• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    重癥手足口病患兒腸道菌群和腸粘膜通透性的相關(guān)研究

    2016-09-10 01:33:52蘇宇飛
    中國(guó)婦幼健康研究 2016年3期
    關(guān)鍵詞:雙歧口病益生菌

    蘇宇飛,陳 鏡,王 列,文 俊

    (西安市兒童醫(yī)院急診科,陜西 西安 710003)

    ?

    【臨床研究】

    重癥手足口病患兒腸道菌群和腸粘膜通透性的相關(guān)研究

    蘇宇飛,陳鏡,王列,文俊

    (西安市兒童醫(yī)院急診科,陜西 西安 710003)

    目的探討重癥手足口病患兒腸道菌群和腸粘膜通透性的變化,為臨床給予益生菌治療提供參考依據(jù)。方法選取西安市兒童醫(yī)院感染科2013年5月至2015年4月收治的重癥手足口病患兒100例作為研究組,同時(shí)隨機(jī)選取同期體檢的健康兒童50例作為對(duì)照組,采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)分別檢測(cè)研究組患兒疾病初期、恢復(fù)期及對(duì)照組兒童糞便中大腸桿菌及雙歧桿菌的含量,同時(shí)分別采用改良基質(zhì)偶氮顯色法、改良鄰聯(lián)茴香胺試劑法、酶學(xué)分光光度計(jì)法檢測(cè)血液中內(nèi)毒素、二胺氧化酶(DAO),D-乳酸水平。結(jié)果重癥手足口病患兒糞便雙歧桿菌含量在疾病初期對(duì)數(shù)值(8.79±0.58CFU/g),顯著低于恢復(fù)期(9.26±0.98CFU/g)和正常對(duì)照組(9.29±0.86CFU/g),F(xiàn)=3.129,P=0.048,恢復(fù)期患兒與對(duì)照組兒童雙歧桿菌含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.088,P=0.930);疾病初期(9.20±0.84CFU/g)和恢復(fù)期(9.03±0.82CFU/g)大腸桿菌對(duì)數(shù)值均顯著高于正常對(duì)照組(7.58±0.35CFU/g),F(xiàn)=3.707,P=0.028,疾病初期及恢復(fù)期大腸桿菌含量相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.824,P=0.413);雙歧桿菌/大腸桿菌的比值(B/E)在疾病初期(0.96±0.24)和恢復(fù)期(1.02±0.31)均顯著低于對(duì)照組兒童(1.23±0.46),F(xiàn)=3.254,P=0.043,疾病初期和恢復(fù)期B/E比值差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.877,P=0.384);重癥手足口病患兒血液中內(nèi)毒素(0.53±0.10EU/mL)、DAO(0.08±0.02μmmol·min-1·mL-1)、D-乳酸(5.32±0.97μmmol/mL)與對(duì)照組兒童(0.48±0.09EU/mL、0.07±0.01μmmol·min-1·mL-1、4.96±0.90μmmol/mL)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為2.468、2.772、2.319,均P<0.05)。結(jié)論重癥手足口病患兒腸道菌群組成發(fā)生變化,大腸桿菌含量增高,疾病初期雙歧桿菌含量減少,且伴腸黏膜屏障通透性改變,臨床可應(yīng)用益生菌輔助治療。

    重癥手足口病;腸道菌群;腸粘膜屏障;益生菌

    [Abstract]Objective To investigate the changes of intestinal flora and mucosal permeability in severe hand-foot-and-mouth disease (HFMD) cases, and to provide reference for clinical treatment with probiotics. Methods Totally 100 severe HFMD cases were selected in study group from infection department of Xi’an Children’ Hospital from May 2013 to April 2015, and 50 healthy children taking physical examination at the same period were selected in control group. The contents of bifidobacteria and E.coli in stool were detected by Taqman real-time PCR for patient children at early stage and recovery stage and for controls. The levels of Endotoxin, DAO and D-lactate in the serum were detected by improved chromomeric substrate azo, improved method of odianisidine agent and enzymologist spectrophotometers, respectively. Results Bifidobacterialog content at early stage of severe HFMD children (8.79±0.58CFU/g) was significantly lower than that at recovery stage (9.26±0.98CFU/g) and healthy controls (9.29±0.86CFU/g) (F=3.129,P=0.048). Cases at recovery stage were not significantly different from controls in bifidobacteria content (t=0.088,P=0.930). The contents of E. coli of cases at early stage (9.20±0.84CFU/g) and recovery stage (9.03±0.82CFU/g) were significantly higher than control group (7.58±0.35CFU/g) (F=3.707,P=0.028). The contents of E. coli at early stage was not significantly different from those at recovery stage (t=0.824,P=0.413). Bifidobacteria/E. coli ratio (B/E) at early stage (0.96±0.24) and recovery stage (1.02±0.31) were significantly lower than the control group (1.23±0.46) (F=3.254,P=0.043), and there was no significant difference in B/E ratio between early stage and recovery stage (t=0.877,P=0.384). Blood endotoxin (0.53±0.10EU/mL), DAO (0.08±0.02μmmol/min per mL), D-lactic acid (5.32±0.97μmmol/mL) in study group were significantly higher than in the control group [0.48±0.09EU/mL, 0.07±0.01μmmol/min per mL, 4.96±0.90μmmol/mL] (tvalue was 2.468, 2.772, and 2.319, respectively, allP<0.05). Conclusion Intestinal flora of children with severe HFMD change, and E. coli content increases. Bifidobacteria content decreases at the early stage, and permeability of intestinal mucosa barrier changes. Thus probiotics is recommended for adjuvant treatment.

