林氏降脂方對高脂血癥大鼠腎臟的影響*

蘇奮翔，張艷霞，安方玉，李明淑，陳紹儀，舒　暢甘肅省中醫(yī)院白銀分院，甘肅 白銀 70900；甘肅中醫(yī)藥大學(xué)；白銀市第二人民醫(yī)院

林氏降脂方對高脂血癥大鼠腎臟的影響*

蘇奮翔1，張艷霞2，安方玉2，李明淑1，陳紹儀3，舒暢2
1甘肅省中醫(yī)院白銀分院，甘肅 白銀 730900；2甘肅中醫(yī)藥大學(xué)；3白銀市第二人民醫(yī)院

目的：觀察林氏降脂方對高脂血癥大鼠腎臟的影響。方法：將60只雄性SD大鼠，隨機(jī)分為正常對照組、模型組、脂脈康膠囊組、林氏降脂方高（1.2962 g/mL）、中（0.6481 g/mL）、低（0.3241 g/mL）劑量組，每組10只。正常對照組普通飼料喂養(yǎng)，其余各組高脂乳劑聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)建立高脂血癥模型并按實驗方案給藥，6周后，處死各組大鼠，分離血清，測總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）并取腎臟，稱重，計算腎臟指數(shù)后，切片，HE染色。結(jié)果：與正常組相比，模型組TC、TG、LDL-C均顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），HDL-C顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；脂脈康膠囊組HDL-C無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。與模型組相比較，脂脈康膠囊組及林氏降脂方高劑量組TC、TG、LDL均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），HDL-C明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。病理切片顯示，林氏降脂方能改善高脂血癥大鼠腎臟瘀血。結(jié)論：林氏降脂方可改善高脂血癥大鼠腎臟的病變。

高脂血癥；林氏降脂方；血脂；大鼠；腎臟

近年來，高脂血癥的發(fā)病率和并發(fā)癥逐年增多。脂質(zhì)代謝紊亂通常與肝臟、腎臟疾病相伴隨，是肝臟、腎臟損傷的病理機(jī)制之一?！傲质辖抵健笔歉拭C中醫(yī)藥大學(xué)林維啟教授的經(jīng)驗方，由草決明、生山楂、綠豆、杭菊組成，林氏降脂方湯劑治療高脂血癥，已有20余年，療效顯著，治療高脂血癥的有效率可達(dá)96.24%［1］。本研究通過高脂飲食建立實驗性高脂血癥大鼠模型，探討林氏降脂方對高脂血癥大鼠腎臟的影響，從而為其防治高脂血癥及其相關(guān)疾病提供實驗依據(jù)。

1　材料與方法

1.1實驗動物S P F級雄性S D大鼠60只，體質(zhì)量170～210 g，購自甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心，動物生產(chǎn)許可證號：S C X K（甘）2011-0001，使用許可證號：S Y X K（甘）2011-0001。

1.2藥物與試劑林氏降脂方組成藥物草決明、生山楂、綠豆、杭菊均由甘肅省中醫(yī)院白銀分院藥劑科提供，由甘肅省高校中（藏）藥化學(xué)與質(zhì)量研究省級重點(diǎn)實驗室按照林氏降脂方藥材比例制成生藥濃度為1.296 2、0.648 1、0.324 1 g/mL的藥液。脂脈康膠囊（長春新安藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：20120305），用前用蒸餾水配制成濃度為0.04g/mL的混懸液。1，2-丙二醇（煙臺市雙雙化工有限公司生產(chǎn)，批號：20130720），分析純。吐溫-80（煙臺市雙雙化工有限公司生產(chǎn)，批號：20130502），分析純。膽固醇（上海如吉生物科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)，批號：20130812），純度＞98.0%。甲基硫氧嘧啶（葵花藥業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)，批號：20130614）。豬膽鹽（上海如吉生物科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)，批號：20130608），含量＞98.0%。T C、TG、L D L-C、H D L-C、A S T及A L T檢測試劑盒（寧波瑞源生物科技有限公司生產(chǎn)，批號：20130627）。

1.3儀器全自動生化分析儀A L C Y O N 300（美國雅培公司提供）；高速離心機(jī)（美國H erae u s公司提供）；S P-2000型圖文報告分析系統(tǒng)、R-136型切片機(jī)、T C-120S型智能程控生物組織自動脫水機(jī)均由湖北泰維科技實業(yè)有限公司提供。

