卵巢癌中Metadherin蛋白表達(dá)的臨床病理意義

朱小暉，張申華

?

·臨床醫(yī)學(xué)·

卵巢癌中Metadherin蛋白表達(dá)的臨床病理意義

朱小暉，張申華

目的：探討Metadherin蛋白(MTDH)在卵巢癌組織中的表達(dá)情況及臨床意義。方法：選取56例卵巢癌患者，免疫組織化學(xué)法檢測(cè)卵巢癌組織中MTDH表達(dá)，并結(jié)合MTDH表達(dá)情況分析臨床病理數(shù)據(jù)。結(jié)果：56例卵巢癌MTDH表達(dá)陽性率為53.6%(30/56)。卵巢癌腫瘤分期Ⅲ/Ⅳ期患者M(jìn)TDH表達(dá)陽性率明顯高于Ⅰ/Ⅱ期患者(P<0.01)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者M(jìn)TDH表達(dá)陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)，但在患者不同年齡、腫瘤組織學(xué)類型及分級(jí)和有無腹水間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論：卵巢癌中存在MTDH高表達(dá)，其可能在腫瘤生長(zhǎng)和發(fā)展過程中發(fā)揮作用，對(duì)患者治療及預(yù)后具有一定價(jià)值。

卵巢腫瘤；MTDH蛋白；腫瘤分期；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

卵巢癌是婦科死亡率最高的惡性腫瘤，具有發(fā)病隱匿、進(jìn)展迅速的特征。盡管早期卵巢癌患者5年生存率可達(dá)90%，但臨床上大多數(shù)患者確診時(shí)腫瘤已經(jīng)擴(kuò)散或轉(zhuǎn)移，僅25%的卵巢癌診斷時(shí)病變局限，目前5年生存率僅在12%～30%[1]。研究[2-3]發(fā)現(xiàn)，一些蛋白在惡性卵巢癌預(yù)后判斷中具有一定價(jià)值，如糖類抗原125在監(jiān)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)和預(yù)后中具有一定價(jià)值[3]，但卵巢癌發(fā)生、發(fā)展與眾多基因突變有關(guān)，發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，尋找新的有效的卵巢癌臨床治療靶點(diǎn)仍具有重要的意義。近年研究[4]發(fā)現(xiàn)，Metadherin蛋白(MTDH)高表達(dá)于乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、腦膠質(zhì)瘤等多種惡性腫瘤中，且與不良預(yù)后密切相關(guān)。我們通過免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)卵巢癌組織中MTDH表達(dá)情況，探討MTDH作為卵巢癌預(yù)后影響因子的可能性，現(xiàn)作報(bào)道。

1　材料與方法

1．1一般資料選取2012-2013年我院行手術(shù)治療的卵巢癌患者56例，年齡23～76歲，均經(jīng)術(shù)后病理學(xué)確診，術(shù)前未行放療、化療及藥物治療，且為單一婦科惡性腫瘤。按國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟2009年標(biāo)準(zhǔn)分為:Ⅰ期16例，Ⅱ期9例，Ⅲ期21例，Ⅳ期10例；按照世界衛(wèi)生組織1997年組織學(xué)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):Ⅰ級(jí)21例，Ⅱ級(jí)7例，Ⅲ級(jí)9例，Ⅳ級(jí)19例；有淋巴轉(zhuǎn)移30例，無淋巴轉(zhuǎn)移26例；有腹水25例，無腹水31例。所有手術(shù)切除標(biāo)本用10%甲醛固定，石蠟包埋切片，HE染色明確病理診斷。標(biāo)本取得均獲患者簽字同意。

1．2方法MTDH單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Abcam公司(ab124789)，二氨基聯(lián)苯胺試劑購(gòu)自武漢博士德生物有限公司(AR1000)，免疫組織化學(xué)試劑盒購(gòu)自中杉金橋有限公司(SP-9001)。SP染色方法檢測(cè)卵巢癌組織中MTDH表達(dá)情況，石蠟包埋切片，厚度4 μm，二甲苯脫蠟，100%、95%、85%梯度乙醇入水，抗原修復(fù)采用98 ℃ 0.1%枸櫞酸鈉溶液浸泡15 min，封閉用正常山羊血清工作液孵育15 min，MTDH兔抗人單克隆抗體(1∶100)4 ℃過夜，PBS洗3遍，生物素化二抗37 ℃孵育15 min，滴加辣根酶標(biāo)記的鏈霉卵白素工作液37 ℃孵育15 min，二氨基聯(lián)苯胺顯色，蘇木素復(fù)染1 min，60 ℃烤片2 h，脫水，透明，中性樹膠封片。

