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    抗眩顆粒對內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型的影響

    2016-06-20 07:23:15王希東郝少君張正臣
    實用藥物與臨床 2016年4期

    王希東,郝少君,王 靈,張正臣

    解放軍第三七一中心醫(yī)院,河南 新鄉(xiāng) 453000

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    *通信作者

    抗眩顆粒對內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型的影響

    王希東,郝少君,王靈*,張正臣

    解放軍第三七一中心醫(yī)院,河南 新鄉(xiāng) 453000

    [摘要]目的觀察抗眩顆粒對內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型的影響。方法取造高血壓模型成功大鼠72只,按血壓高低隨機(jī)分為6組,每組12只,分別灌服大、中、小劑量抗眩顆?;鞈乙骸B(yǎng)血清腦顆?;鞈乙?、卡托普利混懸液和同體積的蒸餾水;空白對照組灌同體積的生理鹽水,連續(xù)給藥7 d。于第7天造模,給藥后2 h測各組大鼠血壓值。結(jié)果與模型組比較,大、中、小劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血壓(SBP、DBP)均顯著降低。與空白對照組比較,模型組血漿ANG-2、ET水平均顯著性升高(P<0.01)。與模型組比較,大、中、小劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血漿ANG-2水平均顯著降低(P<0.01或P<0.05);大、中劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血漿ET水平均明顯降低(P<0.05)。結(jié)論抗眩顆粒對內(nèi)分泌型高血壓大鼠有良好的改善作用。

    [關(guān)鍵詞]抗眩顆粒;大鼠;內(nèi)分泌型高血壓模型;養(yǎng)血清腦顆粒;卡托普利片

    0引言

    眩暈在臨床上非常多見,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為,其發(fā)生與腦部微循環(huán)功能障礙、血液流變學(xué)異常、細(xì)胞內(nèi)自由基損傷等諸多因素有密切關(guān)系。目前治療該疾病的藥物較多,西藥雖見效快,但持續(xù)時間短且不良反應(yīng)較大。市售中藥制劑效果也不太理想,根據(jù)多年的臨床經(jīng)驗我們研制了抗眩顆粒,該方劑由磁石、夏枯草、葛根、牛膝、鉤藤、姜半夏、川芎、丹參組成,具有平肝潛陽、活血通竅、息風(fēng)定眩的作用,臨床用于因高血壓、腦動脈硬化、椎基底動脈供血不足、美尼爾氏病、植物神經(jīng)功能紊亂引起的眩暈、頭重足輕、行走不穩(wěn)等療效較好。為驗證其作用并探討其作用特點,本研究觀察了該顆粒對內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型的影響。

    1實驗材料

    1.1藥品抗眩顆粒,中國人民解放軍第三七一中心醫(yī)院提供。制法:按處方稱取原材料,洗凈,加6~8倍水煎煮2次,第1次2 h,第2次2 h,合并煎液,過濾,濾液濃縮至室溫,加乙醇使藥液含醇量達(dá)60%,靜置24 h濾過,含醇藥液回收乙醇,藥液濃縮至相對密度為1.15~1.30,約0.5 kg(80 ℃)。加適量糊精及適量糖粉(約3~4份)混勻,制粒整粒,分裝,每袋10 g(每袋相當(dāng)于原生藥24 g),即得。批號:20110620,口服,每次10 g,每日3次。養(yǎng)血清腦顆粒,天士力制藥集團(tuán)股份有限公司,批號:120802;卡托普利片,常州制藥廠有限公司,批號:12032812;氯化鈉注射液,河南雙核華利藥業(yè)有限公司,批號:A12050807;丙酸睪酮注射液,上海通用藥業(yè)股份有限公司,批號:120309,規(guī)格:1 mL∶25 mg。大豆油,河南愛廚植物有限公司;試劑盒:ANG-2,R&D,批號:DZE30668.ET,R&D。

    1.2動物大鼠,SD,清潔級,由山東省實驗動物中心提供,合格證號:0013913。

    1.3儀器BP-98A Series大鼠無創(chuàng)血壓儀,北京軟隆生物技術(shù)有限公司;可調(diào)式移液器,上海雷勃分析儀器有限公司;TGL-16G臺式離心機(jī),上海安亭科學(xué)儀器廠。

