血清鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶活性與正常高值血壓患者左室重構(gòu)的相關(guān)性

王凌玲　雷夢覺　周桂秀　胡　杰　龔愛斌　魏偉榮

(江西省人民醫(yī)院干部病房心內(nèi)二科，江西　南昌　330006)

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血清鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶活性與正常高值血壓患者左室重構(gòu)的相關(guān)性

王凌玲雷夢覺周桂秀1胡杰龔愛斌魏偉榮

(江西省人民醫(yī)院干部病房心內(nèi)二科，江西南昌330006)

〔摘要〕目的探討血清鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)在正常高值血壓患者左室重構(gòu)中的表達(dá)水平。方法共選取健康體檢人群282例。根據(jù)血壓分為正常血壓組(n=78)；正常高值血壓組(n=122)；高血壓組(n=82)；再將正常高值血壓組根據(jù)左室質(zhì)量指數(shù)(LVMI)和相對(duì)室壁厚度(RWT)值分為正常構(gòu)型亞組(n=101)、左室重構(gòu)亞組(n=21)。采用超聲心動(dòng)圖測定計(jì)算LVMI、RWT；酶聯(lián)免疫法測定血清CaN水平；比色法測定血清CaN活性；放射免疫法測定血清內(nèi)皮素(ET)-1，分析其與正常高值血壓左室重構(gòu)的關(guān)系。結(jié)果①在正常血壓組、正常高值血壓組、高血壓組中，左室重構(gòu)發(fā)生率分別為7.82%、17.21%、22.35%；LVMI、RWT、血清CaN活性、ET-1水平依次升高(P<0.05)。相對(duì)于高血壓組與正常高值血壓組的比較，正常高值血壓組與正常血壓組比較差異顯著(P<0.01)。②左室重構(gòu)亞組血清CaN活性、ET-1均高于正常構(gòu)型亞組(P<0.05)。結(jié)論正常高值血壓左室重構(gòu)發(fā)生率、CaN活性明顯高于正常血壓?；罨腃aN促進(jìn)了正常高值血壓左室重構(gòu)的發(fā)生發(fā)展。

〔關(guān)鍵詞〕鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶；正常高值血壓；左室重構(gòu)；內(nèi)皮素-1

鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)是一種高度保守的Ca2+/鈣調(diào)素依賴性異源二聚體絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶，由一個(gè)催化亞基(CaNA)和一個(gè)調(diào)節(jié)亞基(CaNB)組成〔1〕。在高血壓中以CaN為起始的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)在左室重構(gòu)發(fā)生發(fā)展過程中起著非常重要的作用〔2〕。正常高值血壓非常普遍，是發(fā)生高血壓的高危人群，其發(fā)生率甚至超過高血壓〔3〕，常伴隨多種心血管危險(xiǎn)因素〔4〕。左室重構(gòu)是正常高值血壓最常見亞臨床病變之一〔5〕，與心血管病死亡風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)，體液因子內(nèi)皮素(ET)-1，可促進(jìn)左室肥厚〔6〕。但目前左室重構(gòu)的分子機(jī)制還不清楚，本研究針對(duì)血清CaN活性在正常高值血壓左室重構(gòu)中的作用進(jìn)行初步探討。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象入選對(duì)象為2011年2月至2014年1月在江西省人民醫(yī)院門診健康體檢人群。所有入選者均未接受過任何降壓及抗血小板藥物治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：有明確的糖尿病、冠心病、腦卒中、慢性腎臟疾病、非高血壓性心臟病(如瓣膜性心臟病、肺源性心臟病、甲亢性心臟病、先天性心臟病、心肌病等)以及其他嚴(yán)重的器質(zhì)性病變。本研究共入選研究對(duì)象282例，分為3組：正常血壓組78例，男41例，女37例，年齡50～73〔平均(61.32±6.11)〕歲；正常高值血壓組122例，男68例，女54例，年齡50～73〔平均(62.15±6.36)〕歲；高血壓組82例，男45例，女37例，年齡50～73〔平均(62.63±6.33)〕歲；再將正常高值血壓組根據(jù)左室質(zhì)量指數(shù)(LVMI)和相對(duì)室壁厚度(RWT)值分為2個(gè)亞組：正常構(gòu)型亞組101例、左室重構(gòu)亞組21例。