結(jié)合染色強(qiáng)度和染色百分比評(píng)估染色結(jié)果[5]。染色強(qiáng)度0～3分：0分為陰性，1分為弱，2分為中等染色，3分為強(qiáng)染色。染色百分比0%～20%為0分，21%～40%為1分，41%～60%為2分，61%～80%為3分，81%～100%為4分。最終評(píng)分結(jié)果為染色強(qiáng)度和染色百分比評(píng)分乘積，可分為低表達(dá)(0～6分)和高表達(dá)(7～12分)。

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用χ2檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

2.1卵巢癌組織中MTDH表達(dá)情況免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，卵巢癌組織中MTDH主要在細(xì)胞質(zhì)表達(dá)，呈團(tuán)狀、片塊狀(見圖1、2)，本組卵巢癌組織中MTDH陽性表達(dá)率為53.6% (30/56)。

2.2卵巢癌患者不同病理特征間MTDH表達(dá)陽性率比較患者不同年齡、組織學(xué)分級(jí)、組織學(xué)類型和腹水情況間MTDH表達(dá)陽性率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。而腫瘤分期Ⅰ/Ⅱ期患者M(jìn)TDH陽性表達(dá)率為36.0%，Ⅲ/Ⅳ期陽性表達(dá)率為67.7%；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性表達(dá)率為38.5%，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性表達(dá)率為66.7%。腫瘤分期Ⅲ/Ⅳ期患者M(jìn)TDH陽性表達(dá)率明顯高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.01)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者M(jìn)TDH陽性表達(dá)率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)(見表1)。

表1卵巢癌患者不同臨床病理特征間MTDH蛋白表達(dá)陽性率比較[n;百分率(%)]

3　討論

卵巢癌是女性生殖器官三大惡性腫瘤之一，以45歲以上為發(fā)病高峰，預(yù)后較差。研究者[6-7]認(rèn)為超過90%卵巢癌由卵巢上皮癌變產(chǎn)生。臨床癥狀包括腹部腫塊、腰痛和一系列非特異性癥狀，如不正常的陰道出血或不自主體質(zhì)量減輕等[8]。卵巢癌目前缺乏有效的治療手段，化療失敗率高達(dá)30%～40%[9]。

MTDH基因位于8號(hào)染色體長(zhǎng)臂2區(qū)2帶(8q22)，含有12個(gè)外顯子和11個(gè)內(nèi)含子，編碼約64 kDa的蛋白，其主要定位于胞質(zhì)，在胞膜和胞核中也有表達(dá)[10]。近年研究[11]發(fā)現(xiàn)，MTDH可通過參與AKT、NF-κB、Wnt/β-catenin信號(hào)通路，增加AKT及GSK3β磷酸化，穩(wěn)定c-Myc，并促進(jìn)MDM2磷酸化，從而抑制p53、p21表達(dá)，促進(jìn)BAD磷酸化，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。其高表達(dá)于乳腺癌、肝癌、骨肉瘤、舌癌等幾乎全身所有系統(tǒng)的惡性腫瘤中，與患者腫瘤分期、組織分級(jí)、轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)和預(yù)后生存等臨床病理特點(diǎn)密切相關(guān)。本研究檢測(cè)MTDH在卵巢癌組織中的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)MTDH在卵巢癌中陽性表達(dá)率達(dá)59.3%。

侵襲、轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤進(jìn)展的重要特征，并且直接導(dǎo)致患者死亡，與腫瘤患者短暫的生存期密切相關(guān)[12]。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換(EMT)指細(xì)胞表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)換，在胚胎發(fā)育、組織塑形及傷口愈合等生理過程中發(fā)揮重要作用。晚期腫瘤伴隨明顯的轉(zhuǎn)移特征，發(fā)生EMT的腫瘤更容易浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致患者病情進(jìn)展迅速。有研究[13]報(bào)道，非小細(xì)胞肺癌中MTDH與EMT密切相關(guān),而基因敲除MTDH可逆轉(zhuǎn)EMT，發(fā)揮抑制腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移的作用[14]。本研究結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的卵巢癌患者M(jìn)TDH表達(dá)陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)，提示卵巢癌中MTDH表達(dá)增高可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定相關(guān)性，可能與患者更易出現(xiàn)轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后有關(guān)。此外，腫瘤分期Ⅲ/Ⅳ期的卵巢癌患者M(jìn)TDH陽性表達(dá)率明顯高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.01)，而在不同患者年齡、腫瘤組織學(xué)類型及分級(jí)和有無腹水間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

綜上，MTDH在卵巢癌中存在高表達(dá)，MTDH表達(dá)與患者腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定相關(guān)性，可能是患者不良的預(yù)后指標(biāo)，但MTDH在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展過程中的具體作用機(jī)制，有待進(jìn)一步探討。

[1]CHU MM,FISHMAN D.Risk assessment for epithelial ovarian cancer:proposing a new approach to a deadly problem[J].Scand J Clin Lab Invest Suppl,2014,244:63.

