易 凱
(益陽市中心醫(yī)院檢驗科,湖南益陽 413000)
·臨床研究·
4例人感染豬鏈球菌病的回顧性分析
易凱
(益陽市中心醫(yī)院檢驗科,湖南益陽 413000)
摘要:目的通過對益陽市4例人感染豬鏈球菌患者的臨床資料進行回顧性分析,為豬鏈球菌病的診斷和治療提供依據(jù)。方法回顧性分析該院4例人感染豬鏈球菌病患者的臨床資料,職業(yè)特征,實驗室血液和腦脊液檢驗結(jié)果,分離菌株的細菌培養(yǎng)鑒定。結(jié)果從4例患者血液分離培養(yǎng)出病原菌,1例患者腦脊液分離出病原菌,均經(jīng)梅里埃VITEK-2 Compact全自動細菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)鑒定為豬鏈球菌Ⅱ型。結(jié)論微生物工作人員應加強豬鏈球菌的認知,快速而準確地得出病原學結(jié)果,為臨床診斷提供依據(jù)。
關(guān)鍵詞:豬鏈球菌;細菌鑒定;回顧性分析
1968年丹麥學者首次報道了3例人感染豬鏈球菌導致腦膜炎并發(fā)敗血癥病例[1],隨后在全世界范圍內(nèi)均有報道。在我國,1998年江蘇省發(fā)生了人感染豬鏈球菌病疫情,發(fā)病25例,死亡14例[2];2005年6~8月,四川省發(fā)生的人感染豬鏈球菌病疫情暴發(fā),為國內(nèi)外迄今為止報道的最大規(guī)模人感染豬鏈球菌病疫情,發(fā)病數(shù)215例,死亡38例[3]。益陽市于2013年7月至2014年4月共發(fā)生4例人感染豬鏈球菌病。本研究對4例患者的臨床特征,實驗室血液、腦脊液檢驗結(jié)果及細菌鑒定進行回顧性分析,從而為豬鏈球菌感染的診斷、治療提供依據(jù)。
1資料與方法
1.1一般資料選取益陽市中心醫(yī)院2013年7月至2014年2月的4例人感染豬鏈球菌病患者為研究對象,其中1例患者從腦脊液和血液同時分離出豬鏈球菌Ⅱ型,其余3例僅從血培養(yǎng)分離出豬鏈球菌Ⅱ型。其患者的一般資料、職業(yè)特征及菌株來源信息見表1。
表1 4例豬鏈球菌病患者一般資料、職業(yè)特征及菌株來源信息
1.2主要儀器及試劑哥倫比亞血瓊脂平板、中和抗生素成人血培養(yǎng)瓶、GP鑒定卡、GP67藥敏卡、 ALERT 3D120血培養(yǎng)儀、VITEK-2 Compact細菌鑒定系統(tǒng)均為購自法國生物梅里埃公司。
1.3細菌培養(yǎng)與鑒定藥敏血液或腦脊液標本經(jīng)血培養(yǎng)瓶置于ALERT 3D120血培養(yǎng)儀增菌培養(yǎng),儀器陽性報警時,轉(zhuǎn)種血平板后置于35 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),同時直接涂片革蘭染色鏡檢,培養(yǎng)18~24 h,觀察菌落形態(tài),同時進行革蘭染色和顯微鏡形態(tài)觀察。然后用VITEK-2 Compact細菌鑒定藥敏系統(tǒng)與配套的革蘭陽性菌GP鑒定卡和GP67藥敏卡進行細菌鑒定與藥敏實驗,具體操作均參考儀器和試劑盒說明書。血清學試驗和聚合酶鏈式反應(PCR)鑒定分型均送湖南省疾病控制中心進行血清分型、PCR基因鑒定。
2結(jié)果
2.1人感染豬鏈球菌病患者血液和腦脊液實驗室檢測結(jié)果從表2可見,4例患者白細胞顯著上升,中性粒細胞比例增多,降鈣素原和C反應蛋白均顯著升高。從表3可見,3例抽取的腦脊液白細胞升高、蛋白升高、腦脊液氯化物下降、腦脊液葡萄糖下降、乳酸脫氫酶上升。
表2 4例豬鏈球菌病患者常見血液檢測結(jié)果
表3 3例豬鏈球菌病患者腦脊液實驗室檢測結(jié)果
2.2人感染豬鏈球菌體形態(tài)和特征血平板上24 h呈α溶血,灰白、半透明,光滑、濕潤、邊緣整齊,凸起,小菌落,直徑0.5~1.5 mm,見圖1A。細菌革蘭染色為革蘭陽性球菌,在1 000倍顯微鏡下為單個或短鏈狀排列的似“矛頭狀”球菌,與肺炎鏈球菌的鏡下形相類似,見圖1B。
A:豬鏈球菌在血平板上24 h菌落形態(tài);B豬鏈球菌鏡下形態(tài)(革蘭染色×1 000)。
圖1人感染豬鏈球菌體形態(tài)和特征
2.35株分離菌陽性報警時間、鑒定結(jié)果、鑒定時間、可能性見表4。從表4可看出,血培養(yǎng)瓶在血培養(yǎng)儀陽性報警時間均不到16 h。鑒定藥敏系統(tǒng)對5株細菌均正確鑒定為豬鏈球菌Ⅱ型,鑒定時間都沒超過8 h,鑒定可能性均大于95%。
表4 5株分離菌陽性報警時間、鑒定結(jié)果、
2.4藥敏試驗結(jié)果5株細菌對青霉素、左氧氟沙星、萬古霉素、紅霉素、克林霉素、利奈唑胺均敏感。
2.5湖南省疾病控制中心對上送的菌株進行血清學分型,PCR基因分型均為豬鏈球菌Ⅱ型陽性。
3討論