1.2血壓的測量和診斷由經(jīng)過培訓(xùn)的醫(yī)生和護(hù)士使用臺(tái)式水銀血壓計(jì)，參考《中國高血壓防治指南2010》進(jìn)行血壓測量。要求所有入選者在測量前30 min內(nèi)禁止吸煙或飲咖啡，排空膀胱，取坐位安靜休息至少10 min以上，裸露右上臂，上臂與心臟處在同一水平，測量右上臂血壓3次，每次間隔1 min，以3次測量的平均值作為被測對(duì)象的血壓值。血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)按《中國高血壓防治指南2010》：①高血壓：在未服用降壓藥的情況下收縮壓≥140 mmHg 和(或)舒張壓≥90 mmHg，既往有高血壓史，目前正使用降壓藥物，血壓雖未達(dá)到上述水平，也診斷為高血壓；②正常高值血壓：收縮壓120～139 mmHg和(或)舒張壓80～89 mmHg；③正常血壓：收縮壓<120 mmHg 和舒張壓<80 mmHg。

1.3生化指標(biāo)的檢查本研究所有標(biāo)本均在我院同一臺(tái)日本日立7600全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測，采集禁食12 h后的靜脈血，測定血甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、空腹血糖(FPG)的水平。

1.4超聲心動(dòng)圖檢測均在我院檢測。儀器為美國GE公司生產(chǎn)的730型彩色多普勒超聲診斷儀。取胸骨旁左心室長軸切面，以美國超聲心動(dòng)描記學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)測定左室舒張末期內(nèi)徑(LVDED)、室間隔厚度(IVST)和左心室后壁厚度(LVPWT)，均測量3個(gè)心動(dòng)周期，取平均值。根據(jù)校正的Devereux公式計(jì)算LVMI、RWT：左室重構(gòu)的診斷標(biāo)準(zhǔn)：LVMI≥125 g/m2(男性)或≥120 g/m2(女性)和(或)RWT≥0.44。

1.5血清CaN水平、CaN活性及ET-1測定均在我院檢測。所有入選者采集禁食12 h后靜脈血，6～10 ml離心機(jī)(3 000 r/min)離心分離血清，快速凍存于-75℃冰箱。①血清CaN水平及其活性測定：血清CaN水平采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定；CaN活性采用比色法測定，儀器為荷蘭Thermo生產(chǎn)的MULTISKAN MK3型酶標(biāo)儀，試劑盒由USCNLIFE提供，按試劑盒說明書進(jìn)行測定。②ET-1測定：采用放射免疫法測定，儀器為科大創(chuàng)新股份有限公司生產(chǎn)的GC-1200型γ放射免疫計(jì)數(shù)器SN-682型γ計(jì)數(shù)器，試劑盒由北京東亞免疫技術(shù)研究所提供。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)的組間比較進(jìn)行t及χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1左室重構(gòu)發(fā)生率的比較在正常血壓組、正常高值血壓組、高血壓組3組中，左室重構(gòu)發(fā)生率分別為7.82%、17.21%、22.35%，差異顯著(P<0.05)。正常高值血壓組與正常血壓組比較差異更具有顯著性(P<0.01)。

2.23組臨床資料的比較3組年齡、性別、體重指數(shù)(BMI)、FPG、TC、LDL-C、TG、CaN水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在正常血壓組、正常高值血壓組、高血壓組3組中，LVMI、RWT、血清ET-1濃度、CaN活性依次升高(P<0.05)。相對(duì)于高血壓組與正常高值血壓組的比較，正常高值血壓組與正常血壓組比較差異更顯著(P<0.01)。見表1。

2.32亞組血清CaN水平、CaN活性及ET-1的比較左室重構(gòu)組血清CaN活性、ET-1均高于正常構(gòu)型組(P<0.05)。而兩組CaN水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表1　3組臨床資料的比較

