高效液相色譜法測定糕點中丙酸鈉、丙酸鈣的不確定度評定

□ 吳佳佳　瑞安市食品檢驗檢測中心

高效液相色譜法測定糕點中丙酸鈉、丙酸鈣的不確定度評定

□ 吳佳佳瑞安市食品檢驗檢測中心

材料與方法

（1）檢驗依據(jù)：《食品中丙酸鈉、丙酸鈣的測定高效液相色譜法》（GB/ T 23382-2009）。

（2）檢驗儀器：高效液相色譜儀Varian920/940-LC二極管陣列檢測器。色譜條件：色譜柱C18 4.6 mm×250 mm 5μm不銹鋼柱；流動相為1.5 g/ L磷酸氫二銨溶液，用1 mol/L磷酸溶液調(diào)pH2.7~3.5（使用時配制），經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾；流速1.0 mL/ min；柱溫25℃；進樣量20 μL；波長214 nm

（3）試劑:丙酸標準樣品。

（4）樣品處理：稱取5 g樣品在容量瓶中，20 mL和0.5 mL 1mol/L磷酸溶液，進行超聲，用1mol/L磷酸溶液調(diào)pH為3，用超純水定容，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾后進行測定。

（5）標準溶液配制。稱取丙酸0.05 g，用超純水定容至25 mL。

數(shù)學模型

X——樣品中丙酸的含量，g/kg；C0——標準使用液的濃度，mg/mL；

A1——樣品中丙酸的峰面積mv·s；m——樣品的重量，g；

V——樣品定容體積，mL；A0——丙酸標準使用液的色譜峰面積,mv·s。

計算標準不確定度各分量

標準曲線擬合的不確定度U1rel

空白和標準系列分別做一個平行，空白調(diào)零，它包含了峰面積重復測量產(chǎn)生的不確定度，儀器數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)引入的不確定度和標準溶液進樣量及曲線擬合相關性不確定度，測定結(jié)果見表1。

用最小二乘法擬合直線，利用線性回歸方程求出曲線y=0.2897x-0.0915，a=-0.0915，b=0.2879,峰面積標準偏差：

表1　標準曲線擬合相關數(shù)據(jù)

測量時，被測樣品測量兩次，故p=2，設平均值為Xpj，根據(jù)吸光度平均值測得樣品溶液中最佳丙酸含量Xpred=3.02 g/kg。

相對標準不確定度：

U1rel=0.001406/3.02=0.000486

標準物質(zhì)的相對不確定度U2rel

丙酸標準樣品（純度98.3%），從標準物質(zhì)證書上查得相對擴展不確定度為1.0%，k=2，U2rel=1.0%/2=0.0050。

標準樣品稱量引起的相對不確定度U3rel

用0.1 mg的電子天平稱取樣品4.757×102mg，按檢定證書給出的在95%的置信概率時為±0.1 mg，按矩形分布，一次稱量測定引起的不確定度為：0.1/=0.058 mg，相對標準不確度：

U3rel=0.058/4.757×102=1.2×10-4

標準溶液制備引起的不確定度U4rel

相對標準不確定度：

U4rel=0.023/25.0=0.00092

樣品稱量引起的不確定度U5rel

相對標準不確度：

U5rel=0.0082/5.09=0.0016

樣品溶液制備引起的相對標準不確定度U6rel

（1）50.0 mL容量瓶體積的不確定度分析Ucrel。①50.0mL容量瓶體積的不確定度，查檢定證書給定的為±0.05 mL，按三角分布，換算成標準偏差為0.05/=0.041；②容量瓶的變動性，查檢定證書標準偏差為0.020 mL。以上兩項合成得：

相對標準不確定度：

Ucrel=0.053/50.0=0.0011

（2）樣品處理不確定度：

樣品處理液峰面積重復性引起的標準不確定度U7rel

1峰面積重復測量產(chǎn)生的不確定度

通過重復進樣進行評定，它包含進樣量的不確定度，測試數(shù)據(jù)見表2。

2儀器數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)引起的不確定度

目前，應用于液相色譜儀峰面積處理的最大誤差為0.2%～1.0%，取1.0%，則該峰面積的相對不確定度為：

3樣品處理液峰面積重復性引起的不確定度：

樣品均勻性和處理過程產(chǎn)生的不確定度U8rel

對同一樣品進行多次重復測定，其重復實驗結(jié)果見表3。

表2　樣品重復進樣6次測定結(jié)果

表3　樣品6次平行處理測定結(jié)果

檢測食品中丙酸鈉、丙酸鈣含量不確定度

計算擴展不確定度

取包含因子k=2，則相對擴展不確定度：

Urel=2×Urel=0.0194=0.0388

根據(jù)實驗平均值測得最佳丙酸估計值為3.02 g/kg，擴展不確定度：

U=C×Urel=3.02×0.0388=0.117

測量結(jié)果的不確定度報告

丙酸含量：3.02 g/kg，標準不確 定 度0.117 g/kg； 丙 酸 含 量：（3.02±0.117）g/kg；k=2。

吳佳佳（1989-），女，浙江省溫州人，本科，助理工程師。研究方向：食品檢驗。