不同樣品中大腸菌快速紙片法與傳統(tǒng)發(fā)酵法檢測(cè)結(jié)果分析

蒙嘉鵬

（華測(cè)檢測(cè)認(rèn)證集團(tuán)股份有限公司 廣東深圳 518101）

不同樣品中大腸菌快速紙片法與傳統(tǒng)發(fā)酵法檢測(cè)結(jié)果分析

蒙嘉鵬

（華測(cè)檢測(cè)認(rèn)證集團(tuán)股份有限公司 廣東深圳 518101）

目的：探討不同樣品中大腸菌快速紙片法與傳統(tǒng)發(fā)酵法檢測(cè)結(jié)果。方法：通過(guò)快速紙片法與傳統(tǒng)發(fā)酵法對(duì)240份包括餐具、水質(zhì)、鹵菜、冷凍飲品和糕點(diǎn)等在內(nèi)的樣品進(jìn)行檢測(cè)，回顧分析不同方法檢測(cè)結(jié)果的符合率。結(jié)果：不同類型樣品發(fā)酵法檢測(cè)真陽(yáng)性率對(duì)比具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。不同污染程度樣品兩種方法檢測(cè)結(jié)果對(duì)比具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。不同類型樣品兩種檢查方法大腸菌群陽(yáng)性符合率對(duì)比有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。結(jié)論：快速紙片法用于樣品大腸菌群檢測(cè)，具有較高的準(zhǔn)確性。

大腸菌；快速紙片法；傳統(tǒng)發(fā)酵法

大腸菌群是一種食物糞便污染評(píng)定的關(guān)鍵性指標(biāo)，其衛(wèi)生學(xué)意義較為廣泛，傳統(tǒng)發(fā)酵法是食品衛(wèi)生國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法中較為常用的大腸菌群檢測(cè)和評(píng)定技術(shù)，但這一檢測(cè)方法時(shí)間消耗較長(zhǎng)，需要消耗較多的培養(yǎng)基，且操作程序較為復(fù)雜，無(wú)法滿足實(shí)際檢測(cè)工作的需要。隨著近年來(lái)科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，市場(chǎng)上也逐漸發(fā)展處了多種大腸菌群快速檢測(cè)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了食品安全檢測(cè)效率的提高。但是，我國(guó)對(duì)于不同大腸菌快速檢測(cè)方法仍然缺乏統(tǒng)一的規(guī)定和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。本文就對(duì)不同樣品中大腸菌快速紙片法與傳統(tǒng)發(fā)酵法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

①快速試紙。本研究所用快速檢測(cè)紙片由深圳市博卡生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，且在有效期內(nèi)。②發(fā)酵培養(yǎng)基。根據(jù)《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測(cè)定》（GBT4789.3-2003）要求自行配置發(fā)酵培養(yǎng)基。③樣品來(lái)源。本研究所用標(biāo)本均由市疾病防御控制中心提供，共計(jì)480份，其中，餐具、水質(zhì)、鹵菜、冷凍飲品和糕點(diǎn)各120份，將全部樣品隨機(jī)制成不同的污染程度，包括103cfu/ml、102cfu/ml、101cfu/ml空白，所選餐具均從當(dāng)?shù)匦〕允袌?chǎng)隨機(jī)抽取。

1.2 方法

本研究分別通過(guò)快速紙片法與傳統(tǒng)發(fā)酵法對(duì)餐具、水質(zhì)、鹵菜、冷凍飲品和糕點(diǎn)等不同類型樣品的大腸菌群結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)過(guò)程中嚴(yán)格執(zhí)行試劑盒說(shuō)明書(shū)操作要求，其中，餐具類樣品檢測(cè)參照標(biāo)準(zhǔn)為《食（飲）具消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB14934-94），水質(zhì)類樣品檢測(cè)參照標(biāo)準(zhǔn)為《生活飲用水衛(wèi)生規(guī)范（2001年）》，食品類樣品檢測(cè)參照標(biāo)準(zhǔn)為《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測(cè)定》（GBT4789.3-2003）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本次醫(yī)學(xué)研究通過(guò)SPSS17.0軟件分析和處理所得數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料通過(guò)X2檢驗(yàn)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料通過(guò)（x±s）方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理和表示，其他數(shù)據(jù)資料通過(guò)單因素方差分析法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，如果所得分析結(jié)果P＜0.05，可以證實(shí)兩組數(shù)據(jù)資料對(duì)比具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 紙片法弱陽(yáng)性標(biāo)本的發(fā)酵法檢測(cè)結(jié)果

