血清C1q檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動性判斷及狼瘡腎炎診斷中的價值

王恝歆，趙志丹，鐘白云，謝婷彥，張秋煥，馮斯斯，鄧輝

（中南大學湘雅醫(yī)院 檢驗科，湖南 長沙 410008）

血清C1q檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動性判斷及狼瘡腎炎診斷中的價值

王恝歆，趙志丹，鐘白云，謝婷彥，張秋煥，馮斯斯，鄧輝

（中南大學湘雅醫(yī)院 檢驗科，湖南 長沙 410008）

目的探討系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者血清C1q水平變化對SLE疾病活動性判斷及狼瘡腎炎（LN）的診斷意義。方法150例研究對象，根據(jù)臨床資料，分為SLE組（60例）、其他風濕疾病組（30例）、其他腎臟疾病組（30例）及正常對照組（30例）4組，其中SLE組包括33例LN患者和27例非LN患者。采用免疫透射比濁法測定各組血清C1q水平，并與其他SLE活動性指標進行相關性分析。結果①SLE組的血清C1q水平低于其他風濕性疾病組、其他腎臟疾病組及正常對照組（F=41.428，P=0.000），其中LN組的血清C1q水平低于非LN組（t=-4.262，P=0.000），SLE病情活動期患者C1q水平低于病情穩(wěn)定期患者（t=-5.159，P=0.000）。②在SLE組中C1q診斷LN的敏感性為66.7%，特異性為59.3%。工作特征曲線的曲線下面積為0.717。③相關分析表明，SLE患者血清C1q水平與C3、C4呈正相關，與SLE疾病活動指數(shù)積分呈負相關（r=0.593、0.448和-0.589，P=0.000）。結論血清C1q不僅有助于SLE及LN的診斷，且對SLE的病情評估及療效判斷具有重要參考價值。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡；狼瘡腎炎；補體C1q；免疫透射比濁法

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種自身免疫介導的彌漫性結締組織病，臨床表現(xiàn)復雜，病情反復，其病程中產生多種自身抗體并激活補體，導致多器官及系統(tǒng)的損傷。狼瘡性腎炎（lupus nephritis，LN）是SLE最常見的并發(fā)癥及最常見的死亡原因之一［1］，是影響SLE預后的重要因素。LN的早期診斷及病理類型、是否及早治療、是否及時控制病情活動等直接影響LN的預后。腎穿刺是確診LN病理類型的金標準，但作為有創(chuàng)性檢查，操作具有風險。目前，臨床常用的血清標志物在SLE特異性腎臟受累中無明確意義。C1q是補體經(jīng)典激活途徑起始成分C1的一個亞基，在補體經(jīng)典途徑中發(fā)揮識別及活化作用［2］。近年來國內外研究發(fā)現(xiàn)，血清C1q水平的改變與SLE腎臟損害及病情活動密切相關［3-4］。本研究觀察SLE及LN患者的血清C1q水平變化，分析C1q與SLE、LN和SLE病情活動的相關性，旨在探討C1q在LN診斷及SLE病情活動監(jiān)測及指導治療中的作用。

1　資料與方法

1.1研究對象

本研究納入研究對象150例，分為SLE組、其他風濕疾病組、其他腎臟疾病組及正常對照組4組。SLE組為2015年2月-2015年5月在中南大學湘雅醫(yī)院風濕科住院的患者，其中女性50例，男性10例；年齡（35±15）歲。SLE的診斷符合美國風濕病學會1997年修訂的SLE分類診斷標準［5］。SLE患者按照SLE疾病活動指數(shù)（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）進行病情評估，以SLEDAI積分≥10分［6］作為判定疾病活動的標準，其中SLE病情穩(wěn)定患者25例，病情活動患者35例。SLE患者符合以下之一并排除其他原因診斷為LN：①24 h尿蛋白定量＞0.5 g/L；②尿有細胞管型或顆粒管型；③腎穿刺活檢證實［7］。其中LN患者33例，非LN患者27例。其他風濕疾病組為本院風濕科住院的患者，女性23例，男性7例；年齡（39±14）歲。其中硬皮病4例，原發(fā)干燥綜合征3例，強直性脊柱炎4例，類風濕性關節(jié)炎9例，混合性結締組織病2例，白塞病2例，韋格納肉芽腫3例，未分化結締組織病3例，均符合各疾病相關的國際診斷或分類標準。其他腎臟疾病組為本院腎臟內科住院的患者，女性22例，男性8例；年齡（36±12）歲，包括慢性腎小球腎炎10例，原發(fā)性腎病綜合征6例，糖尿病腎病7例，IgA腎病5例，紫癜性腎炎2例，均排除狼瘡性腎損害。正常對照組30例，女性25例，男性5例；年齡（36±11）歲，均來自本院體檢健康人員。各組性別、年齡構成比比較，差異無統(tǒng)計學意義（χ2= 1.667，P=0.644；F=0.620，P=0.603）。

