RhoA與胃癌的相關(guān)研究進(jìn)展

石會(huì)勇　甄亞男　王斌　霍守俊　徐忠法

【摘要】 胃癌是我國(guó)高發(fā)的惡性腫瘤之一， 占全世界發(fā)病患者的40%左右， 年發(fā)病在20/10萬(wàn)。目前就診的胃癌患者大部分為中晚期， 占70%以上， 5年生存率在10%左右， 患者死亡的主要原因?yàn)榻?rùn)及轉(zhuǎn)移。對(duì)于晚期胃癌， 目前主要應(yīng)用化療結(jié)合生物靶向治療等手段。但胃癌對(duì)于化療存在多藥耐藥， 使得針對(duì)胃癌的治療存在困難， 缺乏有效的治療手段。針對(duì)胃癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移及多藥耐藥的相關(guān)分子機(jī)制目前仍不甚明確。本文對(duì)RhoA與胃癌的相關(guān)研究進(jìn)展展開(kāi)一綜述。

【關(guān)鍵詞】 RhoA；胃癌；多藥耐藥

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.22.202

RhoA為Ras GTP酶超家族的成員之一， 通過(guò)其分子開(kāi)關(guān)作用， 參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、粘附及細(xì)胞骨架重排， 是下游基因調(diào)節(jié)信號(hào)通路的重要組分， 在胃癌細(xì)胞的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及多藥耐藥機(jī)制中發(fā)揮了重要作用。

1 RhoA的結(jié)構(gòu)和功能

1. 1 RhoA的結(jié)構(gòu) RhoA是Ras超家族小GTP酶組分之一， 分子量21～25 kDa。以GTP結(jié)合的活性形式及GDP結(jié)合的失活形式存在， 起到細(xì)胞進(jìn)程中轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的分子開(kāi)關(guān)作用。

1. 2 RhoA的功能 RhoA在人類癌癥中常過(guò)表達(dá)[1]。鳥(niǎo)嘌呤核苷交換因子（GEFs）促進(jìn)GDP結(jié)合狀態(tài)轉(zhuǎn)換為GTP結(jié)合狀態(tài)， 而GTP酶激活蛋白（GAPs）強(qiáng)化內(nèi)在的GTP酶活性， 從而使其失活。其靜息時(shí)， 與GDP結(jié)合滯留于胞質(zhì)中， 呈無(wú)活性狀態(tài)。當(dāng)受到細(xì)胞外刺激時(shí)， GDP轉(zhuǎn)變?yōu)镚TP， RhoA獲得活性， 轉(zhuǎn)位到細(xì)胞膜上， 從而發(fā)揮細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。RhoA活性及失活狀態(tài)可被GDP/GTP交換蛋白或GTP酶活化蛋白調(diào)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)RhoA活性增強(qiáng)可明顯促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)， 這可能跟CyclinD1的表達(dá)因RhoA的過(guò)度激活而被促進(jìn)有關(guān)， 提示胃癌的發(fā)生、發(fā)展與可能與RhoA過(guò)度激活有關(guān)[2]。

2 RhoA與胃癌

2. 1 RhoA與胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移 胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的多步驟過(guò)程， 主要包括細(xì)胞粘附、基質(zhì)降解及遠(yuǎn)處侵襲3個(gè)環(huán)節(jié)。在胃癌組織中， RhoA的表達(dá)據(jù)報(bào)道與腫瘤發(fā)生、發(fā)展和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。RhoA在腫瘤形成過(guò)程中是過(guò)表達(dá)的， 有報(bào)道稱RhoA與胃癌的增殖及浸潤(rùn)有關(guān)[3]。

RhoA活化后作用于下游效應(yīng)蛋白R(shí)ho相關(guān)激酶（Rho associated kinase， ROCK）或mDia， 進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架重組， 使腫瘤發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。此外， 活化的RhoA通過(guò)級(jí)聯(lián)反應(yīng)激活MMP-2、cyclin D1、E-cadherin、uPAR等因子， 這些因子的活化與腫瘤細(xì)胞凋亡、增殖、粘附密切相關(guān)。研究顯示RhoA在胃癌中的表達(dá)明顯高于癌旁和正常胃黏膜， 并且其表達(dá)僅與胃癌患者的浸潤(rùn)深度有關(guān)[4]。Xu等[5]的研究顯示W(wǎng)nt5a可以通過(guò)PI3K/GSK3β/RhoA信號(hào)通路促進(jìn)胃癌細(xì)胞的遷移。在胃癌標(biāo)本TNM分期研究中， RHOA高表達(dá)者五年生存率為28%， 低表達(dá)者為62%。RhoA表達(dá)與胃癌分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)類型顯著相關(guān)。近年認(rèn)為轉(zhuǎn)錄因子NF-KB和AP21的轉(zhuǎn)錄水平因RhoA的激活被促進(jìn)， RhoA的激活還可以調(diào)節(jié)增強(qiáng)p27， p21， cyclinD1的活性， 導(dǎo)致細(xì)胞的增殖[6]。研究發(fā)現(xiàn)RhoA活性增強(qiáng)導(dǎo)致的p27， p21， cyclinD1的活性的增強(qiáng)可明顯促進(jìn)胃癌細(xì)胞SGC7901細(xì)胞生長(zhǎng)。腫瘤細(xì)胞的一個(gè)重要特點(diǎn)是細(xì)胞周期異常。研究發(fā)現(xiàn)胃癌細(xì)胞進(jìn)入S期比例可因正顯性突變V14RhoA蛋白的表達(dá)明顯增大。