不同類型樣品中，糕點(diǎn)的真陽(yáng)性率相對(duì)較高，而水質(zhì)的真陽(yáng)性率則相對(duì)較低，不同類型樣品發(fā)酵法檢測(cè)真陽(yáng)性率對(duì)比具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），如表1所示。

表1 紙片法弱陽(yáng)性標(biāo)本的發(fā)酵法檢測(cè)結(jié)果分析（單位：n/%）

2.2 不同污染程度樣品檢測(cè)結(jié)果

檢測(cè)結(jié)果證實(shí)，102cfu/ml以上污染程度的冷凍飲品使用紙片法和發(fā)酵法檢測(cè)結(jié)果完全相符，而不同污染程度鹵菜使用紙片法和發(fā)酵法檢測(cè)結(jié)果相符度均較低，不同污染程度樣品兩種方法檢測(cè)結(jié)果對(duì)比具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），如表2所示。

表2 不同污染程度樣品檢測(cè)結(jié)果分析（單位：n/%）

2.3 不同樣品兩種檢測(cè)方法大腸菌群陽(yáng)性符合率

發(fā)酵法和紙片法用于水質(zhì)樣品檢測(cè)，其大腸菌群陽(yáng)性符合率為100%，而兩種檢測(cè)方法用于鹵菜樣品檢測(cè)，其大腸菌群陽(yáng)性符合率僅為66.7%，不同類型樣品兩種檢查方法大腸菌群陽(yáng)性符合率對(duì)比有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），如表 3所示。

表3 不同樣品兩種檢測(cè)方法大腸菌群陽(yáng)性符合率分析（單位：n/%）

3 討論

大腸菌群檢測(cè)主要用于評(píng)價(jià)食品是否發(fā)生糞便污染，以及人體食用后有無(wú)健康危害，因而也是國(guó)家對(duì)于食品安全衛(wèi)生評(píng)定的一項(xiàng)關(guān)鍵性指標(biāo)?，F(xiàn)階段，我國(guó)常用的檢測(cè)方法和標(biāo)準(zhǔn)為三步九管發(fā)酵法，但是，這一檢測(cè)技術(shù)具有無(wú)法滿足衛(wèi)生監(jiān)督工作需要、操作時(shí)間長(zhǎng)、程序繁瑣復(fù)雜、工作量大等問(wèn)題。本文通過(guò)快速紙片法對(duì)食品中的大腸菌群含量進(jìn)行檢測(cè)，能夠最大限度降低檢測(cè)的成本，縮短檢測(cè)時(shí)間，且操作方法較為簡(jiǎn)單易行，檢測(cè)后15～18h左右即能夠獲得最終結(jié)果，且快速紙片法用于大腸菌群檢測(cè)的敏感性相對(duì)較高，對(duì)于糕點(diǎn)、餐具、水質(zhì)等的檢測(cè)合格率能夠達(dá)到95%左右，因而這一檢測(cè)技術(shù)逐漸成為了食品安全檢查人員應(yīng)用的首選，但是，快速紙片法僅可用于初步的實(shí)驗(yàn)和篩選，無(wú)法統(tǒng)一用于衛(wèi)生執(zhí)法監(jiān)測(cè)[1～3]。