1.4方法

1.4.1大鼠分組及高脂血癥模型的制備60只雄性S D大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)7天，隨機(jī)分為正常對照組、高脂血癥模型組、脂脈康膠囊組、林氏降脂方高、中、低劑量組，每組10只。正常對照組普通飼料喂養(yǎng)，其余各組高脂飼料 （配方為：膽固醇1%，豬膽鹽0.3%，甲基硫氧嘧啶0.2%，蔗糖5%，豬油10.5%，蛋黃粉8%，基礎(chǔ)飼料75%）喂養(yǎng)，并且灌胃給予高脂乳劑（自制，參考倪鴻昌［2］等人方法），0.01mL/g，1次/3 d，連續(xù)6周，實驗結(jié)束，根據(jù)模型組大鼠血液學(xué)指標(biāo)判斷建模成功。

1.4.2給藥造模同時灌胃給藥，脂脈康膠囊組給予脂脈康膠囊（0.04 g/mL），林氏降脂方高、中、低劑量組分別給予林氏降脂方高（1.296 2 g/mL）、中（0.648 1 g/mL）、低（0.324 1 g/mL）劑量，按照0.01mL/g給藥，正常對照組和模型對照組灌胃給予同等容積蒸餾水，1次/d，連續(xù)6周。

1.4.3血清TC、TG、LDL-C、HDL-C測定末次給藥后禁食不禁水12小時，處死各組大鼠，戊巴比妥鈉麻醉，股動脈采血5 mL，分離血清，用全自動生化分析儀檢測血清中T C、TG、L D L-C、H D L-C、的含量。

1.4.4體質(zhì)量及臟器指數(shù)的測定在處死前測定大鼠的體質(zhì)量，股動脈取血致大鼠死亡，分離肝臟和腎臟，用生理鹽水洗凈，濾紙吸干，并稱重，計算臟器指數(shù)。

臟器指數(shù)（%）=臟器（g）/體質(zhì)量（g）×100%

1.4.5病理指標(biāo)檢測肝臟、腎臟稱重后，用4%的甲醛溶液固定，石蠟包埋，切片，H E染色，光鏡下觀察。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法用S P SS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料用（±s）表示，采用t檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1血清TC、TG、LDL-C、HDL-C與正常組相比，模型組、林氏降脂方低劑量組T C、TG、L D L-C均顯著升高（P＜0.05），H D L-C明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；脂脈康膠囊組、林氏降脂方中劑量組T C、TG、L D L-C均顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），H D L-C無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；林氏降脂方高劑量組T C、L D L-C顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），TG、H D L-C無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。與模型組比較，脂脈康膠囊組及林氏降脂方高劑量組T C、TG、L D L-C均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），H D L-C明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；林氏降脂中、低劑量組T C、TG均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），H D L-C明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），L D L-C降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1　林氏降脂方對高脂血癥大鼠血脂的影響（±s）

表1　林氏降脂方對高脂血癥大鼠血脂的影響（±s）

注：*表示與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；#表示與模型組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2大鼠肝臟、腎臟指數(shù)與正常對照組比較，模型組、林氏降脂方低劑量組肝臟指數(shù)顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組相比，林氏降脂方高劑量組、中劑量組及脂脈康膠囊組肝臟指數(shù)顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。各組之間腎臟指數(shù)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

2.3病理表現(xiàn)光鏡下觀察，模型組大鼠腎小球體積增大，系膜細(xì)胞增生，基質(zhì)增多，毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，局灶瘀血嚴(yán)重。林氏降脂方高、中劑量組，脂脈康膠囊組腎小球體積增大、系膜細(xì)胞增生、基質(zhì)增多等病理改變不同程度的減輕，僅有輕度瘀血或基本正常。見圖1。

表2　林氏降脂方對高脂血癥大鼠肝臟、腎臟指數(shù)的影響（±s）

表2　林氏降脂方對高脂血癥大鼠肝臟、腎臟指數(shù)的影響（±s）

注：*表示與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；#表示與模型組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

組別　只數(shù)　劑量/（g·mL-1）　肝臟指數(shù)　腎臟指數(shù)正常對照組　10　-　0.0269±0.0021　0.0032±0.0004模型組　10　-　0.0305±0.0006*　0.0031±0.0002脂脈康膠囊組　10　0.0400　0.0278±0.0010#　0.0031±0.0001林氏降脂方低劑量組　10　0.3241　0.0302±0.0010*　0.0032±0.0001林氏降脂方中劑量組　10　0.6481　0.0281±0.0009#　0.0031±0.0001林氏降脂方高劑量組　10　1.2962　0.0274±0.0009#　0.0031±0.0002