    2實驗方法

    2.1動物分組及給藥取清潔級雄性大鼠120只,每只大鼠造模前連續(xù)測大鼠血壓3 d,取血壓相近的100只大鼠,3次血壓平均值作為大鼠初始血壓。

    隨機(jī)取12只大鼠作為空白對照組,其余大鼠造內(nèi)分泌型高血壓模型,每日皮下注射丙酸睪酮注射液5 mg/kg造模,每天注射1次,連續(xù)造模14 d??瞻讓φ战M每日皮下注射相同劑量大豆油。分別于造模第7、14天測大鼠血壓值。大鼠收縮壓升高15 mmHg以上者為造模成功。第14天,取造高血壓模型成功大鼠72只,按血壓高低隨機(jī)分為6組,每組12只,分別灌服大、中、小劑量抗眩顆?;鞈乙?10、5、2.5 g/kg,用蒸餾水配成0.5、0.25、0.125 g/mL,2 mL/100 g)、養(yǎng)血清腦顆?;鞈乙?2 g/kg,用蒸餾水配成0.1 g/mL,2 mL/100 g)、卡托普利片混懸液(12.5 mg/kg,用蒸餾水配成0.625 mg/mL,2 mL/100 g)和同體積的蒸餾水;空白對照組灌同體積的生理鹽水,每天給藥1次,連續(xù)給藥7 d;給藥期間仍給造模用藥。于第7天造模,給藥后2 h(禁食不禁水12 h)測各組大鼠血壓值;然后眼眶取血,EDTA抗凝管抗凝,離心取血漿測血管緊張素Ⅱ、內(nèi)皮素ET含量。

    2.2大鼠血漿血管緊張素Ⅱ、內(nèi)皮素水平測定分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。

    在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40 μL,然后再加待測樣品10 μL(樣品最終稀釋度為5倍)。將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。以空白孔調(diào)零,450 nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15 min以內(nèi)進(jìn)行。以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

    3結(jié)果

    各組初始血壓(SBP、DBP)之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),說明分組均勻;造模第7、14天,與空白對照組比較,模型組血壓顯著升高(P<0.01),但在第7天,大鼠收縮壓多未升高15 mmHg以上,在第14天,大鼠收縮壓均升高15 mmHg以上,說明造模型成功,符合模型要求。給藥后,與模型組比較,大、中、小劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血壓(SBP、DBP)均顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

    表1 抗眩顆粒對內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血壓的影響(mmHg,n=12)

    注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01

    與空白對照組比較,模型組血漿ANG-2、ET水平均顯著性升高(P<0.01),說明造模型成功。與模型組比較,大、中、小劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血漿ANG-2水平均顯著降低(P<0.01或P<0.05);大、中劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血漿ET水平均明顯降低(P<0.05)。見表2。

    表2 抗眩顆粒對內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血漿ANG-2、ET水平的影響

    注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01

    4討論

    我院研制的抗眩顆粒,方中用磁石、鉤藤重在鎮(zhèn)肝潛陽,牛藤補(bǔ)益肝腎,引藥下行;川芎、丹參益氣活血,葛根清渾發(fā)散;川芎益走散,上行頭目巔頂,理氣通脈;夏枯草祛肝風(fēng),行經(jīng)絡(luò);半夏躁濕化痰,和胃上嘔,痰濕不留,眩暈?zāi)酥筟1-5]。組方以鎮(zhèn)肝潛陽為主,輔以活血通絡(luò)、化痰除濕。在先期應(yīng)用湯劑,結(jié)合臨床應(yīng)用效果,不斷調(diào)整處方的藥物組成及用量的基礎(chǔ)上,最終定下處方。經(jīng)過篩選,加工提取制成方便服用、易于吸收的顆粒制劑。為確保其制劑質(zhì)量,前期進(jìn)行了工藝標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[6]及藥理[7-8]的研究,包括抗眩顆粒對小鼠微循環(huán)的影響、抗眩顆粒的鎮(zhèn)靜作用、抗眩顆粒對大鼠血瘀模型的影響。為探討其療效原理,本文對大鼠皮下注射丙酸睪丸素,成功建立了大鼠內(nèi)分泌型高血壓模型,在造模第17、14天,大鼠血壓均顯著升高,在第14天大鼠收縮壓均升高15 mmHg以上,符合模型要求;模型組血漿ANG-2、ET水平顯著性升高。與模型組比較,大、中、小劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血壓(SBP、DBP)均顯著降低;與模型組比較,大、中劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血漿ANG-2水平均顯著降低,小劑量抗眩顆粒組可使內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血漿ANG-2水明顯著降低;大、中劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血漿ET水平均明顯降低。提示抗眩顆粒對內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型有好的改善作用。本實驗為抗眩顆粒的臨床應(yīng)用提供了依據(jù)。

