)陽性表達(dá)(封四圖3)。30例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫僅1例為局部弱陽性，其余均呈陰性表達(dá)；32例甲狀腺濾泡狀腺瘤呈陰性表達(dá)。癌旁甲狀腺組織呈陰性或灶狀弱陽性表達(dá)。良惡性病變間CK19陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺濾泡狀腺瘤CK19陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。CK19在甲狀腺病變組織中的表達(dá)敏感性和特異性均為100%。

2.3CD56在甲狀腺病變組織中的表達(dá)

良惡性病變間CD56陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺濾泡狀腺瘤CD56陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表3。47例甲狀腺乳頭狀癌均呈陰性表達(dá)(封四圖4)。30例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及32例甲狀腺濾泡狀腺瘤均呈陽性表達(dá)(封四圖5—6)。癌旁甲狀腺組織也呈陽性表達(dá)。CD56在甲狀腺病變組織中的表達(dá)敏感性和特異性均為100%。

表2　CK19在甲狀腺病變組織中的表達(dá)

*P<0.01與良性病變比較。

表3　CD56在甲狀腺病變組織中的表達(dá)

*P<0.01與良性病變比較。

3　討論

免疫組織化學(xué)作為一種有效的輔助診斷技術(shù)已廣泛應(yīng)用于日常臨床病理診斷工作中。對甲狀腺乳頭狀癌的診斷與鑒別診斷使用過許多抗體，常見的有HBME-1、CK19、galectin-3、TPO、P63、CD56、p16等[1-11]。本研究探討galectin-3、CK19和CD56在甲狀腺乳頭狀癌、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺濾泡狀腺瘤中的表達(dá)情況，分析并驗(yàn)證這3種抗體在診斷甲狀腺乳頭狀癌的價值、敏感性與特異性。

galectin-3是一種β-半乳糖苷結(jié)合蛋白，屬于脊椎動物半乳糖凝集素家族的成員。其主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，也可存在于細(xì)胞核、細(xì)胞表面或者細(xì)胞外間質(zhì)中，具有多種生物學(xué)功能?？杀磉_(dá)于巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞(如甲狀腺、胃、腸)、成纖維母細(xì)胞、免疫細(xì)胞等。在細(xì)胞生長、分化、黏附、炎癥、凋亡，以及腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移等生理及病理過程中起重要作用。許多研究[3-5，7]證實(shí)galectin-3在甲狀腺乳頭狀癌中呈強(qiáng)陽性表達(dá)，對甲狀腺乳頭狀病變的良惡性鑒別診斷有一定實(shí)用價值。文獻(xiàn)報道中，甲狀腺乳頭狀癌galectin-3的陽性表達(dá)率分別為98.4%[3]、98.5%[4]、94.5%[5]。本研究galectin-3在47例甲狀腺乳頭狀癌中僅1例為弱陽性，其余均呈中等或強(qiáng)陽性表達(dá)；癌旁甲狀腺組織呈陰性或灶狀弱陽性表達(dá)。在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺濾泡狀腺瘤中均呈陰性表達(dá)，與文獻(xiàn)報道相符，其敏感性與特異性均為100%。

CK19是低分子量的細(xì)胞角蛋白，存在于正常上皮和各種上皮來源的腫瘤中，特別是單層上皮和間皮。CK19在甲狀腺病變良惡性鑒別診斷中被廣泛應(yīng)用[3-7，9-10]，其在甲狀腺病變中的表達(dá)與galectin-3平行。CK19對甲狀腺乳頭狀癌的診斷有較高敏感性。文獻(xiàn)報道中，甲狀腺乳頭狀癌CK19的陽性表達(dá)率分別為98.4%[3]、98.5%[4]、98.2%[5]、100%[9]。甲狀腺乳頭狀癌CK19的表達(dá)明顯增加，尤其當(dāng)CK19表達(dá)強(qiáng)陽性時，支持甲狀腺乳頭狀癌的診斷。有文獻(xiàn)[5]報道CK19在良性甲狀腺病變中有20.4%陽性表達(dá)，呈局灶狀弱陽性表達(dá)，認(rèn)為CK19弱陽性表達(dá)不具有特異性，只有呈彌漫的中、強(qiáng)陽性表達(dá)才是診斷甲狀腺乳頭狀癌的重要依據(jù)。本研究中47例甲狀腺乳頭狀癌CK19均呈中等或強(qiáng)陽性表達(dá)，癌旁甲狀腺組織呈陰性或灶狀弱陽性表達(dá)。觀察到良性甲狀腺病變中僅1例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫表達(dá)局部弱陽性，其余結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺濾泡狀腺瘤均呈陰性表達(dá)，與文獻(xiàn)報道基本吻合，其敏感性和特異性均為100%。

