地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠生長(zhǎng)性能、血清與肝臟抗氧化及免疫指標(biāo)的影響

李　洋　林　聰　許文斌　張幸怡　王一臻　高　紅　竇秀靜　郝小燕　張永根

(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱150030)

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地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠生長(zhǎng)性能、血清與肝臟抗氧化及免疫指標(biāo)的影響

李洋林聰許文斌張幸怡王一臻高紅竇秀靜郝小燕張永根*

(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱150030)

本試驗(yàn)旨在研究地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠生長(zhǎng)性能、血清與肝臟抗氧化以及免疫指標(biāo)的影響。選用體重相近的SD大鼠40只，隨機(jī)分成5組，每組8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只大鼠。5組分別是對(duì)照組和4個(gè)不同地頂孢霉培養(yǎng)物劑量組(10、50、250和1 250 mg/kg BW組)，連續(xù)灌胃21 d。結(jié)果表明：地頂孢霉培養(yǎng)物極顯著提高大鼠的平均日增重(P<0.01)；提高了大鼠肝臟指數(shù)、胸腺指數(shù)；提高了大鼠血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)和葡萄糖(GLU)含量，降低了谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活力和低密度脂蛋白(LDL)含量；提高了血清和肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力和總抗氧化能力(T-AOC)，降低丙二醛(MDA)含量，同時(shí)提高了肝臟中的總超氧化物歧化酶(T-SOD)含量；提高了血清免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和免疫球蛋白M含量，同時(shí)提高血清和肝臟中白介素-4(IL-4)含量，降低白介素-1β(IL-1β)和白介素-17(IL-17)含量。綜合各項(xiàng)指標(biāo)，地頂孢霉培養(yǎng)物能夠提高SD大鼠平均日增重，改善血清生化指標(biāo)，提高大鼠機(jī)體抗氧化能力和免疫能力，其中以250 mg/kg BW的添加量為最佳。

地頂孢霉培養(yǎng)物；SD大鼠；生長(zhǎng)性能；抗氧化；免疫

古尼蟲草是我國(guó)稀有的蟲草類藥材，含有同冬蟲夏草相似的藥理成分，具有提高睡眠、調(diào)節(jié)免疫、提高記憶力、鎮(zhèn)靜和止痛等作用[1-2]。古尼蟲草中存在很多重要的次級(jí)代謝產(chǎn)物，如蟲草酸、蟲草素、蟲草多糖和抗紫外線成分等[3]。古尼蟲草具有優(yōu)秀的藥理功能，但是昂貴的價(jià)格限制了其在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用和發(fā)展。因此，替代古尼蟲草的人工培養(yǎng)物應(yīng)運(yùn)而生。地頂孢霉培養(yǎng)物是由從古尼蟲草分離的地頂孢霉菌經(jīng)人工發(fā)酵而得到的產(chǎn)品，擁有蟲草素、蟲草酸、多糖、甾醇和氨基酸等與古尼蟲草相似的功能性成分。如果能夠合理地將地頂孢霉培養(yǎng)物應(yīng)用到動(dòng)物生產(chǎn)中，使其活性成分或作用轉(zhuǎn)移到肉蛋奶等家畜產(chǎn)品上，將具有重大的意義。

前人已經(jīng)證明添加地頂孢霉培養(yǎng)物能夠提高仔豬增重[4]，提高蛋鴨的體重和產(chǎn)蛋率，改善蛋品質(zhì)[5]。同時(shí)，地頂孢霉菌絲體能夠顯著提高肝纖維化大鼠的免疫能力[6]，頂孢霉發(fā)酵液提取物具有優(yōu)于維生素E的自由基清除能力[7]。另外，許多研究也發(fā)現(xiàn)地頂孢霉培養(yǎng)物所含有的功能性成分能夠提高白蝦的生產(chǎn)性能和免疫能力[8]。具有相似功能性成分的蟲草類產(chǎn)品也能夠改善小鼠的抗氧化能力和免疫能力[9]。以上研究已經(jīng)證明，地頂孢霉培養(yǎng)物在改善動(dòng)物免疫機(jī)能方面具有很大的潛力。但是目前，對(duì)于地頂孢霉培養(yǎng)物的研究只局限于對(duì)家畜生產(chǎn)性能的改善和抗體免疫效價(jià)的提高上，缺乏對(duì)動(dòng)物以及抗氧化和免疫能力的綜合研究。因此，本試驗(yàn)旨在系統(tǒng)地研究地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠生長(zhǎng)性能、血清與肝臟抗氧化和免疫指標(biāo)的影響，為地頂孢霉培養(yǎng)物在未來的生產(chǎn)應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支持。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物與材料