1.2實驗方法

抽取待測者清晨空腹靜脈血2～3 ml，3 500 r/min離心5 min，收集血清，置于-20℃冰箱快速冷凍備用。采用免疫透射比濁法檢測血清C1q濃度，實驗儀器為Beckman AU680全自動生化分析儀，C1q測定試劑盒購自上海北加生化試劑有限公司，嚴格按說明書進行操作；采用免疫速率散射比濁法檢測血清C3、C4和C-反應蛋白（C-reactive protein，CRP），試劑盒均購自美國Beckman Coulter有限公司；同時抽取待測者外周靜脈血2～3 ml，經(jīng)枸櫞酸鈉抗凝后及時進行改良魏氏法紅細胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）檢測。血清C1q濃度正常范圍在181.80～285.25 mg/L，以181.80 mg/L為正常下限，測定結果低于該值為本實驗設定的陽性結果。

1.3統(tǒng)計學方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，各組間均數(shù)比較用方差分析、t檢驗及配對t檢驗；計數(shù)資料以率表示，用χ2檢驗，相關關系用Pearson相關系數(shù)檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2.1各組人群血清C1q水平

SLE組、其他風濕疾病組、其他腎臟疾病組及正常對照組的血清C1q水平比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計學意義（F=41.428，P=0.000）。再通過LSD檢驗法進行兩兩比較，其中SLE組和其他風濕疾病組、其他腎臟疾病組、正常對照組血清C1q水平比較，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.000），SLE患者的血清C1q水平低于其他風濕疾病組、其他腎臟疾病組及正常對照組。見表1。

2.2各組人群血清C1q陽性率

SLE組、其他風濕疾病組、其他腎臟疾病組、正常對照組的C1q陽性檢出率分別為55%（33/60）、6.7%（2/30）、3.3%（1/30）和0.0%（0/30），經(jīng)χ2檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=53.052，P=0.000）。再通過兩兩比較，SLE組與其他風濕疾病組、其他腎臟疾病組、正常對照組的C1q陽性檢出率比較，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=19.660、22.713和26.053，P=0.000），SLE組的C1q陽性檢出率高于其他風濕疾病組、其他腎臟疾病組及正常對照組。見表2。

2.3血清C1q水平與LN的診斷

在SLE組中，LN患者與非LN患者的血清C1q水平分別為（168.78±33.37）和（201.40±44.96）mg/L，經(jīng)t檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（t=-4.262，P=0.000），LN患者的血清C1q水平低于非LN的SLE患者。LN組與非LN組患者的C1q陽性檢出率分別為66.7%（22/33）和40.7%（11/27），經(jīng)χ2檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.033，P=0.045），LN組的C1q陽性檢出率高于非LN組。C1q診斷LN的敏感性為66.7%，特異性為59.3%。工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）的曲線下面積（area under curve，AUC）為0.717，標準誤為0.067，其95%置信區(qū)間為（0.584，0.849）。見附圖。

2.4血清C1q水平與SLE疾病活動性

在SLE組中，活動期與穩(wěn)定期患者血清C1q、C3、C4水平比較，經(jīng)t檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（t=-5.159、-4.421和-3.883，P=0.000），活動期患者血清C1q、C3、C4水平均低于穩(wěn)定期患者?；顒悠谂c穩(wěn)定期患者血清CRP、ESR水平比較，經(jīng)t檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（t=3.006和2.062，P=0.004和0.044），活動期患者較穩(wěn)定期患者升高。相關性分析顯示，SLE患者血清C1q與C3、C4呈正相關（r=0.593和0.448，P=0.000），與SLEDAI積分呈負相關（r=-0.589，P= 0.000），而與CRP、ESR無相關性。見表3。

