CD16+56+、CD19+、NKT水平表達(dá)在原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)中的影響

梁逸仙　林春明　葉錦俊

【摘要】 目的 探討CD16+56+、CD19+、自然殺傷T細(xì)胞（NKT）在原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（URSA）中的表達(dá)情況。方法 30例URSA患者作為觀(guān)察組， 30例正常女性作為對(duì)照A組， 30例正常妊娠孕婦作為對(duì)照B組， 對(duì)比三組研究對(duì)象外周血液中淋巴細(xì)胞的表達(dá)情況。結(jié)果 觀(guān)察組CD16+56+、CD19+、NKT水平均明顯高于對(duì)照A組和對(duì)照B組（P<0.05）。結(jié)論 CD16+56+、CD19+、NKT的高表達(dá)在URSA中有著重要意義， 為孕婦的診斷和治療提供依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)；CD16+56+；CD19+；自然殺傷T細(xì)胞

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.013

【Abstract】 Objective To investigate expression of CD16+56+， CD19+ and nature killer T cells （NKT） in unexplained recurrent spontaneous abortion （URSA）. Methods There were 30 URSA patients as observation group， 30 normal women as control group A and 30 normal pregnant women as control group B. Comparison was made on expression of peripheral blood lymphocyte in three groups. Results The observation group had obviously higher CD16+56+， CD19+ and NKT levels than control groups A and B （P<0.05）. Conclusion High expression of CD16+56+， CD19+ and NKT contains important significance in URSA， and they can provide reference for diagnosis and treatment.

【Key words】 Unexplained recurrent spontaneous abortion； CD16+56+； CD19+； Nature killer T cells

NKT是一種具有兩面性的T細(xì)胞亞群， 其主要的功能是進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)作用， 如若NKT受到刺激之后會(huì)立即分泌大量的巨噬細(xì)胞、γ-干擾素等發(fā)揮調(diào)節(jié)作用[1]。在URSA的檢測(cè)中CD16+56+是檢測(cè)該種T細(xì)胞亞群的主要標(biāo)志， 本文就對(duì)URSA患者外周血樣中CD16+56+、CD19+、NKT指標(biāo)的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2014年7月～2015年9月收治的URSA患者共30例作為觀(guān)察組， 年齡22～38歲， 平均年齡（28.6±4.6）歲， 平均體重（53.9±5.2）kg；選取同期進(jìn)行檢查的正常女性和正常妊娠婦女各30例分別作為對(duì)照A組與對(duì)照B組， 對(duì)照A組平均年齡（28.4±5.2）歲， 平均體重（57.5±5.7）kg；對(duì)照B組平均年齡（29.6±6.5）歲， 孕周4～20周， 平均孕周（12.3±2.0）周。觀(guān)察組入選標(biāo)準(zhǔn)：患者流產(chǎn)次數(shù)≥3次， 對(duì)夫妻的染色體進(jìn)行分析和內(nèi)分泌激素檢測(cè)結(jié)果均正常；無(wú)陰道感染性疾病、陰道畸形等病癥， 對(duì)患者的丈夫或固定性關(guān)系者的精液進(jìn)行分析確保為健康者。觀(guān)察組排除標(biāo)準(zhǔn)：排除上述情況以外的所有重復(fù)性流產(chǎn)的患者， 藥物流產(chǎn)的患者及受傷等原因?qū)е铝鳟a(chǎn)的患者。

1. 2 檢測(cè)設(shè)備及試劑 實(shí)驗(yàn)中所使用的細(xì)胞檢測(cè)儀是由美國(guó)BD公司生產(chǎn)的FACSCalibur流式細(xì)胞儀；TBNK檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自美國(guó)BD公司， 試劑批號(hào)：溶血?jiǎng)?201886， 破膜劑3321244， TBNK3126647， 鞘液3103115。

1. 3 方法 所有檢測(cè)標(biāo)本， 于清晨空腹抽取靜脈血獲得， 并與15% EDTA二鈉進(jìn)行抗凝， 定容至2 ml， 取適量標(biāo)本行前期處理后于BD流式細(xì)胞儀上機(jī)檢測(cè)CD16+56+、CD19+、NKT水平， 均用鞘流流式細(xì)胞儀法進(jìn)行測(cè)定。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀(guān)察組CD16+56+、CD19+、NKT水平均明顯高于對(duì)照A組和對(duì)照B組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

3 討論

URSA患者病因多未查明， 給治療帶來(lái)很多的困擾， 目前在該類(lèi)患者的診斷檢測(cè)和治療方面均沒(méi)有非常有效的措施， 但是在大量的研究中發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞和T細(xì)胞的表達(dá)情況與習(xí)慣性流產(chǎn)（RSA）發(fā)病相關(guān)聯(lián)。

科學(xué)研究表明[2]， NK細(xì)胞所占的比例與女性的URSA發(fā)病有直接的聯(lián)系， 通過(guò)對(duì)患者外周靜脈血液中的NK細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記檢測(cè)發(fā)現(xiàn)， 其中CD16+56+約占90%以上的比例。該種細(xì)胞中存在很多的溶細(xì)胞顆粒， 對(duì)于妊娠期孕婦的胚胎不僅有排斥作用， 甚至有可能直接進(jìn)行殺傷， 所以會(huì)出現(xiàn)重復(fù)流產(chǎn)的現(xiàn)象[3， 4]。本次實(shí)驗(yàn)中觀(guān)察組患者的CD16+56+表達(dá)量均明顯高于正常未孕者和正常妊娠人群， 針對(duì)有RSA病史的未孕者其該種細(xì)胞的表達(dá)量較高的原因， 可以解釋為由于某種潛在的致病因素影響所致。

CD19+是B細(xì)胞檢測(cè)的共有標(biāo)志， 相關(guān)的研究資料結(jié)果顯示URSA患者其外周血液中的CD19+表達(dá)量會(huì)相對(duì)更高， 但是目前在該方面意見(jiàn)還未達(dá)成一致[5]， 鑒于此本次實(shí)驗(yàn)分別對(duì)3種類(lèi)型的研究對(duì)象抽樣檢測(cè)， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)有URSA史或者難免會(huì)出現(xiàn)流產(chǎn)的孕婦其血樣中的CD19+表達(dá)量相較于正常妊娠或者正常女性的表達(dá)量明顯較高（P<0.05）。

NKT細(xì)胞是20世紀(jì)80年代發(fā)現(xiàn)的一種表達(dá)T細(xì)胞表面受體的細(xì)胞， 具有高度的CD1d限制性， 該細(xì)胞在接受抗原刺激后， 在2 h內(nèi)就有大量的細(xì)胞因子產(chǎn)生。在張旸[6]研究中發(fā)現(xiàn)正常妊娠的滋養(yǎng)層NKT細(xì)胞數(shù)量會(huì)隨著妊娠進(jìn)行而下降， 而在自發(fā)性流產(chǎn)中， NKT細(xì)胞數(shù)量隨著妊娠的進(jìn)行而呈上升趨勢(shì)， 這與本文研究結(jié)果相一致， 表明NKT細(xì)胞數(shù)量的增加成熟在URSA過(guò)程中具有重要意義。

綜上所述， 在 URSA患者的外周血液中其CD16+56+、CD19+、NKT指標(biāo)的水平表達(dá)均明顯升高， 因此推測(cè)其可能直接參與URSA病變過(guò)程， 從而為孕婦的診斷和治療提供相關(guān)的理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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[收稿日期：2016-01-14]