共選擇40只7周齡、體重160 g左右的雄性清潔級(jí)SD大鼠。大鼠和鼠糧均購(gòu)自吉林大學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物中心。每籠4只鼠，自由采食，飲水。每天維持12 h光照，溫度(25±0.5) ℃，相對(duì)濕度(55±5)%。

地頂孢霉培養(yǎng)物(Acremoniumterricolaculture，ATC)來自合肥邁可羅生物工程有限公司，是由古尼蟲草中提取的地頂孢霉菌經(jīng)人工發(fā)酵得到的滅活的蟲草類真菌飼料添加劑，含有26.84%粗蛋白質(zhì)，5.00%粗纖維，3.06%粗脂肪，4.04%粗灰分和61.06%無氮浸出物(干物質(zhì)基礎(chǔ))。其中功能性成分含量分別是：蟲草酸84.50 g/kg，蟲草多糖44.60 g/kg，蟲草素0.432 g/kg，甾醇0.597 g/kg，總氨基酸218.1 g/kg。

1.2試驗(yàn)分組

7周齡的SD大鼠分為5組，每組8只，每只大鼠作為1個(gè)重復(fù)。5組分別為對(duì)照組，地頂孢霉培養(yǎng)物10 mg/kg BW組、50 mg/kg BW組、250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組。地頂孢霉培養(yǎng)物連續(xù)灌胃21 d，對(duì)照組灌胃生理鹽水。

1.3樣品采集和處理

灌胃結(jié)束后，禁食24 h，稱重記錄，計(jì)算平均日增重。摘眼球采血后立刻頸椎脫臼處死，采集心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胸腺、胃和睪丸，并稱重，計(jì)算臟器指數(shù)，公式為：

臟器指數(shù)(%)=(臟器重/體重)×100。

采用意大利Fully全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定以下血清生化指標(biāo)：總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、膽固醇(CHOL)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、尿素氮(UN)和葡萄糖(GLU)。以上試劑盒均購(gòu)自北京中生北控生物科技股份有限公司，具體測(cè)定方法參見試劑盒說明書。

將分離的肝臟按照1∶9(m/V)的比例，加入生理鹽水制成10%的勻漿。大鼠血清和肝臟勻漿測(cè)定過氧化氫酶(CAT)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活力，總抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量。試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所，具體測(cè)定方法參見試劑盒說明書。

肝臟和血清的免疫指標(biāo)采用酶聯(lián)免疫分析(ELISA)法檢測(cè)。免疫指標(biāo)包括白介素-1β(IL-1β)、白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)，以及免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)。試劑盒均購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司，具體測(cè)定方法參見試劑盒說明書。

1.4數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)采用SAS 9.1.2軟件進(jìn)行分析，多重比較采用Duncan氏法，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤的形式表示，P<0.05代表差異顯著，P<0.01代表差異極顯著，0.05≤P<0.10代表有趨勢(shì)。

2　結(jié)果與分析

2.1地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠生長(zhǎng)性能的影響

由表1可見，各組初體重沒有顯著差異(P>0.05)；連續(xù)灌胃21 d后，試驗(yàn)組末體重極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。試驗(yàn)組中，1 250 mg/kg BW組極顯著高于10 mg/kg BW組(P<0.01)，與其他2組差異不顯著(P>0.05)；10 mg/kg BW組末體重與50 mg/kg BW組、100 mg/kg BW組之間差異也不顯著(P>0.05)；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組平均日增重極顯著升高(P<0.01)，且各試驗(yàn)組間差異不顯著(P>0.05)。

