PARP-1在膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及機(jī)制研究

梁其仲，陳　銘，余書(shū)廣

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PARP-1在膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及機(jī)制研究

梁其仲，陳銘，余書(shū)廣

目的探討聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)在膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用及可能機(jī)制。方法收集我院手術(shù)切除的30例膀胱癌患者組織標(biāo)本30份、患者癌旁正常組織標(biāo)本為對(duì)照，采用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)法(S-P)檢測(cè)PARP-1在膀胱癌及癌旁組織中的表達(dá)。結(jié)果膀胱癌組織中PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁正常組織(P<0.01)；膀胱癌組織有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織(P<0.05)，臨床分期Ⅲ～Ⅳ期組織PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率高于Ⅰ～Ⅱ期組織(P<0.05)。結(jié)論P(yáng)ARP-1在膀胱癌組織中表達(dá)明顯上調(diào)，并且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期關(guān)系密切，提示可能參與了膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程。因此，將PAPR-1抑制劑廣泛應(yīng)用于惡性腫瘤的治療有望成為抗腫瘤靶治療的新途徑。

PARP-1；膀胱癌；侵襲；轉(zhuǎn)移

膀胱癌是泌尿外科最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在臨床上發(fā)病具有逐年升高趨勢(shì)，膀胱癌死亡率較高，主要是由于早期患者多以為是普通的泌尿系感染未進(jìn)一步診治，因此部分患者發(fā)展到晚期才被確診。引起惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移機(jī)制較為復(fù)雜，近年來(lái)臨床上對(duì)惡性腫瘤的研究側(cè)重于基因方面，如能從相關(guān)基因方面找到治療靶點(diǎn)，則可能對(duì)早期干預(yù)及治療惡性腫瘤具有重要意義。臨床研究發(fā)現(xiàn)聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)是一種細(xì)胞核酶，與細(xì)胞增殖、NDA的重組及修復(fù)等均有密切關(guān)系[1]，臨床研究顯示PARP-1在多種惡性腫瘤組織中存在異常表達(dá)[2-4]。本研究對(duì)膀胱癌組織中的PARP-1表達(dá)進(jìn)行了研究，旨在探討PARP-1在膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用及可能機(jī)制。

1　資料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源收集2014年1月～12月我院手術(shù)切除的30例膀胱癌患者組織標(biāo)本30份，其中男17份、女13份，年齡43～85歲，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18份、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12份，病理分期Ⅰ～Ⅱ期9份、Ⅲ～Ⅳ期21份。以30份患者癌旁正常組織標(biāo)本為對(duì)照。本研究方案上報(bào)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書(shū)。

1.2方法免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)法(S-P法) 檢測(cè)PARP-1在膀胱癌及癌旁組織中的表達(dá)，將組織切片、脫蠟、脫水、阻斷、抗原修復(fù)、封閉后等處理，借助PARP-1一抗、生物素二抗、過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉素卵白素工作液為三抗，以DAB染色，觀察膀胱癌及癌旁正常組織中PARP-1的表達(dá)情況。

1.3判定標(biāo)準(zhǔn)染色細(xì)胞數(shù)量占視野內(nèi)細(xì)胞的百分比：無(wú)染色細(xì)胞0分，染色細(xì)胞數(shù)量占1%～4%、5%～19%、20%～39%、40%～59%、60%～79%、80%～100%時(shí)分別記為1分、2分、3分、4分、5分、6分；細(xì)胞染色情況及強(qiáng)度：無(wú)染色0分，染色為淺黃色為1分、棕黃色為2分、棕褐色為3分。染色細(xì)胞百分比評(píng)分乘以染色強(qiáng)度評(píng)分，總分在0～9分為陰性表達(dá)，10～18分為陽(yáng)性表達(dá)[4]。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，定性數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)及確切概率法。

2　結(jié)　果

2.1膀胱癌組織中與癌旁正常組織中PARP-1的表達(dá)見(jiàn)表1。膀胱癌組織中PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率為60.00%，癌旁正常組織PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率為6.67%，二者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=19.20，P<0.01)；膀胱癌組織中PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁正常組織。

表1　膀胱癌組織中與癌旁正常組織中PARP-1的表達(dá)　[份(%)]