    [Key words]severe hand-foot-mouth disease; intestinal flora; intestinal mucosal barrier; probiotics

    手足口病是由多種腸道病毒感染引起的小兒常見傳染性疾病,其中柯薩奇病毒A16型(CA16)和腸道病毒71型(EV71)是手足口病的主要病原。手足口病傳染性強(qiáng),傳播速度快,控制難度大,很容易呈現(xiàn)爆發(fā)流行,少數(shù)重癥者可累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)。個(gè)別重癥患兒病情發(fā)展快,可導(dǎo)致死亡。目前手足口病尚無(wú)特效治療和預(yù)防方法,已成為嚴(yán)重威脅兒童身體健康及生命安全的主要疾病。

    研究表明,腸道粘膜是病毒入侵和繁殖的主要場(chǎng)所[1],腸道粘膜及其定植的腸道菌群是機(jī)體抵御病原體入侵的最重要的屏障之一。腸道菌群不僅能增強(qiáng)腸道粘膜的屏障功能,還有預(yù)防腸道感染的能力[2];腸道致病菌與腸道益生菌之間相互制約與依賴,維持腸道內(nèi)微生態(tài)的動(dòng)態(tài)平衡。腸道菌群結(jié)構(gòu)失衡會(huì)造成腸上皮通透性增加從而導(dǎo)致疾病的發(fā)生。本研究通過檢測(cè)重癥手足口病患兒在疾病初期及恢復(fù)期腸道內(nèi)雙歧桿菌和大腸桿菌的含量,以及腸粘膜通透性指標(biāo)的變化,探求不同時(shí)期腸道菌群及腸粘膜屏障功能的變化,旨在為完善治療方案提供依據(jù),報(bào)道如下。

    1資料與方法

    1.1研究對(duì)象

    研究組:入選2013年5月至2015年4月西安市兒童醫(yī)院感染科收治的重癥手足口病患兒100例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn):①年齡2~5歲;②入院時(shí)病程在3天內(nèi);③臨床確診為重癥手足口?。虎苋朐航?jīng)甘露醇降顱壓,甲潑尼龍琥珀酸鈉減輕顱內(nèi)水腫,利巴韋林抗病毒,免疫球蛋白、降溫、鎮(zhèn)靜、止驚等對(duì)癥支持治療7天后臨床治愈的患兒。排除標(biāo)準(zhǔn):①危重型病例;②腦發(fā)育不良或腦損傷、先心病患兒,③近2周內(nèi)有腹瀉病史或服用益生菌制劑、抗生素者。所有病例診斷均依據(jù)衛(wèi)生部制定的《手足口病診療指南(2010年版)》[3]中重型手足口病診斷標(biāo)準(zhǔn),即:精神差,出現(xiàn)嗜睡、譫妄、嘔吐、頭痛,共濟(jì)失調(diào)、肢體頻繁抖動(dòng)、肌陣攣、眼球震顫、眼球運(yùn)動(dòng)障礙,無(wú)力或急性遲緩性麻痹等癥狀,可出現(xiàn)腦膜刺激征、驚厥、腱反射消失或減弱等神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和體征。所有患兒腸道病毒核酸檢測(cè)均陽(yáng)性。

    對(duì)照組:選擇同期西安市兒童醫(yī)院兒??企w檢的正常兒童50例。年齡2~5歲,近2周沒有腹瀉病史,并沒有使用抗生素和益生菌。

    100例重癥手足口病患兒為研究對(duì)象,男60例,女40例,平均年齡3.7±1.2歲,均臨床治愈出院;同時(shí)隨機(jī)選擇同期兒??平】刁w檢兒童50例作為對(duì)照組,其中男30例,女20例,平均年齡3.9±1.1歲。各組兒童性別、年齡比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),具有可比性。