2.2地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠臟器指數(shù)的影響

由表2可知，試驗(yàn)組的肝臟指數(shù)極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，試驗(yàn)組間差異不顯著(P>0.05)；與對(duì)照組和10 mg/kg BW組相比，250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組的胸腺指數(shù)極顯著升高(P<0.01)，且50 mg/kg BW組、250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組間差異不顯著(P>0.05)，對(duì)照組和10 mg/kg BW組間差異不顯著(P>0.05)；地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠其他器官的臟器指數(shù)沒有顯著影響(P>0.05)。

表1　地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

表2　地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠臟器指數(shù)的影響

2.3地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠血清生化指標(biāo)的影響

由表3可見，與對(duì)照組相比，灌胃地頂孢霉培養(yǎng)物提高了大鼠血清TP、ALB、GLB和GLU的含量，降低了ALT、AST活力和LDL的含量。其中，10 mg/kg BW組、50 mg/kg BW組和250 mg/kg BW組的TP含量之間差異不顯著(P>0.05)，但極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，1 250 mg/kg BW組的TP含量與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05)；250 mg/kg BW組的血清ALB含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，而1 250 mg/kg BW組卻極顯著低于10 mg/kg BW組、50 mg/kg BW組和250 mg/kg BW組(P<0.01)，其他各組間差異不顯著(P>0.05)；對(duì)照組的血清GLB和GLU含量極顯著低于試驗(yàn)組(P<0.01)，試驗(yàn)組中GLB含量間差異不顯著(P>0.05)，250 mg/kg BW組的GLU含量最高，極顯著高于其他試驗(yàn)組(P<0.01)；大鼠血清的ALT、AST活力和LDL的含量隨地頂孢霉培養(yǎng)物灌胃量增加而降低。50 mg/kg BW組、250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組之間的血清ALT活力差異不顯著(P>0.05)，但均極顯著低于對(duì)照組和10 mg/kg BW組(P<0.01)，對(duì)照組與10 mg/kg BW組差異也不顯著(P>0.05)；對(duì)照組血清AST活力極顯著高于50 mg/kg BW組、250 mg/kg BW組(P<0.01)，1 250 mg/kg BW組極顯著低于對(duì)照組和10 mg/kg BW組(P<0.01)；1 250 mg/kg BW組的血清LDL含量最低，且極顯著低于其他各組(P<0.01)，250 mg/kg BW組極顯著低于對(duì)照組和10 mg/kg BW組(P<0.01)，對(duì)照組、10 mg/kg BW組、50 mg/kg BW組之間差異不顯著(P>0.05)；隨著地頂孢霉培養(yǎng)物的灌胃量增加，50 mg/kg BW組的血清高密度脂蛋白含量有升高趨勢(shì)(P=0.05)；而對(duì)其他血清生化指標(biāo)沒有顯著

影響(P>0.05)。

表3　地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠血清生化指標(biāo)的影響

2.4地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表4可見，試驗(yàn)組的血清GSH-Px活力和T-AOC極顯著高于對(duì)照組(P<0.01);試驗(yàn)組中1 250 mg/kg BW組的血清GSH-Px活力極顯著高于其他組(P<0.01)，50 mg/kg BW組和250 mg/kg BW組間差異不顯著(P>0.05)，10 mg/kg BW組最低；1 250 mg/kg BW組和250 mg/kg BW組的血清T-AOC之間差異不顯著(P>0.05)，但極顯著高于另外3組(P<0.01)，10 mg/kg BW組和50 mg/kg BW組差異不顯著(P>0.05)，但極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)；對(duì)照組的血清MDA含量極顯著高于50 mg/kg BW組、250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組(P<0.01)，但與10 mg/kg BW組差異不顯著(P>0.05)，250 mg/kg BW組的MDA含量最低；地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠血清CAT和T-SOD活力沒有顯著影響(P>0.05)。

表4　地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.5地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠血清免疫指標(biāo)的影響

