羧甲基殼聚糖硒對小鼠生長性能、血液硒含量及抗氧化功能的影響

梁易曉，劉麗娜，秦順義，王　昕，唐曉娟，趙方紅

（天津農(nóng)學院動物科學與動物醫(yī)學學院，天津西青300384）

羧甲基殼聚糖硒對小鼠生長性能、血液硒含量及抗氧化功能的影響

梁易曉，劉麗娜，秦順義*，王昕，唐曉娟，趙方紅

（天津農(nóng)學院動物科學與動物醫(yī)學學院，天津西青300384）

為研究羧甲基殼聚糖硒對小鼠生長性能、血液硒含量及抗氧化功能的影響，本試驗將120只KM小鼠（雌雄各半），隨機均分為C組、TI組和T2組，分別喂基礎(chǔ)日糧、添加亞硒酸鈉的基礎(chǔ)日糧和添加羧甲基殼聚糖硒的基礎(chǔ)日糧，試驗持續(xù)28 d。結(jié)果表明：T2組小鼠采食量和料重比較C組和T1組分別降低了5.24%、8.66%和4.27%、4.29%；但T2組、T1組和C組間小鼠的采食量、料重比及增重均無顯著差異（P＞0.05）。T2組小鼠全血硒含量和血漿總抗氧化能力（T-AOC），較C組和T1組分別提高了78.95%（P＜0.01）、17.50%（P＜0.01）和17.24%（P＜0.05）8.05%（P＜0.05）；T1組小鼠全血硒含量和血漿T-AOC較C組分別提高了52.63%（P＜0.05）和8.75%（P＜0.05）。T2組和T1組小鼠全血谷胱甘肽過氧化物酶 （GSH-Px）活性分別較C組提高了24.65%（P＜0.01）和14.13%（P＜0.05）；T2組小鼠全血GSH-Px活性較T1組提高了9.22%，但未達差異顯著水平（P＞0.05）。T2組小鼠血漿丙二醛（MDA）含量分別較C組和T1組降低了29.40%（P＜0.01）和18.66%（P＜0.05）；T1組小鼠血漿MDA含量較C組降低了13.21%（P＜0.05）。結(jié)果提示：羧甲基殼聚糖硒能夠提高小鼠血液硒含量和抗氧化能力，其效果優(yōu)于亞硒酸鈉；羧甲基殼聚糖硒對小鼠生長性能無影響。

羧甲基殼聚糖硒；小鼠；生長性能；硒含量；抗氧化功能

［Abstract］This experiment was conducted to determine the effects of carboxymethyl chitosan selenium on growth performance，blood selenium content and antioxidation capacity in mice.One hundred and twenty KM mice，female and male in half，were randomly assigned into three dietary treatment groups for a 28 days study，which were fed basal diets，basal diets supplemented with sodium selenite and basal diets supplemented with carboxymethyl chitosan selenium，respectively. The results showed that feed intake and feed/gain ratio（F/G）in T2 group were 5.24%，8.66%and 4.27%，4.29%lower than those in T1 group and C group，while there were no significant differences in feed intake，F(xiàn)/G and weight gains of mice among T2 group，T1 group and C group（P＞0.05）.Blood selenium contents and plasma total antioxidant capacity（T-AOC）levels in T2 group were 78.95%（P＜0.01），17.50%（P＜0.01）and 17.24%（P＜0.05），8.05%（P＜0.05）higher than those in C group and T1 group，blood selenium contents and plasma T-AOC levels in T1group were 52.63%（P＜0.05）and 8.75%（P＜0.05）higher than those of C group.Blood glutathione peroxidase（GSH-Px）activities in T2 group and T1 group were 24.65%（P＜0.01）and 14.13%（P＜0.05）higher than that of C group.Blood GSH-Px activities in T2 group were 9.22%higher than that in T1 group（P＞0.05）.Plasma malonaldehyde（MDA）contents in T2 group were 29.40%（P＜0.01）and 18.66%（P＜0.05）lower than that in C group and T1 group.Plasma MDA contents in T1 group were 13.21%（P ＜0.05）lower than that in C group.The results indicated that carboxymethyl-chitosan selenium supplementation could increase blood selenium content and antioxidant capacity in mice，and its effects were better than sodium selenite in mice. While carboxymethyl-chitosan selenium had no effect on growth performance in mice.