人感染豬鏈球菌病是由豬鏈球菌感染人而引起的人畜共患疾病。從事生豬的養(yǎng)殖、屠宰、銷售及加工等人員均為高危人群,本病主要通過接觸死豬或病豬(肉)后,通過皮膚傷口而感染。臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、寒戰(zhàn)、頭痛、食欲下降等細菌感染癥狀,重癥患者可合并中毒性休克綜合征和鏈球菌腦膜炎綜合征[4],給相關(guān)從業(yè)人員和廣大的群眾帶來嚴重的健康威脅。在豬鏈球菌的30多種血清型中,Ⅱ型是最常引起人類感染的類型[5]。豬鏈球菌Ⅱ型的毒力為莢膜多糖、溶菌酶釋放蛋白、溶血素、纖連蛋白結(jié)合蛋白、谷氨酸脫氫酶、Sao蛋白、存在于89K毒力島的雙信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)、莢膜唾液酸、Cbp40、VirA、pgdA、Trag、溶血素相關(guān)基因、CiaRH、CcpA、TroA等多種毒力因子協(xié)同作用的結(jié)果[6]。自從湖南省2006年首例報道人感染豬鏈球菌病[7]以來,每年陸續(xù)有散發(fā)病例報告,為豬鏈球菌病的疫區(qū)。益陽地區(qū)2013年7月首次發(fā)現(xiàn)人感染豬鏈球菌病,到2014年2月共發(fā)現(xiàn)4例人感染豬鏈球菌病。
從本研究4例患者的病例臨床資料分析,其中有3例患者為生豬養(yǎng)殖者,經(jīng)調(diào)查,近一星期內(nèi),均有死豬接觸史;另外1例患者為超市肉類銷售人員,4例患者發(fā)病前均存在不同程度的皮膚破損或傷口。患者起病急,有畏寒、高熱、頭痛等神經(jīng)功能紊亂癥狀。從表2可見,4例患者白細胞顯著上升,中性粒細胞增多,降鈣素原升高和C反應蛋白升高,提示患者有敗血癥實驗室特征。從表3可見,3例抽取的腦脊液白細胞升高、蛋白升高、腦脊液氯化物下降、腦脊液葡萄糖下降、乳酸脫氫酶上升,有顯著的化膿性腦脊液的實驗室改變,與以往的文獻報道相似[8]。從藥敏試驗結(jié)果來看豬鏈球菌對多種鏈球菌常見藥物敏感。
從表4可看出,血培養(yǎng)瓶在ALERT 3D120血培養(yǎng)儀陽性報警時間均不到16 h。VITEK-2 Compact 鑒定藥敏系統(tǒng)對5株細菌均正確鑒定為豬鏈球菌Ⅱ型,鑒定時間都沒超過8 h。對于實驗室來說,血培養(yǎng)儀的陽性報警時間及VITEK-2 Compact系統(tǒng)鑒定正確率和鑒定時間能滿足對于豬鏈球菌的培養(yǎng)鑒定要求。但是從抽取血液標本到陽性報警,轉(zhuǎn)種血平板到鑒定得出正確的病原學鑒定結(jié)果需要2 d以上的時間,不利于潛伏期短,病情兇險的患者及時診療。血清學實驗及PCR基因檢測雖然具有快速、準確的特點,但由于各種原因,一般臨床實驗室均未開展。對于血清學實驗及PCR基因檢測未開展的實驗室,需要加強疫區(qū)醫(yī)院微生物檢驗人員對豬鏈球菌革蘭染色鏡下形態(tài)和菌落形態(tài)學的認知水平,做好三級預防,加強與臨床的溝通,及時獲取患者職業(yè)特征和接觸史,以便及時的提醒臨床早期正確的診斷和及時有效的治療,對于挽救患者生命,減少后遺癥的發(fā)生具有十分重要的意義。
參考文獻
[1]Perch B,Kristjansen P,Skadhauge K.Group R streptococci pathogenic for man.Two cases of meningitis and one fatal case of sepsis[J].Acta Pathol Microbiol Scand,1968,74(1):69-76.
[2]Lu HZ,Weng XH,Li H,et al.Enterococcus faecium-related outbreak with molecular evidence of transmission from pigs to humans[J].J Clin Microbiol,2002,40(3):913-917.
[3]Ye C,Zhu X,Ji NH,et al.Streptococcus suis sequence type 7 outbreak,Si chuan,China[J].Emerg Infect Dis,2006,12(8):1203-1208.
[4]Lin YD,Miao XL,Xiao Y.The epidemiological source investigationof a death case of Streptococcus suis type 2[J].Jiangsu Prev Med,2011,22(9):29-30.
[5]He YJ,Zhu LW,Feng SZ.The lastest progress in research on virulenceassociared factors and protective antigens of streptococcus suis serotype 2[J].Chin J Zoonoses,2012,28(1):66-68.
[6]馬建華,魏建忠.豬鏈球菌毒力因子研究進展[J].動物醫(yī)學進展,2014,35(8):95-98.
[7]成凌志,王繼杰,趙樹海,等.湖南省首例人感染豬鏈球菌病調(diào)查報告[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學,2007,34(19):3771.
[8]陳默蕊,屈平華,陳經(jīng)雕,等.2011年至2012年潮州地區(qū)5例豬鏈球菌Ⅱ型感染的回顧性分析[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2014,37(4):302-304.
DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.058
文獻標識碼:A
文章編號:1673-4130(2016)10-1427-03
(收稿日期:2016-01-29)