由表5可見，250 mg/kg BW組的血清IL-1β含量極顯著低于其他組(P<0.01)，對(duì)照組極顯著高于其他組(P<0.01)，剩余3組間差異不顯著(P>0.05)；與對(duì)照組和10 mg/kg BW組相比，50 mg/kg BW組、250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組的血清IL-4含量極顯著升高(P<0.01)，其中對(duì)照組和10 mg/kg BW組相比差異不顯著(P>0.05)，其余組間差異不顯著(P>0.05)；250 mg/kg BW組的血清IL-17含量極顯著低于其他各組(P<0.01)，且各試驗(yàn)組間差異不顯著(P>0.05)，對(duì)照組與10 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組差異不顯著(P>0.05)，但極顯著低于50 mg/kg BW組(P<0.01)；血清IgA、IgG和IgM的含量隨著地頂孢霉培養(yǎng)物灌胃量的增加而提高，其中，1 250 mg/kg BW組的血清IgA含量最高，且極顯著高于其他各組(P<0.01)，250 mg/kg BW組極顯著高于對(duì)照組、10 mg/kg BW組、50 mg/kg BW組(P<0.01)，對(duì)照組與10 mg/kg BW組差異不顯著(P>0.05)；250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組間的血清IgG含量差異不顯著(P>0.05)，但極顯著高于其他3組(P<0.01)，50 mg/kg BW組極顯著高于對(duì)照組和10 mg/kg BW組(P<0.01)，這2組間差異不顯著(P>0.05)；50 mg/kg BW組、250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組血清IgM含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，10 mg/kg BW組與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)，與50 mg/kg BW組差異也不顯著(P>0.05)，50 mg/kg BW組與1 250 mg/kg BW組差異不顯著(P>0.05)；地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠血清中其他炎性因子含量沒有顯著影響(P>0.05)。

表5　地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠血清免疫指標(biāo)的影響

2.6地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可見，灌胃地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)肝臟CAT活力沒有影響，但是提高了肝臟GSH-Px、T-SOD活力和T-AOC，降低了MDA的含量。1 250 mg/kg BW組GSH-Px活力極顯著高于250 mg/kg BW組(P<0.01)，250 mg/kg BW組極顯著高于其他各組(P<0.01)，且其他各組間不存在顯著差異(P>0.05)；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組的T-SOD活力極顯著升高(P<0.01)，且1 250 mg/kg BW組極顯著高于其他3個(gè)試驗(yàn)組(P<0.01)，這3個(gè)試驗(yàn)組間差異不顯著(P>0.05)；試驗(yàn)組的MDA含量極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，且10 mg/kg BW組、250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組間差異不顯著(P>0.05)，10 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組極顯著高于50 mg/kg BW組(P<0.01)。

2.7地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠肝臟免疫指標(biāo)的影響

由表7可見，250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組的肝臟IL-1β含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，且這2組間差異不顯著(P>0.05)，而對(duì)照組與10 mg/kg BW組和50 mg/kg BW組間無顯著差異(P>0.05)；50 mg/kg BW組的肝臟IL-4含量極顯著高于其他各組(P<0.01)，對(duì)照組與10 mg/kg間差異不顯著(P>0.05)，250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組間差異不顯著(P>0.05)；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組的肝臟IL-17含量極顯著降低(P<0.01)，且試驗(yàn)組中，50 mg/kg BW組極顯著高于10 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組(P<0.01)，10 mg/kg BW組極顯著高于250 mg/kg BW組和1 250 mg/kg BW組(P<0.01)；地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)肝臟中其他炎性因子沒有顯著影響(P>0.05)。

表6　地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)SD大鼠肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