圖1　林氏降脂方對大鼠腎臟的影響

3　討論

高脂血癥是臨床常見?。?］，患者血液處于高凝及高黏狀態(tài)，使全身動脈粥樣硬化，從而導(dǎo)致冠心病、心梗、腦血栓的發(fā)生和發(fā)展［4-6］。高脂血癥狀態(tài)下，機(jī)體脂質(zhì)代謝紊亂，進(jìn)入肝臟代謝的脂質(zhì)和肝臟合成甘油三酯增加，當(dāng)超過肝細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)能力時，則會出現(xiàn)脂質(zhì)在肝臟內(nèi)的蓄積，導(dǎo)致肝損傷的發(fā)生［7-9］。

研究發(fā)現(xiàn)高脂血癥可作為獨(dú)立的致病因素參與腎臟疾病的發(fā)生和發(fā)展，使腎臟結(jié)構(gòu)發(fā)生進(jìn)行性改變，造成腎功能衰退［10］。高脂血癥引起腎臟損害的機(jī)制除與巨噬細(xì)胞的浸潤、泡沫細(xì)胞的形成有關(guān)外，還與細(xì)胞外基質(zhì)的沉積、腎實質(zhì)細(xì)胞凋亡有密切關(guān)系［11-12］。

祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為本病歸屬于“痰濕”“血瘀”范疇，屬本虛標(biāo)實之證。其病因為飲食不當(dāng)，或年高臟衰，或他疾引發(fā)，導(dǎo)致肝、脾、腎3臟失常或使脂質(zhì)不能正常運(yùn)轉(zhuǎn)或多余脂質(zhì)排泄不及，成為濁脂，阻于脈道，氣血運(yùn)行不暢，機(jī)體臟器失養(yǎng)。本病的中醫(yī)治療宜健脾化痰、清肝瀉火、活血化瘀、消食通腑?！傲质辖抵健敝猩介∑⑾郴觯饶芑湍伻夥e；草決明清肝瀉火；杭菊清肝瀉火明目。諸藥合用，清肝柔肝，健運(yùn)中焦，活血化瘀，消痰利濁?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為，草決明富含蒽醌類化合物大黃素和大黃酚，具有明顯降血脂作用，能抑制血清膽固醇的升高［13］；生山楂具有調(diào)節(jié)血脂、降低膽固醇、擴(kuò)張血管及降低血壓的作用［14-15］；綠豆中含有的植物甾醇結(jié)構(gòu)與膽固醇相似，植物甾醇與膽固醇競爭酯化酶，使之不能酯化而減少腸道對膽固醇的吸收，并可通過促進(jìn)膽固醇異化和/或在肝臟內(nèi)阻止膽固醇的生物合成等途徑使血清膽固醇含量降低［16］；杭菊具有降低膽固醇、甘油三酯的作用［17］。

本實驗通過喂養(yǎng)高脂飼料聯(lián)合灌胃給予高脂乳劑造成大鼠高脂血癥模型，高脂血癥大鼠T C、TG、L D L-C含量明顯升高，H D L-C含量明顯降低，高脂血癥模型成功建立。同時，高脂血癥模型大鼠腎組織腎小球體積增大，系膜細(xì)胞增生，基質(zhì)增多，毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，局灶瘀血嚴(yán)重，大鼠腎功能受到損傷。在造模的同時給林氏降脂方可明顯降低T C、L D L-C、A S T、A L T含量，升高H D L-C含量，說明林氏降脂方對高脂血癥大鼠有降脂作用，并且對脂質(zhì)代謝紊亂造成的腎瘀血有一定的改善作用，值得進(jìn)一步研究開發(fā)。

［1］ 蘇奮翔，秦建梅.林氏降脂散治療高血脂癥133例療效觀察［J］.西部中醫(yī)藥，2012，25（12）：69-70.

［2］ 倪鴻昌，李俊，金涌，等.大鼠實驗性高脂血癥和高脂血癥性脂肪肝模型研究［J］.中國藥理學(xué)通報，2004，20（6）：703-706.

［3］ 張?zhí)於穑惓?，李少華，等.人參對高脂血癥大鼠血脂及肝功能的影響［J］.時珍國醫(yī)國藥，2013，24（4）：865-867.

［4］ 萬程彬.高脂血癥與血液流變學(xué)檢測的相關(guān)性探討［J］.青島醫(yī)藥衛(wèi)生，2009，41（5）：337-338.

［5］ 雷宇春，李藝萍.高脂血癥患者血液流變學(xué)指標(biāo)分析［J］.人民軍醫(yī)，2007，50（5）：156-158.

［6］ 王敏，王炅，趙蜀瓊.老年高脂血癥患者血液流變學(xué)指標(biāo)的改變［J］.中國血液流變學(xué)雜志，2000，10（3）：156-158.