    1.2標(biāo)本采集

    研究組患兒入院第2天清晨留取糞便作為疾病初期糞便標(biāo)本,治療1周后留取糞便作為恢復(fù)期糞便標(biāo)本,對(duì)照組兒童體檢時(shí)留取糞便標(biāo)本,符合納入標(biāo)準(zhǔn)的兒童糞便標(biāo)本要求避免尿液、灰塵等污染,選擇沒有被污染的部分重量需大于1g,放置于無(wú)菌糞便收納盒中,分別做好標(biāo)記,并置于-20℃冰箱保存至糞便DNA提取。血標(biāo)本的收集是被納入研究組患兒入院次日清晨、對(duì)照組兒童體檢時(shí)空腹抽取靜脈血2~3mL至肝素抗凝管內(nèi),然后離心機(jī)上2 000 r/min離心5min,最后提取上層血漿放到-20℃冰箱保存直至內(nèi)毒素、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸檢測(cè)。

    1.3研究方法

    采用熒光定量PCR技術(shù)分別檢測(cè)3組兒童糞便中大腸桿菌及雙歧桿菌的含量;分別采用改良基質(zhì)偶氮顯色法、改良鄰聯(lián)茴香胺試劑法和酶學(xué)分光光度計(jì)法檢測(cè)研究組及對(duì)照組兒童血液中內(nèi)毒素、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸水平。

    1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    2結(jié)果

    2.1兩組兒童糞便雙歧桿菌與大腸桿菌含量比較

    兩組兒童糞便檢測(cè)雙歧桿菌與大腸桿菌對(duì)數(shù)值差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。研究組患兒雙歧桿菌含量在疾病初期對(duì)數(shù)值顯著低于恢復(fù)期和正常對(duì)照組(P<0.05),而恢復(fù)期患兒與對(duì)照組兒童雙歧桿菌含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);研究組患兒疾病初期和恢復(fù)期大腸桿菌對(duì)數(shù)值均顯著高于正常對(duì)照組(P<0.05),疾病初期及恢復(fù)期大腸桿菌含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);雙歧桿菌/大腸桿菌的比值(B/E)在疾病初期和恢復(fù)期均顯著低于對(duì)照組兒童(P<0.05),初期和恢復(fù)期B/E比值差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。

    注:*與恢復(fù)期組比較t=2.681,P=0.009,△與對(duì)照組比較t=0.088,P=0.930;#與恢復(fù)期組比較t=9.405,P<0.001;@與初期組比較t=0.824,P=0.413;§與恢復(fù)期組比較t=2.146,P=0.036,◇與初期組比較t=0.877,P=0.384。

    2.2兩組兒童血漿內(nèi)毒素、二胺氧化酶、D-乳酸水平比較

    重癥手足口病患兒疾病初期血液中內(nèi)毒素、DAO、D-乳酸含量與健康對(duì)照組兒童差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),見表2。

    3討論

    手足口病是由多種腸道病毒感染引起的兒童常見傳染病,其傳染性強(qiáng)、傳播途徑復(fù)雜、傳播速度快,容易出現(xiàn)短時(shí)間內(nèi)暴發(fā)流行。該病的發(fā)病機(jī)制目前尚不明確。有研究報(bào)道,腸道病毒進(jìn)入消化道后在腸黏膜內(nèi)復(fù)制繁殖并持續(xù)釋放到血液,然后傳遍全身而發(fā)病,腸道黏膜是病毒入侵和增殖的主要場(chǎng)所[1]。人體腸道寄居著種類繁多、數(shù)量巨大的細(xì)菌群落。腸道菌群中約99%以上由乳酸桿菌、雙歧桿菌等專性厭氧菌組成,其余1%為腸桿菌科細(xì)菌為主的兼性厭氧菌[4],主要為大腸桿菌。糞便最能體現(xiàn)腸道菌群的總體情況,正常糞便40%是微生物,活菌高達(dá)90%以上,其中專性厭氧菌(如雙歧桿菌、乳酸桿菌等)占活菌95%以上[5]。腸道正常菌群與宿主長(zhǎng)期處于共生狀態(tài),正常菌群一方面能維持宿主正常腸道生理功能及屏障功能,同時(shí)也能拮抗外源性致病菌的入侵與定植,維持腸道免疫平衡與穩(wěn)定,降低血氨及膽固醇等重要的生理作用。腸道屏障功能出現(xiàn)障礙,將導(dǎo)致內(nèi)毒素及細(xì)菌移位,引起各種免疫反應(yīng)及感染[6]。