表7　地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠肝臟免疫指標(biāo)的影響

3　討　論

3.1地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠生長(zhǎng)性能的影響

前人試驗(yàn)表明，蟲草類物質(zhì)及其活性成分具有改善生產(chǎn)性能的能力。蛹蟲草發(fā)酵產(chǎn)品[10]和蟲草副產(chǎn)物[11]對(duì)肉雞和蛋雞生產(chǎn)性能的改善以及蛹蟲草多糖對(duì)白對(duì)蝦體增重和飼料轉(zhuǎn)化率的提高[8]都證明了蟲草類物質(zhì)及其活性成分在畜牧業(yè)中應(yīng)用存在可行性。魏建忠等[4]通過保育仔豬飼喂試驗(yàn)證明了地頂孢霉培養(yǎng)物具有促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)和提高免疫力的作用，而孫漢巨等[5]也表明地頂孢霉培養(yǎng)物能夠增加蛋鴨的體重，與本試驗(yàn)的結(jié)果相似。地頂孢霉培養(yǎng)物提高生產(chǎn)性能的原因可能是提高了飼料轉(zhuǎn)化率[4,8]。而蟲草活性成分抑菌作用可能也是提高體增重的原因之一。Koh等[12]通過蟲草提取物替代抗生素生長(zhǎng)促進(jìn)劑的研究表明，蟲草提取物能夠改善肉雞腸道微生物菌群狀態(tài)，控制腸道致病菌數(shù)量，從而提高肉雞生長(zhǎng)性能。健康豬的腸道乳酸菌數(shù)量大于大腸桿菌，而腹瀉豬腸道內(nèi)菌群數(shù)量則出現(xiàn)相反的情況[13]。因此，地頂孢霉培養(yǎng)物中的功能性成分的抗菌益生作用是其提高大鼠生長(zhǎng)性能的關(guān)鍵所在。

3.2地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠臟器指數(shù)的影響

臟器指數(shù)是動(dòng)物重要的生物學(xué)指標(biāo)之一，能夠一定程度上反映器官功能強(qiáng)弱[14]，其中胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)能夠反應(yīng)動(dòng)物機(jī)體的免疫功能。本試驗(yàn)中，地頂孢霉培養(yǎng)物提高了大鼠的肝臟指數(shù)和胸腺指數(shù)。孫連海等[15]通過連續(xù)灌胃小鼠試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)蛹蟲草物質(zhì)能夠顯著提高小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。蟲草產(chǎn)品[9]和蟲草多糖[16]對(duì)免疫抑制小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)也有明顯的提高作用，與本試驗(yàn)研究結(jié)果類似。但本試驗(yàn)中并沒發(fā)現(xiàn)地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠脾臟指數(shù)有影響，可能與產(chǎn)品的作用方式以及加工工藝不同有關(guān)。本試驗(yàn)中，大鼠的肝臟指數(shù)提高，說明地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠的肝臟功能存在影響[14]，可能是由于地頂孢霉培養(yǎng)物經(jīng)肝臟分解代謝后作用于機(jī)體，并對(duì)肝臟產(chǎn)生作用。胸腺指數(shù)和肝臟指數(shù)的提高表明地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠的免疫機(jī)能和肝臟功能有積極影響。

3.3地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)是反映機(jī)體代謝情況最敏感的指標(biāo)。TP、ALB和GLB含量不僅能夠反映機(jī)體蛋白質(zhì)的吸收、合成和分解情況，還能夠體現(xiàn)免疫能力的高低[17]。本試驗(yàn)中，地頂孢霉培養(yǎng)物提高了SD大鼠血清TP、ALB和GLB含量，說明地頂孢霉培養(yǎng)物能夠提高機(jī)體的免疫能力。ALT和AST是機(jī)體2種主要的轉(zhuǎn)氨酶，正常情況下，這2種酶在肝臟中活力較高，當(dāng)肝臟受損傷時(shí)會(huì)釋放到血液中，導(dǎo)致血液中含量升高[18]。本試驗(yàn)中，血清AST和ALT活力降低，證明地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)肝臟組織無不良影響。LDL是富含膽固醇的脂蛋白，把膽固醇從肝臟運(yùn)送到全身組織，血清中LDL含量過高易引起動(dòng)脈硬化和冠心病等疾病。一直以來，生姜、姜黃素和黃芪等中草藥都被應(yīng)用于降低LDL的含量研究[19-21]。本試驗(yàn)中，地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)LDL的明顯降低作用證明其在膽固醇代謝中的積極作用。而本試驗(yàn)中試驗(yàn)組血清GLU含量的升高則證明了地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)糖代謝的促進(jìn)作用，具體代謝途徑還有待進(jìn)一步研究。

3.4地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠血清和肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

本試驗(yàn)中，由于地頂孢霉培養(yǎng)物顯著提高了大鼠的肝臟指數(shù)，并對(duì)肝臟的血清生化指標(biāo)有明顯的改善作用，因此可以推測(cè)地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)肝臟組織的抗氧化和免疫能力有積極影響。本試驗(yàn)通過對(duì)血清和肝臟的抗氧化指標(biāo)的測(cè)定，全面地了解地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠機(jī)體抗氧化能力的影響。