表1　各組血清C1q水平比較

表2　各組血清C1q陽性率比較

附圖　ROC曲線

表3　不同病情SLE患者血清C1q水平及其他活動指標比較 （±s）

表3　不同病情SLE患者血清C1q水平及其他活動指標比較 （±s）

組別ESR/（mm/h）病情活動組（n=35）　163.15±30.62　431.17±172.56　87.85±65.17　6.62±4.00　34.51±14.62病情穩(wěn)定組（n=25）　211.88±39.51　688.89±256.37　161.17±76.68　3.84±3.17　25.36±17.19 t值　-5.159　-4.421　-3.883　3.006　2.062 P值　0.000　0.000　0.000　0.004　0.044 C1q/（mg/L）C3/（mg/L）C4/（mg/L）CRP/（mg/L）

2.5活動期SLE患者治療前后血清C1q水平變化

本研究隨訪10例入院時病情處于活動期的SLE患者（SLEDAI積分≥10），治療1個月后病情均明顯緩解，患者的血清C1q、C3、C4水平及SLEDAI積分較1個月前比較，經(jīng)配對t檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.000）。見表4。

表4　活動期SLE患者治療1個月后各項指標比較（n=10，±s）

表4　活動期SLE患者治療1個月后各項指標比較（n=10，±s）

組別SLEDAI積分治療前　147.59±19.23 371.40±153.46　63.35±40.65　15.60±2.46治療后　190.37±13.87　613.80±75.33　152.79±48.43 10.70±2.20 t值　-6.738　-6.643　-6.278　11.308 P值　0.000　0.000　0.000　0.000 C1q濃度/ （mg/L）C3濃度/ （mg/L）C4濃度/ （mg/L）

3　討論

SLE是一種累及多系統(tǒng)、多器官、臨床表現(xiàn)復雜、病程遷延反復的自身免疫性疾病，多種自身抗體、循環(huán)免疫復合物的產生及補體系統(tǒng)的異常是其主要特征。LN是SLE累及腎臟所導致的免疫復合物介導性腎炎，是SLE最主要的并發(fā)癥和死亡原因之一［8］。5%～20%的LN患者在10年內可進展為終末期腎臟病（end-stage renal disease，ESRD）［9］。腎臟的受累情況直接影響SLE患者的預后。因此，早期診斷出SLE患者是否合并有腎臟病變，了解其是否處于活動期及其活動程度，對于SLE患者的治療指導和預后判斷具有重要意義。

C1q是分子量為460 kD的糖蛋白，共由6個亞單位組成的，每個亞單位中包含有N端的膠原樣序列及C端的球狀結構［10］。C1q作為補體經(jīng)典途徑起始成分C1的亞基，能夠結合多種配體，具有激活補體經(jīng)典途徑、清除病原體、免疫復合物、凋亡細胞及調理炎癥反應等多種功能［11］。早期大量臨床觀察和動物實驗均證實補體C1q的遺傳性缺陷是SLE的最強易感因素之一［12-13］。近來研究表明，C1q在SLE，尤其是LN的發(fā)病過程中起重要作用［2，14-15］。SLE患者中由于大量補體的異常激活，導致C1q的抗原決定簇膠原樣區(qū)暴露，從而形成相應的IgG型自身抗體即C1qAb［16］。當血清中C1qAb與C1q的膠原樣區(qū)結合，形成C1q-C1q抗體復合物，促進炎癥介質的釋放，導致組織損傷。同時C1q的消耗性減少影響補體系統(tǒng)的正常激活，使免疫復合物及凋亡小體不能有效地轉運清除，刺激機體免疫系統(tǒng)產生更多的抗體，出現(xiàn)疾病活動［17］。另外C1q不僅可以與C1q抗體作用，其還可作為主要的靶抗原與一系列的抗-DNA抗體交叉作用，形成免疫復合物沉積于腎臟，加重SLE患者的腎臟損害［18］。