2.2膀胱癌組織有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及不同臨床分期時(shí)PARP-1的表達(dá)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的18例患者組織中，PARP-1陽(yáng)性表達(dá)為15份(83.33%)，陰性表達(dá)為3份(16.67%)；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的12例患者組織中，PARP-1陽(yáng)性表達(dá)為3份(25.00%)，陰性表達(dá)為9份(75.00%)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。

臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期的21例患者組織中，PARP-1陽(yáng)性表達(dá)16份(76.19%)，陰性表達(dá)5份(23.81%)；臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期的9例患者組織中，PARP-1陽(yáng)性表達(dá)2份(22.22%)，陰性表達(dá)7份(77.78%)；臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期患者組織中PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率高于臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期的患者(P<0.05)。

3　討　論

PAPR是一種聚合酶，分為PAPR-1、PAPR-2、PAPR-3等亞型，其中PAPR-1在染色體1的q41-42區(qū)，主要生理功能是催化合成細(xì)胞內(nèi)的蛋白酶活化受體(PAR)，可影響目標(biāo)蛋白的功能、細(xì)胞效應(yīng)等。如DNA發(fā)生異常損傷，PAPR-1可通過(guò)調(diào)節(jié)DNA拓樸異構(gòu)酶等途徑保持及修復(fù)DNA的完整性。PAPR-1對(duì)基因表達(dá)及信號(hào)傳導(dǎo)也有影響，如調(diào)節(jié)DNA甲基化、引起染色體結(jié)構(gòu)改變等；對(duì)細(xì)胞存亡也有調(diào)節(jié)作用，在細(xì)胞損害嚴(yán)重時(shí)如抑制 PARP-1可為調(diào)亡細(xì)胞儲(chǔ)存能量,阻止細(xì)胞壞死阻止，讓其轉(zhuǎn)為凋亡而不是修復(fù)。

有研究報(bào)道顯示,PARP-1在肝癌、舌癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中表達(dá)均表現(xiàn)為上調(diào)[2-4]，并且與疾病病程的發(fā)展、侵襲力、血管再生能力等均有關(guān)，認(rèn)為是引起惡性腫瘤發(fā)生侵襲及轉(zhuǎn)移的主要影響因素。本研究對(duì)膀胱癌與癌旁正常組織中的PARP-1表達(dá)進(jìn)行了研究，嘗試探討其在膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及可能機(jī)制，結(jié)果顯示膀胱癌組織中PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率為60.00%，明顯高于癌旁正常組織陽(yáng)性表達(dá)率的6.67%，提示PARP-1表達(dá)上調(diào)與膀胱癌發(fā)生關(guān)系密切；膀胱癌組織有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率為83.33%明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織陽(yáng)性表達(dá)率的25.00%，臨床分期Ⅲ-Ⅳ期組織PARP-1陽(yáng)性表達(dá)率為76.19%明顯高于Ⅰ-Ⅱ期組織陽(yáng)性表達(dá)率的22.22%。提示，PARP-1是與膀胱癌的病情嚴(yán)重程度、侵襲力、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等有關(guān)，其具體機(jī)制有待后期加大樣本量進(jìn)一步研究。

綜上所述，PARP-1在膀胱癌組織中表達(dá)明顯上調(diào)，并且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期關(guān)系密切，提示可能參與了膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程。因此，將PAPR-1抑制劑廣泛應(yīng)用于惡性腫瘤的治療有望成為抗腫瘤靶治療的新途徑。

[1]田鳳艷,顧朝輝,劉玉峰,等.多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1 在乙醇致小鼠腦損傷中的表達(dá)及意義[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,2014,31(4):785-787.

[2]劉彭坤,郝吉慶.PARP-1,P-gp和LRP在肺腺癌中的表達(dá)和相關(guān)性研究[J].安徽醫(yī)藥,2014,18(5):851-854.

[3]李燕,尉蔚,呂樹(shù)卿,等.PARP-1 對(duì)卵巢癌血管生成的影響[J].山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2014,52(4):97-101.

[4]劉濤,文慶一,喬偉強(qiáng),等.PARP-1在乳腺癌組織中的表達(dá)和臨床意義[J].中國(guó)婦幼保健,2015,30(24):4220-4222.

(2016-01-19收稿2016-05-20修回)

(本文編輯劉喜元)

527200廣東省羅定市中醫(yī)院外二科

[中國(guó)圖書(shū)資料分類(lèi)號(hào)]R 737.14B

10.16485/j.issn.2095-7858.2016.03.047