比較嬰兒血液和母乳中人巨細(xì)胞病毒檢測在診斷嬰兒感染中的價值

葛存興　趙晶　王宏志

【摘要】 目的 通過對嬰兒血液和母乳中人巨細(xì)胞病毒（HCMV）定量檢測， 為臨床兒科醫(yī)生診斷HCMV感染選擇合適送檢標(biāo)本提供依據(jù)。方法 選取疑似HCMV感染嬰幼兒的血液及母乳標(biāo)本各220例， 應(yīng)用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法（FQ-PCR）進(jìn)行定量檢測， 比較兩種標(biāo)本的陽性率。結(jié)果 220例母乳標(biāo)本的HCMV-DNA陽性率58.18%（128/220）明顯高于嬰兒血液標(biāo)本的陽性率4.55%（10/220）（P<0.01）。結(jié)論 對疑似HCMV感染的嬰兒， 送檢患兒母乳標(biāo)本可提高HCMV-DNA的陽性率， 防止漏診， 做到早診斷、早治療。

【關(guān)鍵詞】 人巨細(xì)胞病毒；血液；母乳

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.064

HCMV又稱為涎病毒， 屬皰疹病毒科， 是人類皰疹病毒中最大的一種病毒， 這種病毒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)會導(dǎo)致細(xì)胞增大， 又稱巨細(xì)胞病毒。HCMV是造成嬰幼兒發(fā)生系統(tǒng)感染的最常見、最主要的病原體[1]。臨床表現(xiàn)以黃疸、肝脾腫大、血小板減少性紫癜、氣促、發(fā)紺等消化道和呼吸道癥狀為主。本文通過比較疑似HCMV感染患兒血液及其母乳， 兩種不同送檢標(biāo)本的HCMV-DNA定量檢測， 統(tǒng)計兩種標(biāo)本的陽性率， 為臨床醫(yī)生診斷HCMV感染選擇合適送檢標(biāo)本提供依據(jù)。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集2015年3～11月本院兒科門診及病房疑似HCMV感染患兒的血液及其母乳標(biāo)本各220例， 其中男141例， 女79例， 年齡6～60 d。疑似HCMV感染患兒臨床表現(xiàn)為新生兒黃疸、小頭畸形、血小板減少性紫癜、肝脾腫大、肝炎綜合征、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病等相關(guān)的癥狀和體征。

1. 2 方法 應(yīng)用FQ-PCR進(jìn)行定量檢測。

1. 2. 1 標(biāo)本采集 采集患兒2 ml靜脈血；母乳采用擠壓法留取乳汁5 ml置于無菌密閉試管內(nèi)， 將兩種標(biāo)本及時送檢。

1. 2. 2 儀器與試劑 儀器使用美國ABI7300熒光核酸定量擴增儀， 檢測HCMV試劑由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供。操作步驟嚴(yán)格按照儀器使用說明書和試劑說明書進(jìn)行， 檢測結(jié)果以>1.00E+003 copies/ml作為陽性標(biāo)本。

1. 2. 3 質(zhì)量控制 每批樣本檢測除4個標(biāo)準(zhǔn)品外， 另外加入陰、陽性對照及室內(nèi)質(zhì)控品各1例， 并且只有標(biāo)準(zhǔn)品、對照品及室內(nèi)質(zhì)控均在范圍內(nèi)才可發(fā)臨床報告， 以便保證檢驗結(jié)果的可靠性。

1. 3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

220例患兒血液標(biāo)本中檢測出HCMV-DNA陽性10例， 陽性率為4.55%。母乳標(biāo)本檢出陽性128例， 陽性率58.18%， 兩種標(biāo)本檢測HCMV-DNA陽性率比較， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見表1。