雖然前期研究已肯定C1q與SLE疾病密切相關，但將C1q作為檢測指標輔助臨床SLE、LN診斷與疾病活動評估的研究國內報道較少。本研究檢測各組疾病患者血清C1q水平，比較發(fā)現(xiàn)，SLE患者的血清C1q濃度低于其他風濕疾病患者、其他腎臟疾病患者和正常人群，與TAN［3］、周濱等［4］的文獻報道一致。同時SLE組中LN患者的血清C1q水平低于非LN患者，進一步分析，C1q在SLE患者中診斷LN 的ROC曲線下面積為0.717，其單項診斷LN的敏感性為66.7%，特異性為59.3%，表明血清C1q水平與SLE患者的腎臟損害有相關性，其可作為診斷LN較好的血清指標。

本研究結果顯示，病情活動期患者C1q水平低于病情穩(wěn)定期患者。血清C1q與C3、C4及SLEDAI積分的相關系數(shù)（r=0.593、0.448和-0.589，P＜0.01。進一步證實C1q與SLE疾病活動相關，動態(tài)監(jiān)測血清C1q水平可有效反應SLE患者疾病的活動狀況。另外本研究還隨訪10例住院SLE患者，其在入院時處于病情活動期，伴有發(fā)熱、關節(jié)痛、腎損害等相關臨床癥狀，隨著治療的有效進展，1個月后病情得到明顯緩解，復查血清C1q均值高于治療前水平，同時患者SLEDAI評分、C3、C4水平等指標在治療前后也出現(xiàn)變化，與患者臨床癥狀好轉相符合。其可能原因是當體內炎癥免疫反應趨于緩解時，免疫復合物形成減少，C1q濃度回升。

綜上所述，血清C1q水平與SLE患者及其腎臟損害相關，對SLE患者進行血清C1q濃度測定，有助于SLE及LN的診斷。同時在SLE患者中，病情活動期患者血清C1q濃度降低，隨著治療的有效進行，病情緩解，血清C1q水平回升，所以監(jiān)測血清C1q水平的變化，可以為SLE患者病情活動及療效評估提供可靠依據(jù)。

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（童穎丹 編輯）

Significance of detecting serum C1q level in diagnosis of systemic lupus erythematosus with lupus flare and lupus nephritis

Jia-xin Wang，Zhi-dan Zhao，Bai-yun Zhong，Ting-yan Xie，Qiu-huan Zhang，Si-si Feng，Hui Deng
（Department of Clinical Laboratory，Xiangya Hospital，Central South University，Changsha，Hunan 410008，China）

Objective To explore the serum level of complement 1q（C1q）in systemic lupus erythematosus patients and to analyze its significance in diagnosis and prognosis of systemic lupus erythematosus with lupus flare and lupus nephritis（LN）.Methods According to the clinical data，150 cases of subjects were divided into four groups.There were 60 cases in SLE group，30 cases in other rheumatic disease group，30 cases in other kidney disease group and 30 cases in normal control group.The SLE group contained 33 cases of LN patients and 27 cases of non-LN patients.The serum level of C1q was measured by immune transmission turbidimetry.The correlations between the serum level of C1q and other disease activity parameters such as SLEDAI scores，C3 and C4 levels were analyzed.Results The serum level of C1q in the SLE group was significantly lower than that of the other rheumatic disease group，the other kidney disease group and the normal control group（F=41.428，P=0.000）.The LN patients showed a significantly lower level of serum C1q than the non-LN patients（t=-4.262，P=0.000）.The SLE patients in active stage showed a significantly lower level of serum C1q than the stable patients（t=-5.159，P=0.000）.The sensitivity and specificity of C1q to diagnose LN in the SLE group were 66.7%and 59.3%respectively.The area under ROC curve was 0.717.Correlation analysis showed that the serum level of C1q was positively correlated with C3 and C4 concentrations but negatively correlated with the SLEDAI scores（r=0.593，0.448 and-0.589 respectively，andP= 0.000）.Conclusions C1q may not only contribute to the diagnosis of SLE and LN，but also reflect the disease activity and treatment effect.

systemic lupus erythematosus；lupus nephritis；complement 1q；immunity transmission turbidity

R593.241

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.09.011

1005-8982（2016）09-0054-05

2015-12-28

鐘白云，E-mail：zbycsu@hotmail.com