液－質(zhì)聯(lián)用測定豬肉中獸藥殘留

張爽(蕪湖職業(yè)技術(shù)學(xué)院　生物工程學(xué)院，安徽　蕪湖　241003)

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液－質(zhì)聯(lián)用測定豬肉中獸藥殘留

張爽
(蕪湖職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程學(xué)院，安徽蕪湖241003)

摘要:目的:調(diào)研安徽省皖南各區(qū)域的豬肉獸藥殘留情況。方法:采用液－質(zhì)聯(lián)用法，對(duì)安徽省皖南地區(qū)18個(gè)縣市區(qū)54個(gè)農(nóng)貿(mào)市場，隨機(jī)采集的162份鮮豬肉樣本，進(jìn)行了獸藥殘留的檢測。結(jié)果:豬肉樣本中所測的4種磺胺類、4種β－受體激動(dòng)劑類、3種四環(huán)素類、3種硝基咪唑類、3種激素類藥物以及氟苯尼考胺類藥物殘留含量，均低于國家食品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最低限定值。結(jié)論:安徽省皖南地區(qū)生豬獸藥殘留控制上取得了良好效果。

關(guān)鍵詞:液－質(zhì)聯(lián)用;豬肉;獸藥殘留

隨著社會(huì)快速發(fā)展，人民生活水平提高，肉、禽、蛋、乳等動(dòng)物性食品在國民膳食結(jié)構(gòu)中所占比重普遍增加，尤其在肉類食用上。而豬肉則是人們較常食用的肉類食品［1］，在“瘦肉精”事件爆出之后，食品安全問題，尤其是肉類的安全問題則引起了全社會(huì)的廣泛關(guān)注。對(duì)于豬肉中獸藥成分的殘留則受到了越來越多消費(fèi)者的關(guān)注。

為了提高動(dòng)物成長速度，或者在銷售、屠宰前為減輕動(dòng)物本身的疾病癥狀，動(dòng)物飼養(yǎng)單位經(jīng)常使用多種獸藥［2］，這些藥物制劑在動(dòng)物體內(nèi)因不發(fā)生消解而殘留，最后通過食物鏈進(jìn)入人體，產(chǎn)生獸藥殘留。如果長期食用含有獸藥殘留的肉類，會(huì)對(duì)人類健康產(chǎn)生很大的危害，輕者產(chǎn)生中毒、過敏現(xiàn)象，重則發(fā)生致畸、致癌、致突變等事件［3］。

近年來，隨著豬肉食用量及獸藥種類的劇增，獸藥殘留問題已成為普遍關(guān)注的社會(huì)熱點(diǎn)問題。因此，及時(shí)檢測肉類產(chǎn)品中的獸藥殘留量是重中之重。目前，液－質(zhì)聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行肉類獸藥殘留檢測量的測定已經(jīng)較為成熟［4］。現(xiàn)在養(yǎng)殖場廣泛使用的藥物包括磺胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類、β－受體激動(dòng)劑、氯霉素類、四環(huán)素類、多肽類、硝基咪唑類、阿維菌素類、聚醚類、激素類等。其中，磺胺類、四環(huán)素類和氟苯尼考胺等比較普遍，同時(shí)國家也明確規(guī)定β－受體激動(dòng)劑、人工合成激素類、硝基咪唑類等藥物嚴(yán)禁用于食用動(dòng)物中，并且在動(dòng)物源性食品中不得檢出［5－6］。

本實(shí)驗(yàn)以鮮豬肉為樣本，采用液－質(zhì)聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行獸藥殘留量測定，對(duì)安徽省皖南地區(qū)18個(gè)縣市區(qū)54個(gè)農(nóng)貿(mào)市場隨機(jī)采集的162份鮮豬肉中4種磺胺類、4種β－受體激動(dòng)劑、3種四環(huán)素類、3種硝基咪唑類、3種激素類藥物以及氟苯尼考胺類藥物的殘留水平進(jìn)行分析。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)儀器液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀(Varian 310v，美國瓦里安)，自動(dòng)氮吹儀(TurboVap LV，美國mark)，高速冷凍離心機(jī)(3K－15，Sigma)，分析天平(FA2104A，上海精天)，振蕩器(SA400，日本大和)，微量移液器(1～10、10～100、10～200、1～1000 μL，美國康寧)，固相萃取柱(OasisHLB (6cc/500 mgL，3cc/ 60 mgL)，美國Waters)。