    3.1重癥手足口病患兒腸道菌群的變化特征

    本研究通過比較重癥手足口病早期、恢復(fù)期與健康兒童腸道菌群的變化,探討重癥手足口病腸道菌群的變化特征和益生菌輔助治療的依據(jù)。研究結(jié)果顯示,重癥手足口病患兒腸道菌群構(gòu)成比例存在變化,疾病初期腸道中雙歧桿菌含量顯著低于恢復(fù)期和對(duì)照組,其原因可能是重癥手足口病初期,由于嚴(yán)重的感染破壞了胃腸粘膜循環(huán)從而導(dǎo)致腸道的缺血/缺氧誘發(fā)了腸道菌群的紊亂。由于正常菌群結(jié)構(gòu)遭到破壞,雙歧桿菌顯著減少,其生物拮抗功能消失,促使了條件治病菌和大腸桿菌過度增殖,因而重癥手足口病初期和恢復(fù)期大腸桿菌含量較對(duì)照組顯著增加;由于疾病恢復(fù)期,胃腸菌群生態(tài)未完全恢復(fù),大腸桿菌的含量和疾病初期無(wú)顯著差別。疾病初期和恢復(fù)期的雙歧桿菌/大腸桿菌比值均低于正常對(duì)照組兒童,提示重癥手足口病患兒存在腸道菌群紊亂,同時(shí)也提示這是益生菌治療手足口病有效的原因之一。因此手足口病患兒可給予益生菌輔助治療,以維持正常的腸道菌群,防止出現(xiàn)胃腸道菌群失衡,繼而導(dǎo)致腸黏膜屏障功能障礙,阻止病情加重。但疾病初期和恢復(fù)期雙歧桿菌/大腸桿菌比值無(wú)顯著變化,可能與樣本量少有關(guān),需要大樣本量的臨床實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)。

    3.2重癥手足口病患兒腸道粘膜屏障功能的變化

    血漿內(nèi)毒素水平、D-乳酸水平、DAO活性測(cè)定是用來評(píng)價(jià)腸道粘膜屏障功能的重要指標(biāo)[7],上述指標(biāo)升高,提示腸道粘膜屏障功能受到破壞。學(xué)者楊娟檢測(cè)重癥手足口病患兒血漿內(nèi)毒素、D-乳酸及DAO水平,發(fā)現(xiàn)重癥手足口病患兒上述指標(biāo)均高于正常兒童及輕癥患兒[8],認(rèn)為重癥手足口病患兒存在腸黏膜屏障功能的損傷,腸道毒素入血導(dǎo)致內(nèi)毒素血癥,患兒出現(xiàn)高熱、嘔吐及神經(jīng)系統(tǒng)的一系列臨床表現(xiàn)。本研究對(duì)上述指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè),發(fā)現(xiàn)手足口病患兒的確存在腸粘膜通透性的明顯改變,與楊娟研究結(jié)果一致。

    3.3益生菌在手足口病中的應(yīng)用研究

    益生菌是指能夠?qū)λ拗鹘】诞a(chǎn)生有益作用的活的微生物。腸黏膜表層的菌膜結(jié)構(gòu)具有抗定植力的生物屏障功能,能有效阻止過路菌及外籍菌的侵襲。另外腸道益生菌如乳酸桿菌、雙歧桿菌還通過代謝乙酸、乳酸等代謝產(chǎn)物降低腸道局部PH值,殺死沙門氏菌、大腸埃希菌等致病菌,并促進(jìn)腸道蠕動(dòng),加速細(xì)菌、毒素等有害物質(zhì)排出。研究顯示益生菌對(duì)兒童及成人腹瀉、慢性腸炎、泌尿系統(tǒng)疾病、肝膽疾病、過敏性疾病等具有明確的治療效果[9]。陳冰蓉等(2010年)用酪酸梭菌輔助治療兒童手足口病,發(fā)現(xiàn)患兒體溫、皰疹消失時(shí)間及食欲恢復(fù)時(shí)間均顯著縮短。魏紅娟等[4]用凝結(jié)芽孢桿菌活菌片輔助治療手足口病,觀察到患兒食欲及體溫恢復(fù)正常時(shí)間及皰疹消失及好轉(zhuǎn)時(shí)間均顯著縮短。上述研究結(jié)果一方面充分說明益生菌制劑對(duì)手足口病輔助治療的可靠效果,另一方面也充分說明手足口病患兒的確存在腸道粘膜屏障功能的障礙。

    綜上所述,重癥手足口病患兒腸道菌群存在紊亂情況,表現(xiàn)為大腸桿菌等致病菌數(shù)量顯著增高,疾病初期雙歧桿菌等益生菌數(shù)量較低,同時(shí),患兒伴隨腸道粘膜通透性改變,因此重癥手足口病患兒建議在疾病初期給予益生菌制劑,以維持腸道正常菌群,預(yù)防腸道菌群失調(diào)繼而出現(xiàn)的腸粘膜屏障功能障礙,阻止疾病惡化。

    [1]Patel T, Gawkrodger D J. Food allergy in patients with eczema: immediate symptoms are usual, with nuts and tomatoes the major allergens[J].J Eur Acad Dermatol Venereol,2011,25(7):865-867.

