雙氯芬酸鈉緩釋片的體外釋放度研究

楊艾玲 ，殷義霞，杜松云，羅 敏，魏?jiǎn)⒈?/p>

(1.武漢理工大學(xué)華夏學(xué)院 化學(xué)與制藥工程系，湖北 武漢 430223；2.武漢理工大學(xué) 材料復(fù)合新技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430070)

0 引言

雙氯芬酸鈉為鄰氨基苯甲酸類非甾體解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥，臨床可用于治療風(fēng)濕和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎及多種原因引起的疼痛和發(fā)熱等[1].雙氯芬酸鈉對(duì)釋放介質(zhì)pH值的變化比較敏感，血漿半衰期為1～2 h，作用維持時(shí)間短[2]，胃腸道反應(yīng)是其常見不良反應(yīng)[3-4].因此，為延長(zhǎng)給藥時(shí)間間隔，維持穩(wěn)定血藥濃度，減少副作用，許多廠家將雙氯芬酸鈉制成緩釋制劑，并且雙氯芬酸鈉也成為國(guó)內(nèi)外多種緩釋或控釋系統(tǒng)研究中較為理想的模型藥物[5].

相比較速釋制劑，緩釋制劑更有利于提高病人的服藥依從性和增強(qiáng)治療效果.目前，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上雙氯芬酸鈉緩釋制劑品種較多，而且各廠家的藥品質(zhì)量差異也較大[6]，導(dǎo)致藥物的最佳療效出現(xiàn)差異，增加了臨床上醫(yī)生和患者選用該類藥物的難度.釋放度是口服藥物從緩釋制劑、控釋制劑或腸溶制劑在規(guī)定溶劑中釋放的速度和程度，體外釋放度考察是評(píng)價(jià)緩釋制劑質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo).本文建立體外釋放度的測(cè)定方法，隨機(jī)選取市售兩個(gè)不同廠家的雙氯芬酸鈉緩釋片進(jìn)行釋放度測(cè)定，采用Weibull方程計(jì)算釋放參數(shù)，并對(duì)釋放參數(shù)進(jìn)行方差分析，為設(shè)計(jì)療效更佳的雙氯芬酸鈉緩釋制劑處方和提高緩釋制劑體外釋放度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)提供理論參考.

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與藥品

TU-1900雙光束紫外可見分光光度計(jì),北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；ZRS-8G溶出度測(cè)試儀，天津大學(xué)精密儀器廠.雙氯芬酸鈉緩釋片A，深圳某藥廠，規(guī)格0.1 g/片；雙氯芬酸鈉緩釋片B，上海某藥廠，規(guī)格0.1 g/片；雙氯芬酸鈉對(duì)照品，中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)100334-200302；磷酸二氫鉀、無水磷酸氫二鈉均為分析純.

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 稱取雙氯芬酸鈉對(duì)照品約10 mg于50 mL容量瓶中，用pH6.8磷酸鹽緩沖溶液稀釋，定容至刻度，精密量取上述溶液5 mL置于50 mL容量瓶中，加pH6.8磷酸鹽緩沖溶液稀釋至刻度，搖勻，制成雙氯芬酸鈉對(duì)照品溶液.以pH6.8磷酸鹽緩沖溶液為空白，取對(duì)照品溶液適量于比色皿中，照紫外—可見分光光度法，在200～400 nm間進(jìn)行掃描，結(jié)果表明雙氯芬酸鈉對(duì)照品溶液在276 nm處有最大吸收，而輔料在此波長(zhǎng)處無吸收，故選定276 nm為檢測(cè)波長(zhǎng).

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 精密稱取雙氯芬酸鈉對(duì)照品12.0 mg，置于100 mL的量瓶中，加pH6.8磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻.精密量取上述溶液2、3、4、5、6、7、8、9 mL置于50 mL容量瓶中，用pH6.8磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，配制成濃度分別為4.8、7.2、9.6、12.0、14.4、16.8、19.2、21.6 mg/L 的溶液，分別在276 nm處測(cè)定吸光度，并以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度C(mg/L)為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程A=4.34×10-2C-8.80×10-2(r= 0.991 9，n=8),雙氯芬酸鈉濃度在4.8～21.6 mg/L范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好.

1.2.3 精密度 配制20 mg/L的雙氯芬酸鈉對(duì)照品溶液，在最大吸收波長(zhǎng)276 nm處重復(fù)測(cè)定5次吸光度，RSD為0.13%，表明精密度良好.

1.2.4 穩(wěn)定性 配制20 mg/L的雙氯芬酸鈉對(duì)照品溶液，分別于0、2、6、8、12 h在276 nm處測(cè)定吸光度，吸光度值分別為0.699、0.720、0.705、0.731、0.716，RSD為1.76%，說明穩(wěn)定性良好.

