漆酶在石油污染土壤中生物修復(fù)的研究

關(guān)婧竹（鐵嶺市林業(yè)局，遼寧鐵嶺 112000）

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漆酶在石油污染土壤中生物修復(fù)的研究

關(guān)婧竹
（鐵嶺市林業(yè)局，遼寧鐵嶺 112000）

摘 要：文章通過(guò)研究不同油濃度污染土壤，經(jīng)過(guò)生物修復(fù)后土壤中的漆酶活性變化。結(jié)果表明：隨著油濃度的增加，土壤中漆酶的活性下降，土壤漆酶活性變化受油濃度影響顯著，不同濃度油污染土壤的修復(fù)，對(duì)漆酶都是呈上升趨勢(shì)。

關(guān)鍵詞：漆酶 土壤酶活性 生物修復(fù) 石油 污染土壤

土壤是人類(lèi)賴(lài)以生存的自然資源，土壤環(huán)境一旦受到污染，其治理和恢復(fù)比大氣及水困難得多。生物修復(fù)是利用生物技術(shù)治理污染土壤的一種新方法。近年來(lái)，國(guó)際上對(duì)生物修復(fù)的研究十分活躍，有些國(guó)家已將此技術(shù)用于污染土壤的實(shí)際修復(fù)，并取得了顯著的成果［1］。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試品：20#重柴油。

供試土壤：試驗(yàn)田0～20 cm表層草甸棕壤（表1、2）。

供試植物：草木樨狀黃耆，多年生草本。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)用Ф15 cm×20 cm陶瓷盆，每盆3 kg土。水分25%（80 ml水），細(xì)菌按60%的水分，稱(chēng)重。周期125 d。進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，選擇水土比，溫度，pH值，反應(yīng)的時(shí)間最佳的試驗(yàn)條件。

表1 土壤理化性質(zhì)測(cè)定結(jié)果

表2 土壤理化性質(zhì)測(cè)定結(jié)果 　　（mg/100 g）

表3 不同油濃度污染土壤實(shí)施方案

表4 在不同油濃度下每個(gè)周期漆酶的活性

表5 漆酶活性與油濃度的相關(guān)分析

步驟1.取10 g土樣，加入25 ml蒸餾水，空氣震蕩浴150轉(zhuǎn)/min，25℃振蕩24 h取出。

步驟2.將混合溶液置于離心機(jī)中，8000轉(zhuǎn)/min離心5 min。

步驟3.將上清液過(guò)中速濾紙。

步驟4.取3 ml用0.2 mmol的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液配置的0.05 mmol的ABTS。

步驟5.將步驟3液體置于30℃水浴10 min，取3 ml該液體與3 mlABTS在旋渦混勻器中混勻5秒鐘，倒入比色杯中，置于420 nm的分光光度計(jì)中，記錄：初始吸光度值、1分鐘、2分鐘、3分鐘吸光度值。

2 結(jié)果與分析

由表4可知，在沒(méi)有修復(fù)前，各個(gè)油濃度的土壤漆酶活性普遍不高，只有2 g/kg油濃度時(shí)，漆酶活性較高；修復(fù)的第1個(gè)周期，漆酶在低油濃度有活性，在20 g/kg和50 g/kg漆酶無(wú)活性；第2個(gè)周期，各油濃度漆酶都有一定的活性；第3個(gè)周期，各油濃度漆酶活性都有提高，只有5 g/kg因其他因素測(cè)不到漆酶活性。

在未污染土壤中，3個(gè)周期漆酶活性變化不大；在2 g/kg油濃度本底值較高在第1周期下降，第2、第3周期有明顯上升；在5 g/kg油濃度漆酶活性變化不大，在10 g/kg、30 g/kg、50 g/kg漆酶活性，都是后一個(gè)比前一個(gè)周期有明顯提高，從整體看，低油濃度的土壤比高油濃度的土壤漆酶活性高。

由表5可知，土壤中漆酶活性變化很大，最大均值達(dá)到6.42，其中2 k/kg油濃度時(shí)，活性達(dá)到36.85，而最小的時(shí)候，測(cè)不到酶活。雙因素方差分析表明，漆酶活性變化受油濃度影響顯著。

3 結(jié)論

在植物修復(fù)前，隨著土壤中污染物油濃度的增加，土壤中漆酶活性下降。經(jīng)過(guò)生物修復(fù)后，土壤中的漆酶活性在第2周期要比第1周期高。土壤漆酶活性變化，受油濃度影響顯著，但不同濃度油污染土壤的漆酶活性是呈上升趨勢(shì)的。

參考文獻(xiàn)

［1］ 呂桂芬，趙吉，趙利，廖仰南.應(yīng)用土壤酶活性評(píng)價(jià)草原石油污染的初步研究.內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），1997，28（05）：687～691

［2］ 康從寶，劉巧，李清心，曲音波，高培基.中國(guó)生物化學(xué)與分子.生物學(xué)報(bào)，200 2，18（05）：638～642

［3］ 何為，詹懷宇，王習(xí)文，伍紅.一種改進(jìn)的漆酶酶活檢測(cè)方法.華南理工大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2003，（12）：46～49