［Key words］carboxymethyl-chitosan selenium；mice；growth performance；selenium content；antioxidation capacity

大量研究表明，微量元素硒具有抗氧化、促生長、提高免疫力等多種生物學功能。飼料中添加的硒包括有機硒和無機硒兩大類，與無機硒相比，有機硒具有毒性低、吸收利用率高、適口性好等特點。羧甲基殼聚糖硒是通過殼聚糖的羧甲基化修飾和硒化的方法合成的新型有機硒制劑 （金黎明等，2012），能夠同時發(fā)揮有機硒和羧甲基殼聚糖的雙重作用。本試驗研究羧甲基殼聚糖硒對小鼠生長性能、血液硒含量和抗氧化能力的影響，以期為羧甲基殼聚糖硒作為飼料添加劑的實際應用提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑PF6-2非色散原子熒光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；高性能硒空心陰極燈（北京有色金屬研究總院）；微控數(shù)顯電熱板 （北京萊伯泰科儀器股份有限公司）；UV-1100型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；JA2003電子天平（上海恒平科學儀器有限公司）；羧甲基殼聚糖硒（天津農(nóng)學院動物醫(yī)學實驗室制備）；亞硒酸鈉（天津市化學試劑研究所）；鹽酸、硝酸、高氯酸，均為分析純，購自天津化學試劑二廠。

1.2試驗設(shè)計清潔級KM小鼠120只 （雌雄各半，購自中國軍事科學研究院），體重18～22 g，經(jīng)3 d的適應性飼養(yǎng)后，隨機分為C組、T1組和T2組，每組40只（雌雄各半），每組有4個重復，每個重復10只小鼠。C組飼喂基礎(chǔ)日糧作為對照組，T1組和T2組分別在基礎(chǔ)日糧中添加亞硒酸鈉和羧甲基殼聚糖硒 （其劑量以硒計，均為0.2 mg/kg日糧）。小鼠自由采食及飲水，每日更換飲水及墊料。試驗持續(xù)28 d。

1.3測定指標及方法

1.3.1生長性能指標分別于試驗開始和結(jié)束時，對小鼠進行稱重，每日記錄飼料消耗量，試驗結(jié)束時計算生長性能相關(guān)指標。

1.3.2血液樣品采集在試驗結(jié)束時，從每組選取8只小鼠（每個重復中隨機選取2只），氟烷麻醉之后，眼眶后靜脈叢取血，存儲于加入肝素的抗凝采血管中備用；部分分離血漿，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3小鼠血液硒含量測定樣品的消化處理：在250 mL錐形瓶中加入待測樣品1 mL，再加入由濃硝酸與高氯酸組成的混酸 （V/V，1∶1）10 mL，密閉常溫消化12 h后，置于電熱板上加熱直至瓶內(nèi)溶液變?yōu)橥该髑辶粒鋮s，然后加入6 mol/L鹽酸5 mL，再次加熱至溶液變?yōu)榍辶翢o色，冷卻后定容，待測。

硒含量的測定：參照高建忠等（2006）的方法，利用氫化物發(fā)生原子熒光光譜法測定全血硒含量。

1.3.4小鼠血液抗氧化功能指標測定全血谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性、血漿總抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）含量測定試劑盒由南京建成生物研究所提供，嚴格按照說明書進行操作，在紫外可見分光光度計上進行測定。

1.4數(shù)據(jù)處理用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析，采用一般線性模型中的單因素方差分析進行差異顯著性檢驗。數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均數(shù)±標準差”表示。

2　結(jié)果

2.1羧甲基殼聚糖硒對小鼠生長性能的影響由表1可知，T2組小鼠采食量較C組和T1組分別降低了5.24%和4.27%，T2組小鼠料重比較C組和T1組分別降低了8.66%和4.29%；但T2組、T1組和C組間小鼠的采食量、料重比及增重均無顯著差異（P＞0.05）。