與正常血壓組比較：1)P<0.01；與正常高值血壓組比較：2)P<0.05

表2　2亞組血清CaN水平、CaN活性及ET-1的比較

與正常構(gòu)型組比較：1)P<0.05

3討論

國內(nèi)外多項(xiàng)研究表明，正常高值血壓發(fā)生率較高，且會(huì)使總心血管病事件的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加，這部分人群心腦血管疾病的患病率及死亡率均較正常血壓者明顯升高〔7～9〕。這必將對(duì)未來心血管疾病的防治帶來嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)。左室重構(gòu)是高血壓重要的靶器官損害和并發(fā)癥，是心力衰竭、心律失常、猝死的重要危險(xiǎn)因素〔10〕。Drukteinis等〔11〕對(duì)1 940名體檢者研究發(fā)現(xiàn)，高血壓前期就已有左心室結(jié)構(gòu)和功能的改變，即使是年輕人的高血壓前期或高血壓都會(huì)引起左心室肥厚，與正常血壓相比，高血壓前期左室肥厚患病率多2倍。Stabouli等〔12〕研究也發(fā)現(xiàn)高血壓組、高血壓前期組左室質(zhì)量指數(shù)較正常血壓組明顯增加，高血壓前期組左室肥厚的趨勢較正常血壓組明顯升高，幾乎等同于高血壓組。本研究與上述研究一致，發(fā)現(xiàn)正常血壓組、正常高值血壓組、高血壓組左室重構(gòu)發(fā)生率依次升高，且相對(duì)于正常高值血壓組與高血壓組之間的差異，正常高值血壓組與正常血壓組之間的差異更顯著。從本研究中還可以看出，正常血壓組、正常高值血壓組、高血壓組中LVMI、RWT依次升高。相對(duì)于高血壓組與正常高值血壓組的比較，正常高值血壓組與正常血壓組比較差異更具有顯著性。由此證實(shí)正常高值血壓加速了左心室重構(gòu)的發(fā)生、發(fā)展。

目前對(duì)左室重構(gòu)的分子機(jī)制還不清楚，但從細(xì)胞水平可分為3個(gè)環(huán)節(jié)：胞外的肥大刺激信號(hào)，胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及核內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄的活化。胞外的肥大刺激信號(hào)主要有牽拉刺激、激素信號(hào)、體液因子，這些信號(hào)激活多條信號(hào)通路，最終導(dǎo)致心肌肥厚。既往研究證實(shí)體液因子ET-1能夠促進(jìn)心肌細(xì)胞生長和膠原合成，引起左室肥厚〔13〕。胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是胞外肥大刺激信號(hào)與核內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄活化的耦聯(lián)環(huán)節(jié)，對(duì)心肌重構(gòu)的發(fā)生、發(fā)展起到重要作用。胞內(nèi)Ca2+濃度升高是心肌肥大的一個(gè)信號(hào)，體外心肌細(xì)胞培養(yǎng)研究證實(shí)Ca2+活化的CaN信號(hào)通路在心肌重構(gòu)中起重要作用〔14〕。CaN是一種高度保守的Ca2+/鈣調(diào)素依賴性異源二聚體絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶，由一個(gè)催化亞基(CaNA)和一個(gè)調(diào)節(jié)亞基(CaNB)組成〔1〕。CaN主要分布在細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，當(dāng)各種刺激引起的細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高，促使CaN活化，繼而使其下游信號(hào)因子T細(xì)胞核因子活化轉(zhuǎn)位入細(xì)胞核，調(diào)節(jié)心臟中心鈉肽、腦鈉肽、β重鏈肌球蛋白等肥大基因特異性表達(dá)〔15〕，導(dǎo)致心肌細(xì)胞蛋白核酸合成增加，心肌細(xì)胞體積增大，形成心肌肥大。因此心肌肥厚發(fā)生發(fā)展過程中，以CaN為起始的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)起重要作用。本研究證實(shí)在正常高值血壓患者就已經(jīng)出現(xiàn)左室重構(gòu)分子基因水平的改變。本研究說明在正常高值血壓的患者中體液因子ET-1促使CaN活化，活化的CaN 促進(jìn)了左室重構(gòu)的發(fā)生、發(fā)展。而各組血清CaN水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，考慮有兩種可能：①血清中的CaN水平還不能完全代表心肌細(xì)胞中的CaN濃度；②只有活化的CaN才有促進(jìn)左室重構(gòu)的發(fā)生、發(fā)展的作用。

綜上所述，正常高值血壓人群存在多種危險(xiǎn)因素，左室重構(gòu)發(fā)病率明顯高于正常血壓人群。以活化CaN為起始的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)在正常高值血壓左室重構(gòu)發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用。實(shí)踐中檢查、監(jiān)測心肌組織CaN水平和活性難以實(shí)施，而血樣本易獲得、可重復(fù)、便于跟蹤隨訪。如臨床上在正常高值血壓時(shí)期就有效的控制左室重構(gòu)的發(fā)生、發(fā)展，可從根本上減少心血管事件的發(fā)生率和病死率。將高血壓的控制點(diǎn)提前，不僅體現(xiàn)了一級(jí)預(yù)防與二級(jí)預(yù)防的融合，也為全面實(shí)施人群心血管疾病控制策略提供了一個(gè)嶄新的理念。

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〔2013-10-10修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢園)

基金項(xiàng)目：江西省衛(wèi)生廳科技計(jì)劃資助項(xiàng)目(20123014)

〔中圖分類號(hào)〕R544.1

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)12-2894-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.031

1江西省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科

第一作者：王凌玲(1973-)，女，副主任醫(yī)師，碩士，主要從事高血壓研究。