[2]DAUDI S,ENG KH,MHAWECH-FAUCEGLIA P,etal.Expression and immune responses to MAGE antigens predict survival in epithelial ovarian cancer[J].Plos One,2014,9(8):e104099.

[3]MOORE RG,MACLAUGHLAN S.Current clinical use of biomarkers for epithelial ovarian cancer[J].Curr Opin Oncol,2010,22(5):492.

[4]HU G,WEI Y,KANG Y.The multifaceted role of MTDH/AEG-1 in cancer progression[J].Clin Cancer Res,2009,15(18):5615.

[5]AHN S,HYEON J,PARK CK.Metadherin is a prognostic predictor of hepatocellular carcinoma after curative hepatectomy[J].Gut Liver,2013,7(2):206.

[6]ZIMMERMANN AK,IMIG J,KLAR A,etal.Expression of MAGE-C1/CT7 and selected cancer/testis antigens in ovarian borderline tumours and primary and recurrent ovarian carcinomas[J].Virchows Arch,2013,462(5):565.

[7]郭蘇陽，趙燕，李勝澤.缺氧相關(guān)蛋白碳酸酐酶-Ⅸ在上皮性卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義[J].蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，39(4)：442.

[8]周立蓉，劉敏，梁瓊?cè)A，等.Clusterin與卵巢癌相關(guān)病理因素的相關(guān)性及預(yù)后分析[J].中國(guó)婦幼保健，2014，29(13)：2089.

[9]HASSAN MK,WATARI H，HAN Y,etal.Clusterin is a potential molecular predictor for ovarian cancer patient′s survival:targeting Clusterin improves response to paclitaxel [J].J Exp Clin Res,2011,30:113.

[10]THIRKERRLE HJ,GIRLING J,WARREN AY,etal.LYRIC/AEG-1 is targeted to different subcellular compartments by ubiquitinylation and intrinsic nuclear localization signals[J].Clin Cancer Res,2009,15(9):3003.

[11]LEE SG,SU ZZ,EMDAD L,etal.Astrocyte elevated gene-1 activates cell survival pathways through PI3K-Akt signaling[J].Oncogene,2008,27(8):1114.

[12]VAN ZIJL F,ZULEHNER G,PETZ M,etal.Epithelial-mesenchymal transition in hepatocellular carcinoma[J].Future Oncol,2009,5:1169.

[13]ZHENG J,LI C,WU X,etal.Astrocyte elevated gene-1 is a novel biomarker of epithelial-mesenchymal transition and progression of hepatocellular carcinoma in two China regions[J].Tumor Biol,2014,35(3):2265.

[14]LIU K,GUO L,MIAO L,etal.Ursolic acid inhibits epithelial-mesenchymal transition by suppressing the expression of astrocyte-elevated gene-1 in human nonsmall cell lung cancer A549 cells[J].Anticancer Drugs,2013,24(5):494.

(本文編輯盧玉清)

The clinical significance of metadherin expression in ovarian cancer

ZHU Xiao-hui,ZHANG Shen-hua

(DepartmentofObstetricsandGynecology,TheFirstPeople′sHospitalofTianmenCity,TianmenHubei431700,China)

Objective:To explore the clinical significance of metadherin(MTDH) expression in ovarian cancer.Methods:The MTDH expression in 56 patients with ovarian cancer were detected using immunohistochemistry,the related pathological data was analyzed.Results:The expression positive rate of MTDH in 56 patients was 53.6%(30/56).The expression positive rate of MTDH in stage Ⅲ/Ⅳ patients was significantly higher than that in stage Ⅰ/Ⅱ patients(P<0.01),the expression positive rate of MTDH in patients with lymph node metastasis was significantly higher than that in patients without lymph node metastasis(P<0.05),and the differences of MTDH expression in different age,tumor histology,staging and ascites were not statistically significant(P>0.05).Conclusions:The MTDH expression in ovarian cancer is high,which may play an important role in growth and development of tumor,and can guide the treatment and predict prognosis.

ovarian neoplasms;metadherin；lymphatic metastasis

2014-12-01

單位] 湖北省天門市第一人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科，431700

[作者簡(jiǎn)介] 朱小暉(1981-)，男，主治醫(yī)師.

張申華，副主任醫(yī)師.E-mail：36860613@qq.com

1000-2200(2016)05-0583-03

R 711.75

A

10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.05.008