2. 2 RhoA與胃癌化療的多藥耐藥 化療耐藥是胃癌化療效果的主要障礙， 對(duì)于是否RhoA的表達(dá)影響了胃癌細(xì)胞對(duì)化療的反應(yīng)值得研究。樊代明領(lǐng)銜的項(xiàng)目組對(duì)胃癌細(xì)胞MDR的分子機(jī)制進(jìn)行了長(zhǎng)期研究， 首次報(bào)道了RhoA參與胃癌MDR的調(diào)控。王旭青等[8]研究發(fā)現(xiàn)胃癌細(xì)胞SGC7901生長(zhǎng)可明顯因RhoA活性增強(qiáng)而得到促進(jìn)。引人注意的是：與對(duì)照細(xì)胞相比， 轉(zhuǎn)染V14RhoA的細(xì)胞可降低胃癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性， 這一點(diǎn)提示不僅胃癌的發(fā)生有RhoA參與， 還可能參與胃癌多藥耐藥機(jī)制調(diào)控也有RhoA參與， 但需進(jìn)一步研究其作用機(jī)理， 作者的研究顯示RhoA在胃癌細(xì)胞中的過(guò)表達(dá)導(dǎo)致了其對(duì)泰素及長(zhǎng)春新堿的耐藥， 從而與不良預(yù)后有關(guān)。

RhoA調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的確切機(jī)制還不清楚， 但其耐藥性針對(duì)化療藥物種類的不同而不同。為鑒定RhoA引起化療耐藥的確切靶點(diǎn)， 對(duì)于親本及RhoA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞提取RNA進(jìn)行cDNA微陣列分析。鑒定了許多轉(zhuǎn)錄的改變， 大部分與化療耐藥無(wú)明顯相關(guān)。但是， 抗氧化相關(guān)蛋白及NF-KB信號(hào)通路被認(rèn)識(shí)。特別是超氧化物歧化酶基因的表達(dá)與RhoA表達(dá)相關(guān)。該研究顯示：RhoA表達(dá)受到干擾后不僅Bcl2家族分子被抑制， 并且激活了凋亡誘導(dǎo)因子及大量的caspase家族分子， 這表明腫瘤凋亡的趨勢(shì)可因胃癌細(xì)胞RhoA表受抑制明顯增強(qiáng)。也有研究顯示轉(zhuǎn)染顯性活性RhoA突變體的NIH3T3細(xì)胞， 或者過(guò)表達(dá)RhoA蛋白在血清饑餓條件下與對(duì)照組細(xì)胞相比， 細(xì)胞凋亡增加， 這也說(shuō)明在腫瘤的凋亡調(diào)控機(jī)制中RhoA起著不可忽視的作用[8]。

抑癌基因是通過(guò)基因編碼的蛋白特異性使細(xì)胞接受負(fù)增長(zhǎng)信號(hào)， 最總導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)、增值受到抑制的基因。細(xì)胞會(huì)因?yàn)橐职┗笔Щ蛘咭蚴セ钚远掷m(xù)生長(zhǎng)， 最后轉(zhuǎn)化成惡性細(xì)胞。部分抑癌基因可因RhoA的表達(dá)被抑制后表達(dá)明顯上調(diào)， 因此抑制RhoA的表達(dá)可以成為分子靶向治療腫瘤的新的可能， 并未其提供指導(dǎo)[9]。

EGFR是erbB家族的一員， 配體包括EGF及TGFα等。細(xì)胞的凋亡、增值及血管生成等是通過(guò)配體與受體結(jié)合后下游一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被激活實(shí)現(xiàn)的。EGFR異常表達(dá)或者高表達(dá)存在于很多腫瘤中。有研究表明[10]， EGFR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與腫瘤的耐藥有關(guān)。近期的一項(xiàng)研究結(jié)果提示：在胃癌患者中， 與癌旁組織相比EGFR的表達(dá)顯著升高。EGFR表達(dá)水平與其他臨床病理參數(shù)無(wú)關(guān)卻與胃癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)。胃癌患者因EGFR陽(yáng)性生存時(shí)間短， 預(yù)后差。因此EGFR表達(dá)在預(yù)示胃癌的轉(zhuǎn)移、預(yù)后好壞中發(fā)揮舉足輕重的作用。早期EGFR分子靶向治療EGFR陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性的患者很有可能非常有效。該項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)EGFR與TopoⅡ表達(dá)相關(guān)。

綜上所述， RhoA作為信號(hào)開(kāi)關(guān)， 在胃癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移中起重要的作用。同時(shí)， 近期的研究表明RhoA表達(dá)與胃癌的多藥耐藥相關(guān)。對(duì)于RhoA的進(jìn)一步研究， 探討其能否作為胃癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移及多藥耐藥的預(yù)測(cè)指標(biāo)， 針對(duì)RhoA的靶向治療能否改善胃癌的多藥耐藥值得進(jìn)一步研究。

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[收稿日期：2016-03-21]