毛細管電泳法檢測糖化血紅蛋白與常見干擾因素的相關(guān)性分析

陳建標　江利愛　張　玲　羅　潔

廣東省深圳市坪山新區(qū)人民醫(yī)院，廣東　深圳　518118

毛細管電泳法檢測糖化血紅蛋白與常見干擾因素的相關(guān)性分析

陳建標江利愛張玲羅潔

廣東省深圳市坪山新區(qū)人民醫(yī)院，廣東深圳518118

【摘要】目的：分析毛細管電泳法檢測糖化血紅蛋白(HbA1c)與常見干擾因素的相關(guān)性。方法：選取19例地中海貧血、52例腎功能衰竭、50例服用阿司匹林超過1個月及23例經(jīng)基因確認為非地中海貧血而血紅蛋白毛細管電泳結(jié)果為異常峰的受試者為研究對象。采用毛細管蛋白電泳法，離子交換層析法、免疫比濁法測定四組患者HbA1c，采用日本7600-110分析儀檢測空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)，并進行比較。結(jié)果：四組患者FPG、2hPG比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。毛細管電泳法檢測地中海貧血及服用阿司匹林超過1個月的患者HbAlc水平結(jié)果均明顯高于離子交換層析法及免疫比濁法，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；腎功能衰竭組HbAlc三種檢測方法比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；對于經(jīng)基因確認為非地中海貧血，且血紅蛋白毛細管電泳結(jié)果為異常峰的正常對照組患者，離子交換層析法及免疫比濁法均正常，與毛細管電泳法差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論：毛細管電泳法檢測HbA1c結(jié)果受地中海貧血、服用藥物等多種因素影響，臨床使用應排除干擾因素提高準確度。

【關(guān)鍵詞】糖化血紅蛋白；毛細管電泳法；干擾因素

2型糖尿病是一組以血糖水平增高為特征的代謝疾病，患者長期血糖升高不僅影響其生活質(zhì)量，還會誘發(fā)糖尿病腎病等并發(fā)癥發(fā)生，威脅患者生命安全。糖化血紅蛋白 A1c(HbA1c)是評價糖尿病血糖控制水平的首選指標，目前，市場上供實驗室選用的測定HbA1c的方法至少有30余種，其中毛細管電泳法根據(jù)糖化血紅蛋白與非糖化血紅蛋白所帶電荷不同進行分離，一直用于國際臨床化學與檢驗醫(yī)學聯(lián)合會發(fā)布的一級參考方法[1-2]。但是任何引起血紅蛋白數(shù)量與質(zhì)量變化的因素都可干擾 HbA1c 測定，對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響[3]，本研究通過分析毛細管電泳法檢測糖化血紅蛋白與常見干擾因素的相關(guān)性，旨在為其應用提供依據(jù)。現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料地中海貧血組：我院2014年1月至2015年12月門診及住院地中海貧血患者19例，其中男12例，女7例，年齡20～58歲，平均年齡(39.1±4.26)歲，α型10例，β型9例，均符合地中海貧血診斷標準[4]。腎功能衰竭組：腎功能衰竭患者52例，其中男性39例，女性23例，年齡23～64歲，平均年齡(40.5±3.84)歲。阿司匹林組：服用阿司匹林超過1個月的患者50例，其中男性31例，女性19例，年齡18～59歲，平均年齡(40.1±3.97)歲。正常對照組：經(jīng)基因確認為非地中海貧血，且血紅蛋白毛細管電泳結(jié)果為異常峰的受試者23例，其中男性14例，女性9例，年齡19～57歲，平均年齡(39.6±3.58)歲。四組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2方法所有研究對象入組后，于清晨采取空腹肘靜脈血3ml。凝血60min(20～25℃)后，離心(4000r/min)取血清，-80℃存儲待測。采用法國Sebia CaPilarys毛細管蛋白電泳分析儀，DS-5糖化血紅蛋白電泳檢測儀(離子交換層析法)，Becman Au5400全自動生化儀(免疫比濁法)測定4組HbA1c。HbAlc試劑盒及校準品、質(zhì)控品均為原裝配套。采用日本日立醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)的7600-110分析儀檢測空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)。

1.3統(tǒng)計學處理應用SPSS17.0對實驗數(shù)據(jù)進行處理。正態(tài)計量資料采用(均數(shù)±標準差)表示，采用ANOVA方差分或者S-N-K檢驗；計數(shù)資料用[例(%)]表示，采用χ2檢驗或者秩和檢驗；以P<0.05為差異其有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1四組血糖指標比較四組的FPG、2hPG比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。

表1　四組血糖指標比較　±s)

2.2不同方法檢測四組血清HbAlc比較毛細管電泳法檢測地中海貧血及服用阿司匹林超過1個月的患者HbAlc水平結(jié)果均明顯高于離子交換層析法及免疫比濁法，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；腎功能衰竭組患者HbAlc三種檢測方法比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；對于經(jīng)基因確認為非地中海貧血，且血紅蛋白毛細管電泳結(jié)果為異常峰的正常對照組，離子交換層析法及免疫比濁法均正常，與毛細管電泳法差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

表2　不同方法檢測四組血清HbAlc比較　±s)

注：與毛細管電泳法比較，※P<0.05。

3討論

2型糖尿病是臨床上的常見病和多發(fā)病，近年來隨著生活水平的提高以及飲食結(jié)構(gòu)的改變，其發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢，同時其誘發(fā)的急慢性并發(fā)癥嚴重影響患者的身心健康和生活質(zhì)量，且致殘、致死率較高[4-5]。HbA1c是紅細胞中血紅蛋白與葡萄糖的結(jié)合產(chǎn)物，與糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，已被用于糖尿病診斷及病情評估[6]。

目前，HbA1c的常規(guī)檢測方法有兩大類，一類是基于糖化與非糖化血紅蛋白所帶電荷不同建立的毛細管電泳法及離子交換層析法，另一類是基于糖化與非糖化血紅蛋白的結(jié)構(gòu)差異建立的免疫比濁法及親和層析法等，其中毛細管電泳由于高效率、運行成本低、高選擇性等特點被用于HbA1c的檢測。但是文獻報道[7-8]，毛細管電泳法檢測HbA1c容易受多種因素影響，如藥物、血紅蛋白病等。本研究中毛細管電泳法檢測地中海貧血及服用阿司匹林超過1個月的患者HbAlc水平結(jié)果均明顯高于離子交換層析法及免疫比濁法，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，提示地中海貧血、長期服用阿司匹林對毛細管電泳檢測HbAlc存在干擾。研究表明，腎功能衰竭患者無論采用何種方法都無法克服干擾因素，本研究中，三種檢測方法檢測HbAlc比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，進一步證實了文獻報道[9]，因此，不宜采用HbA1c來反映體內(nèi)平均血糖水平，應采用其他指標對血糖進行檢測。此外，對于經(jīng)基因確認為非地中海貧血，且血紅蛋白毛細管電泳結(jié)果為異常峰的正常對照組，離子交換層析法及免疫比濁法均正常，與毛細管電泳法差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，提示除了藥物及地中海貧血對毛細管電泳檢測HbAlc存在干擾外，還存在一些其他因素，如高脂血癥、族群及妊娠等[10]，因此建議毛細管電泳與其他技術(shù)聯(lián)合檢測HbAlc。

參考文獻

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[10]李婭,宋宇,段勇.糖化血紅蛋白檢測的局限性[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2012,35(6):501-504.

【中圖分類號】R331

【文獻標志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)08-0058-02

(收稿日期：2016.02.24)