快速測(cè)試片指的是以膠片、紙膜、紙片等作為培養(yǎng)基載體，在其上附著特定的顯色物質(zhì)和培養(yǎng)基，并對(duì)上面的微生物顯色和生長(zhǎng)情況加以測(cè)定，因而是一種較為科學(xué)的檢測(cè)技術(shù)[4]。受到不同類型樣品pH值和成分等因素的影響，這一方法的最終檢測(cè)結(jié)果也存在一定的差異，本研究結(jié)果證實(shí)：樣品的干擾因素越復(fù)雜，成分越多，則其檢測(cè)結(jié)果的變動(dòng)性越大[5]。傳統(tǒng)發(fā)酵法與快速紙片法對(duì)于水質(zhì)和餐具等的檢測(cè)結(jié)果基本相同，且所受的影響和干擾也較小，與以往的研究結(jié)果相同，而對(duì)于鹵菜和冷凍飲品等的檢測(cè)結(jié)果則存在一定的差異，其主要原因在于，兩種樣品的色素和pH值存在一定差異，所以，我們需要按照樣本的不同類型，對(duì)快速試紙進(jìn)行選擇[6]。

由本次研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，傳統(tǒng)發(fā)酵法和快速紙片法用于不同樣品中大腸菌群的檢測(cè)，快速紙片法在檢測(cè)成本、敏感程度、獲取報(bào)告時(shí)間和操作簡(jiǎn)便性等方面優(yōu)勢(shì)更加明顯[7]，但是，需要從使用者的實(shí)際需要和生產(chǎn)廠家的不同出發(fā)，對(duì)相應(yīng)類型的標(biāo)本進(jìn)行配置，供使用者進(jìn)行配對(duì)選擇，同時(shí)，需要通過(guò)傳統(tǒng)方式對(duì)不典型結(jié)果進(jìn)行判斷[8]。另一方面，ISO標(biāo)準(zhǔn)要為快速檢驗(yàn)方法提供一個(gè)比對(duì)標(biāo)尺，從而判斷檢測(cè)結(jié)果的偏差是否可以接受[9]。

[1]朱培玉，魏珂.固定底物酶底物法與多管發(fā)酵法和快速紙片法測(cè)定水中糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）的比較[J].四川環(huán)境，2014，33（2）：30～31.

[2]趙春霞，張哲海，厲以強(qiáng)，等．酶底物法與多管發(fā)酵法和紙片法監(jiān)測(cè)環(huán)境水樣大腸菌群的比較[J].環(huán)境監(jiān)測(cè)管理與技術(shù)，2009，21（2）：63～64.

[3]石海根，任萬(wàn)平.紙片法與發(fā)酵法檢測(cè)餐具大腸菌群結(jié)果比較[J].衛(wèi)生防疫消毒，2010，1（2）：240～241.

[4]張吉龍，何繼明，何敏.水中糞大腸菌群檢測(cè)方法及其研究進(jìn)展[J].青海環(huán)境，2012，4（2）：89～90.

[5]潘力軍，高新崗，王友斌．醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水糞大腸菌群快速檢測(cè)方法研究初探[J]．中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20（8）：2091～2092．

[6]馬 原，劉虹．幾種糞大腸菌群檢測(cè)方法的比較[J].黑龍江環(huán)境通報(bào)，2011，34（3）：43～45．

[7]趙春霞，張哲海，厲以強(qiáng)，等．酶底物法與多管發(fā)酵法和紙片法監(jiān)測(cè)環(huán)境水樣大腸菌群的比較[J].環(huán)境監(jiān)測(cè)管理與技術(shù)，2009，2（1）：63～64．

[8]張吉龍，何繼明，袁泉，等.多管發(fā)酵法與其改進(jìn)法檢測(cè)水中糞大腸菌群的比較[J].四川環(huán)境，2012，31（5）：8～10.

[9]史 健.糞大腸菌群檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].河北化工，2012，35（7）：32～33.

R155.5

A

1004-7344（2016）10-0335-02

2016-3-24

蒙嘉鵬（1987-），男，生物技術(shù)助理工程師，本科，主要從事食品微生物檢測(cè)工作。