    [2]Sharon G, Garg N, Debelius J,etal.Specialized metabolites from the microbiome in health and disease[J].Cell Metab,2014,20(5):719-730.

    [3]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.手足口病診療指南(2010年版)[J].國(guó)際呼吸雜志,2010,30(24):1473-1475.

    [4]魏紅娟,趙紅立,任尚申,等.凝結(jié)芽孢桿菌活菌制劑在手足口病中的應(yīng)用[J].臨床兒科雜志,2012,30(4): 355-357.

    [5]Liang J, Sha S M, Wu K C.Role of the intestinal microbiota and fecal transplantation in inflammatory bowel diseases[J].J Dig Dis,2014,15(12):641-646.

    [6]Huang X Z, Zhu L B, Li Z R,etal. Bacterial colonization and intestinal mucosal barrier development[J].World Journal of Clinical Pediatrics,2013,2(4):46-53.

    [7]黃永坤.胃腸道菌群和胃腸黏膜屏障的檢測(cè)[J].中國(guó)實(shí)用兒科雜志,2010,25(7):516-519.

    [8]楊娟,黃永坤,王美芬,等.不同類型手足口病患兒腸黏膜屏障功能測(cè)定的臨床意義[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2010,25(10):731-732.

    [9]Dang Y, Reinhardt J D, Zhou X,etal.The effect of probiotics supplementation on Helicobacter pylori eradication rates and side effects during eradication therapy:a meta-analysis[J].PLoS One,2014,9(11):e111030.

    [專業(yè)責(zé)任編輯:史曉薇]

    Correlation between intestinal flora and intestinal mucosal permeability in patient children with severe hand-foot-mouth disease

    SU Yu-fei, CHEN Jing, WANG Lie, WEN Jun

    (Department of Emergency, Xi’an Children’ Hospital, Shaanxi Xi’an 710003, China)