1.2.5 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取已知含量的雙氯芬酸鈉緩釋片適量，按標(biāo)示量用pH6.8磷酸鹽緩沖液配制成14.4 mg/L的樣品溶液，取樣品溶液10 mL，共9份，準(zhǔn)確測(cè)定其濃度，分別置于50 mL容量瓶中.另精密稱取雙氯芬酸鈉對(duì)照品適量，用pH6.8磷酸鹽緩沖液配制成14.4 mg/L的對(duì)照品溶液，取對(duì)照品溶液8、10、12 mL各3份，分別加入9份樣品溶液中，用pH6.8磷酸鹽緩沖液定容至刻度，于276 nm處測(cè)定吸光度，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1.

表1 雙氯芬酸鈉緩釋片加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab. 1 The addition standard recovery results of diclofenac sodium sustained-release tablets

2 結(jié)果與討論

2.1 釋放度的測(cè)定

參照2015版《中國(guó)藥典》第四部中《溶出度與釋放度測(cè)定方法》[7]和《日本橙皮書》中收載的雙氯芬酸鈉緩釋片的溶出度測(cè)定方法，以pH6.8磷酸鹽緩沖液900 mL為釋放介質(zhì)，溫度為(37 ℃±0.5 ℃)，轉(zhuǎn)速為100 r/min，分別于0.25、0.75、2、4、6、8、10、12 h各取樣時(shí)間點(diǎn)處取樣10 mL，同時(shí)立即補(bǔ)充相同溫度、相同體積的釋放介質(zhì)，并用0.8μm微孔濾膜濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL于10 mL容量瓶中，并用釋放介質(zhì)稀釋至刻度，作為供試品溶液.另精密稱定雙氯芬酸鈉對(duì)照品0.010 g，加釋放介質(zhì)制成每1 mL約含10 μg的溶液，作為對(duì)照品溶液.分別取上述兩種溶液在276 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，并計(jì)算累積釋放百分率，結(jié)果見圖1.

根據(jù)《中國(guó)藥典》2015版第四部中《緩釋、控釋和遲釋制劑指導(dǎo)原則》[8]，由累積釋放率-時(shí)間曲線(圖1)可以看出，A廠藥品在取樣時(shí)間點(diǎn)2 h，累積釋放率約30%，存在突釋點(diǎn)，在中間取樣點(diǎn)6 h，累積釋放率約50%，在最后的取樣時(shí)間點(diǎn)12 h，累積釋放率大于75%，可認(rèn)為釋藥完全，B廠藥品在中間取樣點(diǎn)6 h時(shí)，累積釋放率約80%，釋藥過快，A廠藥品和B廠藥品釋藥速率存在明顯差異.

圖1 兩廠家雙氯芬酸鈉緩釋片的釋放曲線Fig. 1 The release curve of diclofenac sodium sustained-release tablets from two different pharmaceutical factories

2.2 釋放參數(shù)計(jì)算和方差分析

利用Weibull分布模型原理，用Excel處理釋放度數(shù)據(jù)[9]，計(jì)算兩廠家雙氯芬酸鈉緩釋片的形狀參數(shù)m、累積釋放50%所需時(shí)間T50和累積釋放63.2%所需時(shí)間Td，結(jié)果見表2；對(duì)表2中兩廠家雙氯芬酸鈉緩釋片的T50、Td、m進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表3.

表2 兩廠家雙氯芬酸鈉緩釋片的釋放參數(shù)Tab. 2 The release parameters of diclofenac sodium sustained-release tablets from two different pharmaceutical factories

結(jié)果表明，A廠家藥品釋藥速率較快，其T50，Td值均明顯小于于B廠家,A、B兩廠家藥品的溶出參數(shù)之間有顯著性差異(P< 0.01)，釋放曲線的形態(tài)和釋放速率均存在差異.

表3 兩廠家雙氯芬酸鈉緩釋片的釋放參數(shù)方差分析結(jié)果Tab. 3 The variance results of diclofenac sodium sustained-release tablets from two different pharmaceutical factories

3 結(jié)論

研究表明：雙氯芬酸鈉對(duì)照品在pH6.8磷酸鹽緩沖液中的最大吸收波長(zhǎng)為276 nm, 雙氯芬酸鈉濃度在4.8～21.6 mg/L范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好,精密度、穩(wěn)定性良好，回收率為99.14%，準(zhǔn)確度高，則所建立雙氯芬酸鈉緩釋片體外釋放度測(cè)定方法可行；兩廠家的釋放參數(shù)T50、Td、m存在顯著性差異.不同廠家相同規(guī)格的雙氯芬酸鈉緩釋片釋放程度存在較大區(qū)別，可能是由于原輔料來源、處方配比、生產(chǎn)工藝條件、溶脹崩解特性[10]等的不同，此差異有可能影響到制劑的臨床療效.因此，測(cè)定緩釋制劑的釋放度并提高釋放度測(cè)定要求，對(duì)保證制劑的臨床療效是非常有必要的.在后續(xù)研究中，將著重探討具體是哪一種因素導(dǎo)致雙氯芬酸鈉緩釋片的釋放度出現(xiàn)差異.