1.2.2試劑甲醇(GR)，乙腈(GR)，甲酸(AR)，無水硫酸鈉(AR) (阿拉丁)，微孔濾膜孔徑0.2 μm(德國MEMBRANA公司)。

1.2.3材料安徽省皖南地區(qū)18個(gè)市縣隨機(jī)選擇54個(gè)農(nóng)貿(mào)市場，每個(gè)市場取三份，共采集162份鮮豬肉樣本，采集后立即送往－20℃冰箱保存待測。

1.2方法

1.2.1前處理方法分析天平上稱量豬肉組織10.0 g，組織粉碎后，放置于50 mL離心管中，加入20 mL的乙酸－乙腈的混合液(乙酸含量1%)，充分混合，繼續(xù)加入10 g無水硫酸鈉，充分震蕩后離心10 min (5000轉(zhuǎn)/分)，取上清液，N2吹干，用甲醇溶解殘余物，混勻，繼續(xù)離心后，用固相萃取柱萃取，凈化，水洗后抽干，最后用10 mL甲醇溶液洗脫，N2吹干，用乙腈的水溶液定容后，用0.2 μm的濾膜過濾，后待測。

1.2.2檢測方法

1.2.2.1磺胺類獸藥根據(jù)農(nóng)業(yè)部1025號(hào)公告－23－2008［7］方法提供的動(dòng)源性食品中磺胺類藥物殘留檢測的液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法條件，建立4種磺胺類藥物(磺胺甲氧嗪SMP，磺胺嘧啶SD，磺胺甲惡唑SMZ，磺胺噻唑ST)的檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測樣品豬肉中的4種磺胺類藥物，并利用外標(biāo)法根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出各種磺胺類藥物的含量。

1.2.2.2β－受體激動(dòng)劑根據(jù)農(nóng)業(yè)部1025號(hào)公告－18－2008［8］方法提供的動(dòng)物源性食品中β－受體激動(dòng)劑殘留檢測的液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法條件，建立4種β－受體激動(dòng)劑(萊克多巴胺RTM，沙丁胺醇STL，特布他林TBL，克倫特羅CBL)的檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測樣品豬肉中的4種β－受體激動(dòng)劑，并利用外標(biāo)法根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出各種β－受體激動(dòng)劑的含量。

四旋翼飛行器PID控制器設(shè) 計(jì) ……………………………………………………………… 焦青松，劉 佳（49）

1.2.2.3硝基咪唑類藥物結(jié)合農(nóng)業(yè)部1025號(hào)公告－22－2008［9］與農(nóng)業(yè)部1025號(hào)公告－2－2008［10］提供的動(dòng)物源性食品中硝基咪唑類藥物殘留檢測的液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法條件，建立3種硝基咪唑類藥物(甲硝唑MNZ，地美硝唑DMZ，洛硝噠唑RNZ)的檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測樣品豬肉中的3種硝基咪唑類藥物，并利用外標(biāo)法根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出各種硝基咪唑類藥物的含量。

1.2.2.4四環(huán)素類藥物根據(jù)農(nóng)業(yè)部1025號(hào)公告－12－2008［11］提供的肉類中四環(huán)素類藥物殘留檢測的液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法條件，建立3種四環(huán)素類藥物(四環(huán)素TC，土霉素OTC，金霉素CTC)的檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測樣品豬肉中的3種四環(huán)素類藥物，并利用外標(biāo)法根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出各種四環(huán)素類藥物的含量。

1.2.2.5激素類藥物根據(jù)農(nóng)業(yè)部1031號(hào)公告－1－2008［12］提供的肉類中激素素類藥物殘留檢測的液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法條件，建立3種激素類藥物(表睪酮ETT，丙酸睪酮TPT，孕酮PT)的檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測樣品豬肉中的3種激素類藥物，并利用外標(biāo)法根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出各種激素類藥物的含量。

1.2.2.6氟苯尼考胺藥物采用GB/T 20756－2007方法提供的動(dòng)源性食品中氟苯尼考胺(FFC)藥物殘留檢測的液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法條件，建立氟苯尼考胺藥物的檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測樣品豬肉中的氟苯尼考胺藥物，并利用外標(biāo)法根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出氟苯尼考胺藥物的含量。