CD56又稱為神經(jīng)細(xì)胞黏附分子(N-CAM)，廣泛存在于大部分的神經(jīng)外胚層來源的細(xì)胞、組織和腫瘤中，正常表達(dá)于神經(jīng)元、星形細(xì)胞、施萬細(xì)胞、NK細(xì)胞以及小部分活化的T細(xì)胞[7-8]。CD56是神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤最敏感的標(biāo)記物，在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、髓母細(xì)胞瘤、星形細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、小細(xì)胞癌及NK/T細(xì)胞淋巴瘤等腫瘤表達(dá)陽性[9-10]。其表達(dá)缺失與某些惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移潛能及預(yù)后相關(guān)。CD56被較多用于甲狀腺病變的研究，是一種新的診斷甲狀腺乳頭狀癌的免疫標(biāo)記物[11-12]。CD56在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)結(jié)果差異不大，均顯示CD56表達(dá)缺失是主要表現(xiàn)，CD56在甲狀腺乳頭狀癌病例中呈陰性表達(dá)，而在良性甲狀腺組織則呈持續(xù)性陽性表達(dá)[13]。本研究結(jié)果與已有報道相似，47例甲狀腺乳頭狀癌CD56均呈陰性表達(dá)。癌旁甲狀腺組織呈陽性表達(dá)。結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及甲狀腺濾泡狀腺瘤CD56均呈陽性表達(dá)。CD56在甲狀腺乳頭狀癌失表達(dá)有一定的病理診斷價值，推斷可用于甲狀腺乳頭狀癌與良性甲狀腺乳頭狀增生的鑒別診斷[10]。在本研究中，其在甲狀腺乳頭狀癌診斷中的敏感性和特異性均達(dá)100%。

本研究結(jié)果提示，galectin-3、CK19和CD56都是診斷甲狀腺乳頭狀癌的有用標(biāo)志物，敏感性和特異性偏高可能與樣本數(shù)偏少有關(guān)。在實(shí)際工作中，聯(lián)合運(yùn)用galectin-3、CK19和CD56檢測，對甲狀腺乳頭狀癌的診斷和鑒別診斷具有一定的實(shí)用價值。

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(責(zé)任編輯：羅芳)

Diagnostic Value of galectin-3,CK19 and CD56 Expression in Papillary Carcinoma of Thyroid

CHEN Zhong-qi,FENG Jian-hong,TONG Ya-qun，LU Ling

(DepartmentofPathology,FogangPeople’sHospital,Fogang511600,China)

ObjectiveTo investigate the expression of galectin-3,CK19 and CD56 in malignant and benign thyroid lesions,and to evaluate their significance in the diagnosis of papillary carcinoma of thyroid.MethodsThe expression of galectin-3,CK19 and CD56 was detected using immunohistochemical EnVision technique in 47 cases of papillary thyroid carcinoma,30 cases of multinodular goiter and 32 cases of follicular thyroid adenoma.ResultsThe moderate to strong expression of galectin-3 and CK19 was observed in papillary thyroid carcinoma,except 1 case of weakly positive expression of galectin-3.The negative expression of galectin-3 and CK19 was detected in both multinodular goiter and follicular thyroid adenoma,except 1 case of weakly positive expression of CK19 in multinodular goiter.The expression of CD56 was negative in papillary thyroid carcinoma,but positive in multinodular goiter and follicular thyroid adenoma.ConclusionThe expression of galectin-3 and CK19 increases but the expression of CD56 is deficient in papillary thyroid carcinoma.The combined detection of galectin-3,CK19 and CD56 is valuable for diagnosis of papillary thyroid carcinoma.

papillary carcinoma of thyroid; galectin-3; CK19; CD56; immunohistochemistry; diagnosis

2015-10-19

陳忠其(1963—)，男，本科，副主任醫(yī)師，主要從事腫瘤病理學(xué)的研究。

R736.1

A

1009-8194(2016)06-0005-03

10.13764/j.cnki.lcsy.2016.06.002