作為動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞氧化代謝的產(chǎn)物，活性氧(ROS)能夠引起機(jī)體一系列氧化應(yīng)激疾病。T-AOC是描述血液中氧化與抗氧化動(dòng)態(tài)平衡的一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的指標(biāo)。而脂質(zhì)代謝也是氧化應(yīng)激的一個(gè)重要結(jié)果，MDA就是脂質(zhì)氧化反應(yīng)的產(chǎn)物之一，經(jīng)常被用作氧化應(yīng)激的檢測(cè)指標(biāo)。SOD、CAT和GSH-Px在維持氧化與抗氧化、修復(fù)氧化應(yīng)激所帶來的損傷中扮演重要角色[22-23]。這些酶的活性直接反應(yīng)機(jī)體抗氧化的過程。本試驗(yàn)研究結(jié)果證明了，地頂孢霉培養(yǎng)物能夠顯著提高血清和肝臟中T-AOC、T-SOD和GSH-Px活力，降低MDA的含量，且所有值均在正常范圍內(nèi)?；诒驹囼?yàn)結(jié)果可以推測(cè)，地頂孢霉培養(yǎng)物能夠通過降低大鼠血清和肝臟的氧化應(yīng)激和提高其抗氧化酶活性來改善機(jī)體免疫能力。前人研究也證明了蟲草物質(zhì)及功能性成分擁有潛在的抗氧化和抗脂質(zhì)氧化的活性[24]，能夠提高正常小鼠[15]、免疫抑制小鼠[9,16]和白對(duì)蝦[8]SOD和GSH-Px活力，并顯著降低MDA含量，與本試驗(yàn)研究結(jié)果一致。

3.5地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)大鼠血清和肝臟組織免疫指標(biāo)的影響

已有研究報(bào)道，通過攝入抗氧化物質(zhì)能夠影響機(jī)體免疫反應(yīng)與免疫狀況[25-26]。蟲草類物質(zhì)能夠提高動(dòng)物機(jī)體抗氧化能力，調(diào)節(jié)炎性因子水平，從而調(diào)節(jié)免疫功能[16,27]。炎性因子涉及到免疫和氧化的各個(gè)方面，包括免疫功能的發(fā)展與功能化、細(xì)胞增殖與分化、細(xì)胞活化、細(xì)胞內(nèi)外基質(zhì)蛋白質(zhì)的調(diào)控增殖等[28]。IL-4是傳統(tǒng)的抗炎因子[29]，而IL-1β、IL-2、IL-6、IL-17和TNF-α則屬于促炎因子[30-33]，降低促炎因子的含量能夠保護(hù)組織免于過度的炎癥反應(yīng)[34]。本試驗(yàn)中，灌胃地頂孢霉培養(yǎng)物能夠下調(diào)大鼠血清和肝臟中促炎因子IL-1β和IL-17的含量，證明其具有免疫調(diào)節(jié)功能。免疫球蛋白能夠與細(xì)菌和病毒等外援物質(zhì)結(jié)合，幫助機(jī)體清除這些抗原物質(zhì)。本試驗(yàn)中，地頂孢霉培養(yǎng)物顯著提高了大鼠血清中IgA、IgG和IgM的含量，也證明其具有免疫提高能力。樸美子等[9]通過飼喂試驗(yàn)證明了蛹蟲草黃豆能夠顯著提高免疫抑制小鼠血液和肝臟的IgG、IgM和IL-4含量；Zhang等[28]通過BALB/c免疫抑制小鼠試驗(yàn)，也證明了蛹蟲草多糖能通過減少氧化損傷，調(diào)節(jié)炎性因子來提高小鼠的免疫能力，均與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

灌胃地頂孢霉培養(yǎng)物能夠提高大鼠免疫能力可能是由于功能性成分的攝入。地頂孢霉培養(yǎng)物是由古尼蟲草提取的地頂孢霉菌經(jīng)人工發(fā)酵制得，其中活性成分(甾醇和腺苷)與天然蟲草相似。大量研究已經(jīng)證明，這些活性成分具有免疫調(diào)節(jié)和藥理作用[35-38]。另外，在其他種類蟲草中，大量的活性成分也有報(bào)道，這些成分包括蟲草素、甘露糖醇、糖蛋白、肽和多糖等[39]。然而，關(guān)于地頂孢霉培養(yǎng)物提高免疫能力的機(jī)理還需要進(jìn)一步研究。