［7］ WesterbackaJ，LammiK，HakkinenAM，etal.Dietary fat content modi f ies liver fat in overweight nondiabetic subjects［J］.J Clin Endocrinol Metab，2005，90（5）：2804.

［8］ Ti lg H，Moschen AR.Insul in resistance，inf lammation，andnon-alcoholicfat tyl iverdisease［J］.Trends Endocrinol Metab，2008，19（10）：371-377.

［9］ Cong WN，Tao RY，Tian JY，et al.The establishment of a novel non-alcohol ic steatohepatitis model accompanied with obesity and insul in resistance in mice ［J］.Li fe Sci，2008，82（19）：983-990.

［10］彭蘭，范能全，杜曉剛.高脂血癥大鼠腎臟Angpt l4變化及辛伐他汀的保護(hù)作用［J］.重慶師范大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2014，31（3）：88-92.

［11］劉紅燕，賈汝漢，丁國華，等.細(xì)胞凋亡在脂質(zhì)腎損害中的作用［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2001，2（4）：196-199.

［12］常曉東，甘華，杜曉剛，等.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在高脂血癥引起腎臟損害中的作用［J］.西安交通大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2010，26（1）：79-83.

［13］唐瑛，唐忠志，楊李，等.消脂飲對大鼠實驗性高脂血癥防治作用的研究［J］.華南國防醫(yī)學(xué)雜志，2004，18（1）：13-16.

［14］沈映君.中藥藥理學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：661-674.

［15］劉文全，商紅葉.辨證與辨病結(jié)合治療非酒精性單純性脂肪肝133例療效觀察［J］.新中醫(yī)，2005，37（9）：43-44.

［16］文鏡，樊蓉.植物甾醇和植物甾烷醇降膽固醇的功效和安全性［J］.食品科學(xué)，2005，26（8）：437-442.

［17］孫勇莉.降脂湯治療高脂血癥52例臨床研究［J］.河南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2003，18（4）：47-48.

Effectsof LinShiJiangZhi Prescription on the K idney of the Ratsw ith Hyperlipoidem ia

SU Fenxiang1，ZHANG Yanxia2，AN Fangyu2，LIMingshu1，CHEN Shaoyi3，SHU Chang2
1 Baiyin Branch of Gansu Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine，Baiyin 730090，China；2 Gansu University of Traditional Chinese Medicine；3 The Second People′s Hospital of Baiyin City

Objective：To observe the influence of LinShiJiangZhi prescription on the kidney of the ratsw ith hyperlipoidemia.Methods：Sixty rats were random ized into normal control group，themodel group，ZhiMaiKang capsulesgroup，high（1.2962 g/mL），moderate（0.6481 g/m L）and low（0.3241 g/m L）dosesgroupsof LinShiJiangZhi prescription random ly，ten rats each group.The rats in normal control group were fed w ith ordinary fodder，other groupswere fed w ith high fatemulsion combined w ith high fat fodder to establish themodelw ith hyperlipoidem ia，they weremedicated according to experimentalplan and sacrificed in six weeks，the levels of total cholesterol（TC），triglyceride（TG），low density lipoprotein-cholesterol（LDL-C）and high density lipoprotein-cholesterol（HDL-C）were detected after the serum was separated，the kidney was taken outand weighed to calculate kidney index，and sliced after HE staining.Results：Compared w ith the controlgroup，the levelsof TC，TG，LDL-C of themodelgroup raised evidently（P＜0.05），the levelsof HDL-C decreased clearly，and thedifferencehad statisticalmeaning（P＜0.05）；TG and HDL-C changed indistinctly in ZhiMaiKang capsules group，and the difference had no statisticalmeaning （P＞0.05）.Compared w ith themodel group，the levels of TC，TG and LDL in ZhiMaiKang capsulesgroup and high dosesgroupof LinShiJiangZhi prescriptiondecreasedobviously（P＜0.05），HDL-C raised obviously，and the difference showed statisticalmeaning（P＜0.05）.The results of pathological slices showed that LinShiJiangZhi prescription could improve blood stasis in the kidney of the ratsw ith hyperlipoidemia.Conclusion：LinShiJiangZhi prescription could improve renalpathology of the ratsw ith hyperlipoidem ia.

hyperlipoidem ia；LinShiJiangZhi prescription；blood lipid；rats；the kidney

R285.5

A

1004-6852（2016）04-0022-04

2015-12-27

甘肅省中醫(yī)藥管理局科研項目（編號GZK-2013-70）。

蘇奮翔（1963—），男，副主任醫(yī)師。研究方向：脾胃病的臨床診治。