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    辣椒素對(duì)小鼠免疫功能的影響

    2016-06-25 19:16:29歐陽(yáng)日威張琪曾慧黃祺劉思思楊將
    科教導(dǎo)刊·電子版 2016年14期
    關(guān)鍵詞:辣椒素免疫功能小鼠

    歐陽(yáng)日威+張琪+曾慧+黃祺+劉思思+楊將

    摘 要 辣椒素具有多種藥理生理學(xué)活性,對(duì)某些含有 P-物質(zhì)的感覺(jué)神經(jīng)系統(tǒng)、 心血管、體溫調(diào)節(jié)、胃腸機(jī)能有顯著影響;具有消炎止痛止癢、促進(jìn)脂肪代謝及保護(hù)胃腸等作用。本實(shí)驗(yàn)主要研究 辣椒素對(duì)小鼠免疫功能的影響。

    關(guān)鍵詞 辣椒素 小鼠 免疫功能

    中圖分類(lèi)號(hào):Q954.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

    生活在潮濕陰冷、四季變化明顯地區(qū)的居民有特定的飲食習(xí)慣來(lái)增強(qiáng)自身免疫,達(dá)到御寒防潮目的。而在這些地區(qū),人們普遍都存在吃辣椒的習(xí)慣,因此猜想這是否與他們長(zhǎng)期食用辣椒存在關(guān)聯(lián)。而辣椒素是辣椒中的主要成分,因此通過(guò)研究辣椒素對(duì)小鼠免疫功能的作用,是否有增強(qiáng)小鼠免疫力的功效,具有一定的研究?jī)r(jià)值,實(shí)驗(yàn)報(bào)告如下:

    1 材料與方法

    1.1辣椒素

    每粒500mg,純度為98%,由北京某公司提供,推薦成人抗炎日用量為20mg/kg,試驗(yàn)時(shí)將受試物配制成不同濃度。

    1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    清潔級(jí)昆明種小鼠120只,體重 21-25g,6-12周齡。

    1.3主要儀器和試劑

    全自動(dòng)酶標(biāo)儀(瑞士Tecan公司);倒置顯微鏡(日本 Olympus公司);細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(德國(guó)Scharfe system公司);RPMll640 培養(yǎng)液(美國(guó)Gibco公司)。

    1.4劑量選擇

    根據(jù)受試物推薦用量進(jìn)行劑量設(shè)計(jì),分別以每天推薦用量的1、10和30倍作為低劑量(20mg/kg體重)、中劑量(200 mg/kg體重)和高劑量(600 mg/kg體重),同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照組。

    1.5實(shí)驗(yàn)方法及指標(biāo)測(cè)定

    按照衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與技術(shù)評(píng)價(jià)規(guī)范》(2003年[3中規(guī)定的方法。小鼠(昆明種,體重:20-25g,6-12周齡),將120只小鼠隨機(jī)分為 4 組,分別為3組低劑量、中劑量、高劑量陽(yáng)性實(shí)驗(yàn)組,和1組生理鹽水陰性對(duì)照組(生理鹽水0.2ml/只)。1 次/天,連續(xù)30天后,做以下小鼠免疫功能指標(biāo)檢測(cè)。

    (1)脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)的測(cè)定:

    脾臟指數(shù)=脾臟重量(mg)/體重(g)

    胸腺指數(shù)=胸腺重量(mg)/體重(g)

    (2)細(xì)胞免疫,淋巴細(xì)胞增殖能力的測(cè)定:

    將小鼠處死,將脾臟取出,制成脾臟單細(xì)胞懸液,調(diào)整細(xì)胞濃度為3€?06 ml-1 ,將脾臟單細(xì)胞懸液加入96孔培養(yǎng)板,用MMT方法檢測(cè)增殖指數(shù)。

    (3)體液免疫,血清溶血素(HC50)的測(cè)定:

    取小鼠血液30 ml,將血液室溫靜置30min,2000rpm/min 離心 10min,吸取血清分裝,-20℃保存。血清經(jīng)處理,利用分光光度計(jì)在540nm波長(zhǎng)測(cè)出樣品的吸光度值和綿羊紅細(xì)胞半數(shù)溶血時(shí)的吸光度值。血清溶血素含量以半數(shù)溶血值HC50表示,樣品管中半數(shù)溶血值HC50按下式計(jì)算:每只小鼠的血清HC50=(樣品的吸光度值/綿羊紅細(xì)胞半數(shù)溶血時(shí)的吸光度值)€紫∈捅妒?

    1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    應(yīng)用 SPSS 13.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,數(shù)據(jù)以x€眘 的形式表示。

    2 結(jié)果

    (1)辣椒素對(duì)小鼠臟體比值影響 各劑量組小鼠脾/體及胸腺/體比值與陰性對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,表1)。

    (2)辣椒素對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響中、高劑量組小鼠足跖腫脹度值與陰性對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05),提示辣椒素具有增強(qiáng)小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)的功能。中、高劑量組小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力與陰性對(duì)照組比較,差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05,表2)。

    (3)辣椒素對(duì)小鼠體液免疫功能的影響高劑量組小鼠溶血空斑數(shù)明顯高于陰性對(duì)照組,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),提示辣椒素具有增高小鼠抗體形成細(xì)胞數(shù)的作用。各劑量組小鼠血清半數(shù)溶血值(HC50)(下轉(zhuǎn)第171頁(yè))(上接第168頁(yè))與陰性對(duì)照組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,表3)。

    3結(jié)論

    在之前的研究表明,TRPV1參與介導(dǎo)炎癥條件下傷害性熱刺激引起的痛覺(jué)過(guò)敏。文獻(xiàn)表明,辣椒素治療可使SP的免疫反應(yīng)纖維減少,通過(guò)降低感覺(jué)神經(jīng)敏感性,緩解并消除變應(yīng)性鼻炎的炎癥反應(yīng),從而達(dá)到治療效果。Tohda等研究表明,急性外周炎可減少背根神經(jīng)節(jié)中TRPV1的mRNA水平,增加TRPV1mRNA經(jīng)軸突向周?chē)椭袠心┥业霓D(zhuǎn)運(yùn)。急性炎癥引起TRPV1在神經(jīng)末梢的表達(dá)上調(diào),至少是由TRPV1mRNA的軸漿運(yùn)輸增加實(shí)現(xiàn)的。在急性炎癥中,背根神經(jīng)節(jié)的中樞端對(duì)辣椒素的敏感性增加。從而認(rèn)為T(mén)RPV1可能參與了初級(jí)傳入神經(jīng)對(duì)辣椒素的高敏性并調(diào)節(jié)炎性痛覺(jué)。

    該試驗(yàn)則是擬通過(guò)細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能觀察其對(duì)小鼠免疫功能的影響,試驗(yàn)結(jié)果顯示,辣椒素可顯著提高小鼠足跖腫脹度值、脾淋巴細(xì)胞增殖能力及脾臟抗體生成數(shù),在小鼠細(xì)胞免疫試驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性,表明辣椒素具有促進(jìn)小鼠免疫功能的作用。

    研究結(jié)果表明,辣椒素可明顯提高機(jī)體免疫力,為相關(guān)制劑的進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)提供有效的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。另外,研究結(jié)果還顯示,高劑量組在增加足跖腫脹度值和脾淋巴細(xì)胞增殖能力均不如中劑量組,推測(cè)其原因可能與作用濃度過(guò)高反而抑制了機(jī)體的吸收有關(guān),其具體作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

    參考文獻(xiàn)

    [1] 張軍.辣椒素的藥理與臨床研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊(cè),1996,18(2):8-11

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