    2015-12-14

    蘇宇飛(1973-),男,副主任醫(yī)師,碩士研究生,主要從事兒童急危重癥的研究。

    10.3969/j.issn.1673-5293.2016.03.014

    R725.1

    A

    1673-5293(2016)03-0323-03

    猜你喜歡
    雙歧口病益生菌
    手足口病那些事
    警惕手足口病
    幼兒園(2020年18期)2020-12-30 11:58:02
    孩子“口腔潰瘍”警惕手足口病惹禍
    益生元和益生菌促進(jìn)豬生長(zhǎng)和健康
    益生菌別貪多
    幸福(2017年18期)2018-01-03 06:34:45
    神奇的小小腸道益生菌
    中國(guó)益生菌網(wǎng)
    雙歧桿菌三聯(lián)活菌聯(lián)合多潘立酮治療新生兒喂養(yǎng)不耐受40例
    中醫(yī)三聯(lián)法治療手足口病126例
    產(chǎn)細(xì)菌素雙歧桿菌的篩選及其分泌條件研究
    欧美日韩乱码在线| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 美女 人体艺术 gogo| 日本 av在线| 少妇高潮的动态图| av片东京热男人的天堂| 51国产日韩欧美| 无人区码免费观看不卡| 久久久国产成人免费| 91久久精品国产一区二区成人 | 他把我摸到了高潮在线观看| 在线观看av片永久免费下载| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 午夜久久久久精精品| 男插女下体视频免费在线播放| 色精品久久人妻99蜜桃| 99久久精品热视频| 日本与韩国留学比较| 国产亚洲精品久久久久久毛片| www日本在线高清视频| 99热这里只有是精品50| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 天天躁日日操中文字幕| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 搞女人的毛片| 久久人妻av系列| 少妇的逼好多水| 91久久精品电影网| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产成人影院久久av| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲精品久久国产高清桃花| 在线观看舔阴道视频| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 18禁在线播放成人免费| 天天添夜夜摸| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产亚洲精品av在线| 99久久精品热视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 哪里可以看免费的av片| 日韩国内少妇激情av| 成人三级黄色视频| 美女黄网站色视频| 两个人看的免费小视频| 婷婷六月久久综合丁香| 两人在一起打扑克的视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 久久精品影院6| 亚洲天堂国产精品一区在线| 日本精品一区二区三区蜜桃| 99热这里只有是精品50| 国产乱人视频| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲av成人精品一区久久| 成人一区二区视频在线观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 十八禁人妻一区二区| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 精品电影一区二区在线| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 高清日韩中文字幕在线| 精品不卡国产一区二区三区| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产精品 欧美亚洲| 国产黄色小视频在线观看| 亚洲成人中文字幕在线播放| 日韩人妻高清精品专区| 国产精品久久久久久久电影 | 麻豆国产av国片精品| 免费电影在线观看免费观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 午夜福利免费观看在线| 最好的美女福利视频网| 欧美+日韩+精品| 狂野欧美激情性xxxx| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国语自产精品视频在线第100页| 日韩亚洲欧美综合| 90打野战视频偷拍视频| 国产野战对白在线观看| 男人的好看免费观看在线视频| 国产主播在线观看一区二区| 熟女电影av网| 国产亚洲精品av在线| 国产在线精品亚洲第一网站| 国内精品久久久久久久电影| 国产精品女同一区二区软件 | 亚洲成av人片在线播放无| 午夜福利成人在线免费观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 麻豆国产av国片精品| 免费av毛片视频| 国产野战对白在线观看| 99热这里只有精品一区| 日韩欧美精品免费久久 | 在线看三级毛片| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲国产精品合色在线| 12—13女人毛片做爰片一| 中文字幕高清在线视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 51午夜福利影视在线观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 男人舔奶头视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 欧美大码av| 国产中年淑女户外野战色| 日韩人妻高清精品专区| 中文资源天堂在线| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 嫩草影院入口| 在线免费观看的www视频| 亚洲色图av天堂| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产一区二区激情短视频| www日本黄色视频网| 欧美成人免费av一区二区三区| 精品午夜福利视频在线观看一区| 精华霜和精华液先用哪个| 高潮久久久久久久久久久不卡| 热99re8久久精品国产| 精品久久久久久久毛片微露脸| 日韩欧美 国产精品| 国产色婷婷99| 亚洲七黄色美女视频| 大型黄色视频在线免费观看| 午夜视频国产福利| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 亚洲人成伊人成综合网2020| 搡老妇女老女人老熟妇| 热99在线观看视频| 日韩欧美精品v在线| 国产一级毛片七仙女欲春2| 小说图片视频综合网站| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 男女那种视频在线观看| 狂野欧美激情性xxxx| 国产淫片久久久久久久久 | 亚洲电影在线观看av| 成人国产综合亚洲| av天堂中文字幕网| 亚洲成人中文字幕在线播放| 男女床上黄色一级片免费看| 全区人妻精品视频| 国产不卡一卡二| 亚洲成人免费电影在线观看| 中文字幕高清在线视频| xxxwww97欧美| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 99久久精品热视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲美女视频黄频| 欧美三级亚洲精品| 国产av麻豆久久久久久久| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲精品久久国产高清桃花| 一二三四社区在线视频社区8| 国内精品美女久久久久久| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 99久国产av精品| 国产亚洲精品久久久com| a级毛片a级免费在线| 男女下面进入的视频免费午夜| 男人舔奶头视频| 波野结衣二区三区在线 | 可以在线观看毛片的网站| 