表1　羧甲基殼聚糖硒對小鼠生長性能的影響

2.2羧甲基殼聚糖硒對小鼠全血硒含量的影響由圖1可知，T2組小鼠全血硒含量分別較C組和T1組提高了78.95%（P＜0.01）和17.24%（P＜0.05）；T1組小鼠全血硒含量較 C組提高了52.63%（P＜0.05）。

圖1　羧甲基殼聚糖硒對小鼠全血硒含量的影響

2.3羧甲基殼聚糖硒對小鼠血液抗氧化功能的影響由表2可知，T2組和T1組小鼠全血GSH-Px活性分別較 C組提高了 24.65%（P＜0.01）和14.13%（P＜0.05）；T2組小鼠全血GSH-Px活性較T1組提高了9.22%，但未達差異顯著水平 （P＞0.05）。T2組小鼠血漿T-AOC分別較C組和T1組提高了 17.50%（P＜0.01）和 8.05%（P＜0.05）；T1組小鼠血漿T-AOC水平較C組提高了8.75%（P＜0.05）。T2組小鼠血漿MDA含量分別較C組和T1組降低了29.40%（P＜0.01）和18.66%（P＜0.05）；T1組小鼠血漿MDA含量較C組降低了13.21%（P＜0.05）。

表2　羧甲基殼聚糖硒對小鼠血液抗氧化功能的影響

3　討論

本試驗結(jié)果表明，與對照組相比，飼喂羧甲基殼聚糖硒的小鼠在增重提高3.43%的情況下，其采食量減少了5.24%，料重比降低了8.66%，但均未達差異顯著水平（P＞0.05），這說明羧甲基殼聚糖硒可能具有提高小鼠生長性能的趨勢。這可能與羧甲基殼聚糖硒中羧甲基殼聚糖作用的發(fā)揮有關(guān)，而與有機硒作用的發(fā)揮關(guān)系不大；但有在某些基礎(chǔ)日糧中硒含量遠低于正常值的情況下，硒能夠顯著提高綿羊、肉牛等動物的生產(chǎn)性能的文獻報道（Wichtel等，1996），但一般認為，在基礎(chǔ)日糧中硒含量到達正常水平的情況下硒對動物生產(chǎn)性能無影響（Mehdi等，2013），而殼聚糖及其衍生物提高動物生產(chǎn)性能、促進動物生長的作用已被大量研究證實（盧美鸞等，2008；趙燕等，2006）。

本試驗結(jié)果表明，作為有機硒的羧甲基殼聚糖硒較無機硒的亞硒酸鈉能更有效地提高小鼠血液硒含量。王昕等（2015）報道，羧甲基殼聚糖硒能更有效地提高肉兔血液硒含量，其效果優(yōu)于亞硒酸鈉。陳秀蕓（2013）報道，硒化殼聚糖可顯著提高蛋用種公雞的血液硒含量，其效果優(yōu)于亞硒酸鈉。Gunter等（2003）、Mahan和Kim（1996）在豬和牛上的報道也表明有機硒較無機硒更能提高血硒的含量。

本試驗結(jié)果表明，羧甲基殼聚糖硒能夠提高小鼠血液T-AOC水平、GSH-Px活性，降低血漿MDA含量，其效果優(yōu)于亞硒酸鈉，這說明羧甲基殼聚糖硒較亞硒酸鈉能更有效地提高小鼠血液抗氧化能力。這與王昕等 （2015）、曲韻笙和朱連勤（1998）應用羧甲基殼聚糖硒或殼聚糖硒飼喂肉兔和小鼠所獲得的試驗結(jié)果相一致。這應該是有機硒和羧甲基殼聚糖共同發(fā)揮作用的結(jié)果：補硒提高動物抗氧化能力已為大量文獻報道所證實（Mehdi等，2013）；而林友文等（2003）、吳迪等（2013）和王美娜等（2015）均報道了羧甲基殼聚糖在體內(nèi)或體外都具有提高動物抗氧化能力的作用。

4　結(jié)論

羧甲基殼聚糖硒能夠提高小鼠血液硒含量和抗氧化能力，其效果優(yōu)于亞硒酸鈉；羧甲基殼聚糖硒對小鼠生長性能無影響。

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S816.7

A

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天津市應用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計劃項目（15JCYBJC30600）；天津市大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目（201510061084）