2　結(jié)果與分析

2.1磺胺類藥物殘留量分析

根據(jù)國家食品標(biāo)準(zhǔn)GB/T 20759－2006，凡肉類樣本中磺胺類藥物檢測量小于最低檢出限量50 μg/ kg，均視為未檢出。由表1可知安徽省皖南地區(qū)所有檢測樣品中的磺胺類殘留量均小于50 μg/kg。所以安徽省皖南地區(qū)的農(nóng)貿(mào)市場的豬肉磺胺類殘留符合國家標(biāo)準(zhǔn)。與此同時(shí)，廣德縣鮮豬肉磺胺嘧啶的含量達(dá)到了26.7 μg/kg，寧國市鮮豬肉的磺胺甲氧嗪的含量達(dá)到了25.3 μg/kg以及青陽縣鮮豬肉磺胺甲惡唑含量達(dá)到了37.5 μg/kg，應(yīng)該繼續(xù)監(jiān)控磺胺類藥物殘留量較高的豬肉廠。

2.2β－受體激動(dòng)劑殘留量分析

根據(jù)中國工信部、農(nóng)業(yè)部、聯(lián)合商務(wù)部以及衛(wèi)生部與國家工商管理總局、國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局聯(lián)合發(fā)布規(guī)定［13］，禁止用β－受體激動(dòng)劑藥物于動(dòng)物食品中，由表1可知安徽省皖南地區(qū)郎溪縣、績溪縣的萊克多巴胺的殘留量為3.2 μg/kg和1.7 μg/kg，這屬于認(rèn)為加入了瘦肉精，對(duì)人體健康有害，應(yīng)該加大力度監(jiān)控。黟縣、蕪湖縣的沙丁胺醇的殘留含量達(dá)到0.5 μg/kg和0.3 μg/kg，含量雖然不多，但是不符合國家標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)予以監(jiān)督。其他的各個(gè)區(qū)的豬肉的β－受體激動(dòng)劑藥物均含量滿足國家標(biāo)準(zhǔn)。

2.3氟苯尼考胺殘留量分析

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB/T 20756－2006，凡肉類樣本中氟苯尼考胺的檢測量小于最低檢出限量0.1 μg/kg均視為未檢出。由表1看出除了寧國市的一份豬肉的含量超過了0.1 μg/kg，為0.12 μg/kg左右。其余所有檢測樣品中的氟苯尼考胺含量均小于0.1 μg/kg，滿足國家標(biāo)準(zhǔn)。

表1　檢測樣本中磺胺類藥物、β－受體激動(dòng)劑及氟苯尼考胺的殘留量Table 1 Residual content of sulfonamides，beta receptor agonist，florfenicol amine

2.4硝基咪唑類藥物殘留量分析

根據(jù)國家動(dòng)物食品殘留量標(biāo)準(zhǔn)，在肉類樣本中檢測到的咪唑類藥物含量應(yīng)小于10 μg/kg，視為未檢出。由表2可知安徽省皖南地區(qū)所有檢測樣品中的咪唑類藥物殘留量均小于10 μg/kg，除了南陵縣的咪唑類藥物的殘留量大于了5 μg/kg之外，其他各個(gè)區(qū)的殘留量均小于5 μg/kg，均滿足國家標(biāo)準(zhǔn)。

2.5四環(huán)素類藥物殘留量分析

根據(jù)國家食品標(biāo)準(zhǔn)GB/T 21317－2007，凡肉類樣本中四環(huán)素藥物檢測量小于最低檢出限量50 μg/kg均視為未檢出。由表2知安徽省皖南地區(qū)所有檢測樣品中的四環(huán)素殘留量均小于50 μg/kg，符合國家標(biāo)準(zhǔn)。但績溪縣、繁昌縣、祁門縣的四環(huán)素殘留量分別為19.8 μg/kg、21.7 μg/kg、25.6 μg/kg，績溪縣的土霉素殘留量為20.9 μg/kg，雖未超過國家標(biāo)準(zhǔn)，但為避免藥物富集性危害，應(yīng)繼續(xù)監(jiān)督四環(huán)素類藥物殘留量盡量達(dá)到最低。

2.6激素類藥物殘留量分析

根據(jù)國家動(dòng)物食品殘留量標(biāo)準(zhǔn)，在肉類樣本中檢測到的激素類藥物含量應(yīng)小于1μg/kg，視為未檢出。由表2可知安徽省皖南地區(qū)各農(nóng)貿(mào)市場所有檢測樣品中的激素類藥物殘留量均小于1μg/kg。所以安徽省皖南地區(qū)的農(nóng)貿(mào)市場的豬肉激素類殘留符合國家標(biāo)準(zhǔn)。