日本一本二区三区精品| 成人18禁在线播放| 色av中文字幕| 成年免费大片在线观看| 国内精品久久久久久久电影| 国产黄色小视频在线观看| 免费av毛片视频| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久久香蕉精品热| 国内精品一区二区在线观看| svipshipincom国产片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 久久精品影院6| 久久精品国产自在天天线| 成年女人看的毛片在线观看| 在线播放国产精品三级| x7x7x7水蜜桃| 精品久久久久久久末码| 综合色av麻豆| 少妇丰满av| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 人人妻人人看人人澡| 欧美大码av| 无人区码免费观看不卡| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 精品乱码久久久久久99久播| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产69精品久久久久777片| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲av成人av| 一区福利在线观看| av天堂在线播放| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 天天一区二区日本电影三级| 国产探花在线观看一区二区| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 一进一出好大好爽视频| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 亚洲男人的天堂狠狠| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 老鸭窝网址在线观看| 久久久精品欧美日韩精品| 岛国视频午夜一区免费看| 午夜福利欧美成人| 在线观看一区二区三区| 精品电影一区二区在线| 国产探花极品一区二区| 欧美乱色亚洲激情| 一进一出抽搐动态| 俺也久久电影网| 我要搜黄色片| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 日本 av在线| 午夜福利高清视频| 激情在线观看视频在线高清| 国产高清三级在线| 成年免费大片在线观看| 一级作爱视频免费观看| 日本一二三区视频观看| 高清毛片免费观看视频网站| 国产真实乱freesex| 老汉色av国产亚洲站长工具| 最好的美女福利视频网| 久久国产乱子伦精品免费另类| 久久精品国产自在天天线| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产在线精品亚洲第一网站| 免费观看精品视频网站| 欧美日韩国产亚洲二区| 日韩欧美在线二视频| 99久久精品国产亚洲精品| 久久久国产成人免费| 一本一本综合久久| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久中文看片网| 色综合亚洲欧美另类图片| ponron亚洲| 免费在线观看影片大全网站| 国产老妇女一区| 无限看片的www在线观看| 久久久久久久久中文| 国产伦精品一区二区三区四那| 中文字幕高清在线视频| 久久久久久九九精品二区国产| 3wmmmm亚洲av在线观看| 色吧在线观看| 九色成人免费人妻av| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲欧美日韩无卡精品| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 欧美又色又爽又黄视频| 国产主播在线观看一区二区| 深爱激情五月婷婷| 久久性视频一级片| 国产69精品久久久久777片| 久久久成人免费电影| 丰满的人妻完整版| 久久99热这里只有精品18| 90打野战视频偷拍视频| 十八禁网站免费在线| 啪啪无遮挡十八禁网站| 99riav亚洲国产免费| 欧美成人免费av一区二区三区| 一级毛片高清免费大全| 亚洲成人免费电影在线观看| 热99在线观看视频| 国产精品女同一区二区软件 | 日本a在线网址| 成人性生交大片免费视频hd| 精品久久久久久成人av| 日本在线视频免费播放| 香蕉久久夜色| 欧美成人一区二区免费高清观看| av在线天堂中文字幕| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲精品456在线播放app | 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 成人欧美大片| av专区在线播放| 国产免费男女视频| 久久国产精品影院| 午夜福利在线在线| 亚洲精品亚洲一区二区| 嫩草影视91久久| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 真人一进一出gif抽搐免费| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 免费看光身美女| 日本与韩国留学比较| 色综合站精品国产| 国产成人aa在线观看| 国产高清三级在线| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产精品国产高清国产av| 久久欧美精品欧美久久欧美| 日韩欧美 国产精品| 日韩人妻高清精品专区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 欧美日韩黄片免| 国产乱人视频| www日本黄色视频网| 亚洲av美国av| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 变态另类丝袜制服| 中文字幕熟女人妻在线| 国产精品一区二区三区四区久久| 欧美黑人欧美精品刺激| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 日本免费a在线| 啪啪无遮挡十八禁网站| 久久九九热精品免费| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲精品456在线播放app | 亚洲国产精品sss在线观看| 国产高潮美女av| 精品一区二区三区人妻视频| h日本视频在线播放| 亚洲中文字幕日韩| 内射极品少妇av片p| 国产精品99久久久久久久久| 夜夜夜夜夜久久久久| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 哪里可以看免费的av片| 超碰av人人做人人爽久久 | 久久久国产成人精品二区| 欧美丝袜亚洲另类 | 18禁美女被吸乳视频| 男插女下体视频免费在线播放| 嫁个100分男人电影在线观看| 夜夜爽天天搞| 日韩亚洲欧美综合| 国产视频内射| 国产成人a区在线观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 波野结衣二区三区在线 | 国产精品女同一区二区软件 | 不卡一级毛片| 日本黄大片高清| 18禁美女被吸乳视频| 一本久久中文字幕| aaaaa片日本免费| 国模一区二区三区四区视频| 夜夜爽天天搞| 一个人免费在线观看电影| 少妇丰满av| 成人特级av手机在线观看| 午夜激情福利司机影院| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲七黄色美女视频| 欧美性感艳星| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 18禁国产床啪视频网站| 亚洲av美国av| 久久亚洲真实| 99riav亚洲国产免费| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产成人欧美在线观看| 两个人看的免费小视频| 韩国av一区二区三区四区| 悠悠久久av| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲精品色激情综合| 制服丝袜大香蕉在线| 搡老妇女老女人老熟妇| 天天添夜夜摸| 母亲3免费完整高清在线观看| 午夜激情欧美在线| 午夜激情欧美在线| 国产成人啪精品午夜网站| 午夜精品一区二区三区免费看| 在线播放国产精品三级| 看免费av毛片| 真实男女啪啪啪动态图| 中文字幕高清在线视频| 