綜合整個(gè)試驗(yàn)期間地頂孢霉培養(yǎng)物的給藥量小(每只鼠40～100 mg)和自身物理特性(固體粉末狀)等特點(diǎn)，并參照其他蟲草類物質(zhì)相關(guān)試驗(yàn)[15-16]，我們選擇灌胃法進(jìn)行給藥。而針對(duì)蟲草素等提取物純品，也有試驗(yàn)采用腹腔注射等方法進(jìn)行給藥[40]。其他文獻(xiàn)也報(bào)道過，當(dāng)試驗(yàn)材料給藥量比較大時(shí)，可以選擇飼糧給藥法[16,28]，這樣不僅可以減少捕捉和灌注造成的應(yīng)激刺激，而且可以減少工作量。同樣，在未來生產(chǎn)與應(yīng)用中，地頂孢霉培養(yǎng)物可以在進(jìn)行預(yù)混后添加到飼糧中，便于實(shí)際生產(chǎn)中操作。

4　結(jié)　論

① 地頂孢霉培養(yǎng)物能夠提高SD大鼠平均日增重，改善血清生化指標(biāo)，提高大鼠機(jī)體抗氧化能力和免疫能力。

② 綜合以上試驗(yàn)結(jié)果和經(jīng)濟(jì)成本等因素，SD大鼠地頂孢霉培養(yǎng)物的最適添加量為250 mg/kg BW。

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(責(zé)任編輯王智航)

, professor, E-mail: zhangyonggen@sina.com

Effects ofAcremoniumterricolaCulture on Growth Performance,Antioxidant and Immune Indexes of Serum and Liver in Sprague Dawley Rats

LI YangLIN CongXU WenbinZHANG XingyiWANG YizhenGAO Hong DOU XiujingHAO XiaoyanZHANG Yonggen*

(College of Animal Science and Technology， Northeast Agricultural University， Harbin 150030， China)

This study was aimed to investigate the effects ofAcremoniumterricolaculture on growth performance, antioxidant and immune indexes of serum and liver in Sprague Dawley rats. Fourty Sprague Dawley rats with near weight were randomly divided into 5 groups with 8 replicates per group and 1 rat per replicate. One was control group and others were experimental groups with different doses ofAcremoniumterricolaculture (10, 50, 250 and 1 250 mg/kg BW, respectively).Acremoniumterricolaculture was given corresponding medicines for 21 days via gavage. The results showed as follows:Acremoniumterricolaculture significantly improved average daily gain of rats (P<0.01); improved liver and thymus indexes; improved serum total protein (TP), albumin (ALB), globulin (GLB) and glucose (GLU) contents, decreased serum activities of alanine transaminase (ALT) and aspertate transaminase (AST), and serum content of low-density lipoprotein (LDL); improved glutathione peroxidase (GSH-Px) activity and total antioxidant capacity (T-AOC), decreased malondialdehyde (MDA) content of serum and liver, and improved superoxide dismutase (T-SOD) activity of liver; increased serum contents of immunoglobulins A, M and G, increased interleukin-4 (IL-4) content of serum and liver, and decreased contents of interleukin-1β (IL-1β) and interleukin-17 (IL-17) of serum and liver. In conclusion，Acremoniumterricolaculture can improve average daily gain, biochemical indexes, antioxidant and immunity of serum and liver in Sprague Dawley rats, and the optimal supplemental level is 250 mg/kg body weight.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(8)：2657-2666]

Acremoniumterricolaculture; Sprague Dawley rats; performance; antioxidant; immunity

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.08.039

2016-02-14

國(guó)家奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-37)

李洋(1989—)，男，黑龍江肇東人，博士研究生，從事反芻動(dòng)物生產(chǎn)的研究。E-mail: 446190229@qq.com

張永根，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail: zhangyonggen@sina.com

S816.7

A

1006-267X(2016)08-2657-10