3 討論

HCMV屬皰疹病毒科， 是皰疹病毒家族中的重要成員之一， 可引起人類巨細(xì)胞感染， 在我國巨細(xì)胞病毒感染廣泛流行[2]。通常情況下很多正常人身上都潛伏有巨細(xì)胞病毒， 常潛伏在唾液腺、乳腺、腎臟、子宮頸等腺體中。在大多數(shù)免疫正常個體是無癥狀感染， 而在免疫抑制個體、胎兒、新生兒如果感染可出現(xiàn)明顯病癥[3]， HCMV感染分先天性和獲得性感染， 先天性感染表現(xiàn)為肝脾腫大、持續(xù)性黃疸、皮膚瘀點、小頭畸形、智力低下和運動障礙等。獲得性感染多為自限性疾病， 臨床表現(xiàn)一般較輕， 雖然多數(shù)嬰幼兒為亞臨床感染， 但其癥狀的發(fā)生率仍高于成年人。嬰兒感染后應(yīng)該進(jìn)行早期診斷、及時治療以免延誤病情， 對患兒造成更大的傷害。目前對HCMV感染的診斷除了根據(jù)患者的臨床癥狀外， 病毒分離和培養(yǎng)是診斷的金標(biāo)準(zhǔn)[4]， 但由于該項目技術(shù)要求高、價格貴、時間長等原因不適合在臨床應(yīng)用。同時血清學(xué)免疫球蛋白M（IgM）檢出率低， 不適合早期檢測。HCMV-DNA檢測技術(shù)可提高檢測靈敏度和特異性， 比較適用于嬰幼兒HCMV感染檢測及治療效果觀察， 是較好的診斷指標(biāo)[5]。

本次研究分別收集220例6～60 d疑似HCMV感染嬰兒血液及其母親乳汁同時進(jìn)行HCMV-DNA檢測， 檢測結(jié)果顯示母乳陽性率為58.18%（128/220）高于嬰兒血液陽性率4.55%

（10/220）（P<0.01）。這與國內(nèi)其他文獻(xiàn)報道相近[6]。檢出的10例

HCMV-DNA陽性嬰兒的母乳HCMV-DNA也都為陽性， 并且檢測數(shù)值要高于嬰兒血液數(shù)值， 表明患兒HCMV感染源來自于母親乳汁。分析原因可能是哺乳期女性發(fā)生HCMV感染或復(fù)發(fā)， 通過母乳喂養(yǎng)含有HCMV的乳汁使嬰兒感染， 這也是嬰兒感染HCMV的重要傳播途徑[7]。母乳檢出的128例陽性中有128例嬰兒血液結(jié)果為陰性， 分析原因一方面可能與母乳中HCMV含量高低及嬰兒的個體差異有關(guān)， 母乳中含量高的傳染力相對較強， 嬰兒的免疫力弱的被感染的可能性較大。第二方面可能與嬰兒母乳喂養(yǎng)的時間有關(guān)。本次研究嬰兒年齡最小6 d， 母乳喂養(yǎng)時間短。所以嬰兒血液中未查出HCMV-DNA。對于單獨母乳HCMV-DNA檢測指標(biāo)高應(yīng)停止母乳喂養(yǎng)；如繼續(xù)母乳喂養(yǎng)， 應(yīng)該檢測母乳的HCMV-DNA， 當(dāng)檢測結(jié)果為正常時可繼續(xù)喂養(yǎng)， 并且要定期復(fù)檢。

綜上所述， 對疑似HCMV感染嬰兒除送檢患兒血液外更應(yīng)該選擇送檢陽性率高的母乳， 可以提高HCMV-DNA的檢出率， 以免造成漏診， 耽誤病情。

參考文獻(xiàn)

[1] 陳倩， 鐘天鷹， 張其華.熒光定量PCR法檢測母乳巨細(xì)胞病毒感染和母嬰傳播.中國優(yōu)生與遺傳雜志， 2005， 13（11）：42-43.

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[3] Lin YH， Yeh CY. Recurrent cytomegalovirus colitis with megacolon in an immunocompetent elder man. J Med Virol， 2010， 82（4）：638-641.

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[6] 徐莉莉， 牟文鳳， 楊麗， 等.嬰兒血液、尿液及母乳中病毒DNA

檢測在診斷HCMV感染中的應(yīng)用.中國當(dāng)代兒科雜志， 2013， 15（9）：748-750.

[7] Alkhawaja S， Ismaeel A， Botta G， et al. The prevalence of congential and perinatal cytomegalovirus infections among newborns of seropositive mothers. J Infect Dev Ctries， 2012， 6（5）：410-415.

[收稿日期：2016-01-21]