    參考文獻(xiàn):

    [1]趙智強(qiáng),陸躍鳴,周仲瑛,等.天麻鉤藤飲等三方對高血壓大鼠模型降壓作用的藥效動力學(xué)研究[J].中藥藥理與臨床,1999,15(4):12-15.

    [2]郭會軍,蔣自強(qiáng),任德啟.鎮(zhèn)肝熄風(fēng)合劑對實驗性內(nèi)分泌型高血壓及血漿ANP的實驗研究[J].中醫(yī)研究,2002,15(3):16-18.

    [3]顧施建.鉤藤提取物對實驗性高血壓小鼠降壓作用的實驗研究[D].湖北:湖北中醫(yī)藥大學(xué),2010.

    [4]郭榮年,吳秀香,郭瑞珍,等.葡萄籽原花青素對腎血管性高血壓大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2012,22(23):23-26.

    [5]王桂紅,劉丹,姜金鳳,等.霉茶緩釋片對腎性高血壓大鼠血壓及活性物質(zhì)的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2009,27(3):546-548.

    [6]王希東,郝少君,李文俊,等.抗眩顆粒的制備及葛根素的含量測定[J].中國藥師,2014,17(8):1279-1261.

    [7]郝少君,王希東,李文俊,等.抗眩顆粒對小鼠自主活動及運動協(xié)調(diào)能力的影響[J].中醫(yī)學(xué)報,2014,29(2):237-238.

    [8]王希東,郝少君,李文俊,等.抗眩顆粒對小鼠腦膜微循環(huán)的影響[J].實用藥物與臨床,2015,18(6):653-656.

    Effect of anti-glare granules on the rat model of endocrine hypertension

    WANG Xi-dong,HAO Shao-jun,WANG Lin*,ZHANG Zheng-chen

    (371 Central Hospital of PLA,Xinxiang 453000,China)

    [Abstract]ObjectiveTo observe the effect of anti-glare granules on the endocrine hypertensive rat model.MethodsSeventy-two hypertensive model rats were selected and randomly divided into 6 groups according to the level of blood pressure,12 rats in each group,and they were given large,medium and small doses of anti-glare granules suspension,yangxueqingnao granule suspension,captopril suspension and the same volume of distilled water;blank control group were given the same volume of physiological saline,administered for 7 d continuously.The blood pressure of rats after 7 d and at 2 h after drug delivery was measured.ResultsCompared with model group,the blood pressure (SBP,DBP) of large,medium and small dosage of anti-glare granule groups,yangxueqingnao granule group,and captopril group were significantly decreased;compared with blank control group,the serum ANG-2 and ET levels of model group were significantly decreased (P<0.01);compared with model group,the ANG-2 levels of large,medium and small dosage of anti-glare granule groups,yangxueqingnao granule group,and captopril group were significantly decreased (P<0.01 or P<0.05),the ET levels of large and medium dosage of anti-glare granule groups,yangxueqingnao granule group,and captopril group were significantly decreased (P<0.05).ConclusionAnti-glare granules have a good improvement effect on endocrine-type hypertensive rat model.

    Key words:Anti-glare granules;Rat;Endocrine-type hypertension model;Yangxueqingnao granule;Captopril tablets

    收稿日期:2015-08-05

    基金項目:河南新鄉(xiāng)重點科技攻關(guān)(ZG14013)

    DOI:10.14053/j.cnki.ppcr.201604003

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