表2　檢測樣本中硝基咪唑類、四環(huán)素類、激素類藥物的殘留量Table 2 Residual content of nitroimidazole，tetracyclines，hormone drugs

3　結(jié)論與討論

豬肉在中國出口肉類品中占有較大比重，但獸藥殘留對(duì)肉類出口貿(mào)易造成嚴(yán)重阻礙，影響中國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展［14］。同時(shí)，多種獸藥在動(dòng)物體內(nèi)的殘留對(duì)人體健康，會(huì)造成較大損害，而豬肉是中國居民消費(fèi)的主要肉食品，豬肉的消費(fèi)量占總?cè)忸愊M(fèi)量的70%，因此，豬肉獸藥殘留引起了廣大人們和科研工作者的關(guān)注。而在江蘇、成都、昆明［15－17］等地，都有著隨機(jī)采取市場上的豬肉進(jìn)入科研基地，研究各地的獸藥殘留情況，發(fā)現(xiàn)各地均有不同程度的一種或多種獸藥殘留。

本研究就從安徽省皖南地區(qū)18個(gè)縣市區(qū)的54個(gè)農(nóng)貿(mào)市場隨機(jī)采集162份鮮豬肉樣本進(jìn)行了前處理，并且依據(jù)國家對(duì)各項(xiàng)獸藥所規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)方法運(yùn)用液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)4種磺胺類藥物，4種β－受體激動(dòng)劑，3種四環(huán)素類，3種硝基咪唑類，3種激素類藥物以及氟苯尼考胺類進(jìn)行了檢測，發(fā)現(xiàn)其殘留含量均低于國家食品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最低限定值，說明安徽省皖南地區(qū)生豬獸藥殘留控制上取得了良好效果。同時(shí)結(jié)果與傅心亮［18］等對(duì)貴州省鮮豬肉樣品的檢測結(jié)果基本一致，說明目前國內(nèi)豬肉獸藥殘留監(jiān)測與管理取得一定成果。但是里面有若干種獸藥的殘留量達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)值的一半，如:廣德縣鮮豬肉磺胺嘧啶的含量達(dá)到26.7μg/kg，寧國市鮮豬肉的磺胺甲氧嗪的含量達(dá)到25.3μg/kg，青陽縣鮮豬肉磺胺甲惡唑含量達(dá)到37.5μg/kg，另外繁昌縣、績溪縣、祁門縣的四環(huán)素的殘留量分別達(dá)到了19.8μg/kg，21.7μg/kg以及25.6μg/kg，以及績溪縣的土霉素殘留含量也達(dá)到了20.9μg/kg，針對(duì)此現(xiàn)象，應(yīng)該對(duì)豬肉獸藥的合理使用的控制繼續(xù)監(jiān)督不放松。

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(責(zé)任編輯:馬世堂)

A Determination of Veterinary Drug Residues in Pork by LC－MS Method

ZHANG Shuang
(School of Biological Enginearing，Wuhu Institute of Technology，Wuhu 241003，China)

Abstract:Objective: To investigate the situation of veterinary drug residues in pork in southern area of Anhui province.Method: A determination of veterinary drug residues in pork by LC－MS method was carried out in 54 farmers market of 18 counties in southern area of Anhui Province.162 samples of fresh pork were tested for veterinary drug residues.Result: The veterinary drug residues of 4 sulfonamides，4 kinds of beta receptor agonist，3 kinds of tetracyclines，3 kinds of nitroimidazole，3 kinds of hormone drugs and florfenicol amine，are below the minimum limits of national standard.Conclusion: The control of veterinary drug residues in southern area of Anhui Province has got good effect.

Key words:LC－MS method; Pork; Veterinary Drug Residues

中圖分類號(hào):TS251.9

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào):1673－8772(2016) 02－0001－05

收稿日期:2016－01－20

基金項(xiàng)目:安徽省優(yōu)秀青年人才基金重點(diǎn)項(xiàng)目(2013SQRL149ZD) ;安徽省教學(xué)改革與質(zhì)量提升計(jì)劃重大教學(xué)改革研究項(xiàng)目(2014zdjy155) ;安徽省自然科學(xué)重點(diǎn)項(xiàng)目(KJ2016A762)。

作者簡介:張爽(1975－)，女，安徽省蕪湖市人，碩士，副教授，食品檢驗(yàn)高級(jí)技師，主要從事食品加工與安全研究。