精品一区二区三区av网在线观看| 丁香六月欧美| 一个人看视频在线观看www免费 | 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲成人久久爱视频| 成人av在线播放网站| 国产精品亚洲av一区麻豆| 人妻久久中文字幕网| 十八禁人妻一区二区| 国产精品久久久久久久久免 | 韩国av一区二区三区四区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲国产精品sss在线观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 深夜精品福利| 国产国拍精品亚洲av在线观看 | 又紧又爽又黄一区二区| 日本免费一区二区三区高清不卡| 神马国产精品三级电影在线观看| ponron亚洲| 搡老岳熟女国产| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 国产伦精品一区二区三区四那| netflix在线观看网站| 美女被艹到高潮喷水动态| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产免费一级a男人的天堂| 悠悠久久av| 少妇丰满av| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲最大成人手机在线| 中文在线观看免费www的网站| 精品一区二区三区人妻视频| 我要搜黄色片| 嫩草影视91久久| 国产伦一二天堂av在线观看| 男女视频在线观看网站免费| 久99久视频精品免费| 久久精品国产综合久久久| 美女大奶头视频| 美女cb高潮喷水在线观看| 99久久精品一区二区三区| 免费看a级黄色片| 色精品久久人妻99蜜桃| 天堂网av新在线| 老熟妇仑乱视频hdxx| 超碰av人人做人人爽久久 | 欧美日韩一级在线毛片| 真实男女啪啪啪动态图| 一本一本综合久久| 国产精品野战在线观看| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲av美国av| 午夜激情欧美在线| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产三级黄色录像| 免费观看人在逋| 精品日产1卡2卡| 日本黄色视频三级网站网址| 亚洲专区中文字幕在线| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 一级毛片高清免费大全| 成人特级黄色片久久久久久久| 美女免费视频网站| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产精品,欧美在线| 一个人观看的视频www高清免费观看| 99久久精品国产亚洲精品| 一区二区三区国产精品乱码| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产三级黄色录像| 免费在线观看成人毛片| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| www.999成人在线观看| 最后的刺客免费高清国语| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产精品亚洲一级av第二区| 一级a爱片免费观看的视频| 久久6这里有精品| 午夜久久久久精精品| 网址你懂的国产日韩在线| 国产av在哪里看| a级毛片a级免费在线| 精品午夜福利视频在线观看一区| 高潮久久久久久久久久久不卡| 少妇熟女aⅴ在线视频| 午夜影院日韩av| 亚洲av美国av| 给我免费播放毛片高清在线观看| 亚洲人成网站在线播| 人人妻人人澡欧美一区二区| 欧美黑人欧美精品刺激| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产日本99.免费观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 丰满人妻一区二区三区视频av | 宅男免费午夜| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 日韩亚洲欧美综合| 香蕉久久夜色| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 精品国产三级普通话版| 亚洲七黄色美女视频| 制服人妻中文乱码| 一级黄色大片毛片| 久久久成人免费电影| 狠狠狠狠99中文字幕| 69av精品久久久久久| 日本一本二区三区精品| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美av亚洲av综合av国产av| 亚洲精品粉嫩美女一区| 1024手机看黄色片| 在线播放国产精品三级| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 欧美+日韩+精品| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 国产成人福利小说| 久久久久国内视频| 久久久久免费精品人妻一区二区| 我的老师免费观看完整版| 精品免费久久久久久久清纯| 美女高潮的动态| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 精品人妻1区二区| 淫秽高清视频在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 波野结衣二区三区在线 | 亚洲中文字幕日韩| 两个人视频免费观看高清| 日韩欧美在线二视频| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲成人精品中文字幕电影| 69av精品久久久久久| 亚洲国产色片| 婷婷精品国产亚洲av| 18禁国产床啪视频网站| 欧美成狂野欧美在线观看| 一级黄色大片毛片| 免费高清视频大片| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 日本成人三级电影网站| 两个人视频免费观看高清| 真实男女啪啪啪动态图| 国产高清视频在线播放一区| www.www免费av| 国产色婷婷99| 国产野战对白在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 国产av麻豆久久久久久久| 9191精品国产免费久久| 麻豆久久精品国产亚洲av| 岛国在线免费视频观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 免费人成视频x8x8入口观看| 十八禁人妻一区二区| 内地一区二区视频在线| 欧美av亚洲av综合av国产av| 午夜亚洲福利在线播放| 真人一进一出gif抽搐免费| 在线a可以看的网站| 国产精品av视频在线免费观看| 免费观看人在逋| xxx96com| 午夜福利在线在线| 禁无遮挡网站| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| av视频在线观看入口| 久久人妻av系列| 国产私拍福利视频在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 久久人妻av系列| 欧美黄色片欧美黄色片| 可以在线观看的亚洲视频| av在线蜜桃| 性色av乱码一区二区三区2| 黄色丝袜av网址大全| 白带黄色成豆腐渣| 有码 亚洲区| 亚洲人与动物交配视频| 国产精品国产高清国产av| 男女下面进入的视频免费午夜| 老司机福利观看| 不卡一级毛片| 桃红色精品国产亚洲av| 国产精品野战在线观看| 国产一区在线观看成人免费| 91麻豆av在线| 日韩精品青青久久久久久| 日韩有码中文字幕| 天天一区二区日本电影三级| 99久久精品热视频| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产三级中文精品| xxxwww97欧美| 999久久久精品免费观看国产| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲一区二区三区不卡视频| 国产精品三级大全| netflix在线观看网站| www.999成人在线观看| 午夜视频国产福利| 亚洲18禁久久av| 美女被艹到高潮喷水动态| 岛国视频午夜一区免费看| 脱女人内裤的视频| 国产不卡一卡二| 久99久视频精品免费| 久久久久亚洲av毛片大全|