●鮑書友李濤
甲狀腺穿刺涂片巴氏染色經驗分享
●鮑書友1李濤2
目的:改善甲狀腺穿刺涂片巴氏染色效果。方法 在甲狀腺穿刺涂片染蘇木素之前用兩種方法處理。結果 其中第二種方法得到滿意效果。結論甲狀腺穿刺涂片染蘇木素之前經過3%冰醋酸0.1%鹽酸處理,染色效果得到很大改觀。原理 鹽酸能夠增加細胞膜的通透性,且能水解DNA,冰醋酸又是細胞核很好的固定劑,從而達到增加細胞核的染色效果。
甲狀腺穿刺涂片;巴氏染色
甲狀腺穿刺涂片在巴氏染色中常出現一種現象:細胞核染色均一淡染,甚至出現均一紅染,導致核結構模糊,染色質結構不清晰,給病理診斷帶來不少困難。經過長時間摸索與實驗驗證,我摸索出一種方法能有效提高甲狀腺穿刺涂片巴氏染色質量的方法與大家分享。
一般資料:南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院2015年-2016年間甲狀腺穿刺涂片。貝索(baso)巴氏染色液(EA36-BA4135,蘇木素染液BA-4041)
方法:穿刺涂片完成后立刻放入95%乙醇固定,以三種方法進行處理分別進行巴氏染色:第一:不做任何處理直接進行巴氏染色;第二:用3%冰醋酸0.1鹽酸水溶液處理10秒,然后進行巴氏染色。
巴氏染色操作步驟:
(1)已固定片子自來水洗2分鐘(2)蘇木素浸染3分鐘(3)自來水洗1分鐘(4)1%鹽酸酒精分化
(5)流水沖洗5分鐘藍化
(6)80%、95%酒精梯度醇化(7)橙黃G7秒
(8)95%乙醇兩道2分鐘(9)EA50浸染5分鐘
(10)95%乙醇兩道2分鐘(11)無水乙醇兩道2分鐘(12)二甲苯5分鐘兩道后(13)中性樹膠封片
第一種方法染色效果如圖1-2:細胞核染色均一沒有層次感,個別細胞細胞核出現均一紅染(細胞核應著色為藍色);。第二種方法染色效果如圖3和4:染色效果很好,細胞核邊界清晰,染色質層次分明,沒有脫片現象。
近年來甲狀腺疾病以驚人的速度增長,細胞學甲狀腺穿刺對患者來說痛苦小,花錢少,診斷明確等特點,深受臨床醫(yī)生和患者的青睞。然而甲狀腺因其解剖學特點給制作一張完美的細胞學片子帶來不少困難,如膠質多,甲狀腺上皮細胞少,穿刺出來的上皮細胞涂到片子上常為孤島狀,很容易短時間風干造成人為性退變從而導致染色不佳,給細胞學診斷帶來不少困難。
經過長時間的探索實踐,逐漸摸索出做出一張完美的甲狀腺穿刺涂片的方法,為病理診斷醫(yī)生提供了清晰的材料信息,為高質量的病理報告保駕護航。鹽酸具有增加細胞膜的通透性,從而能增加染液進入細胞內的能力增強染色效果;鹽酸還有水解DNA的作用,使DNA外側酸性集團充分暴露,更易于帶有堿性基團的蘇木素結合。但也有點問題容易造成脫片,然而混合加入冰醋酸后又有固定的作用,就避免了脫片,達到理想效果。
(作者單位:1江陰市中醫(yī)院病理科2江蘇省人民醫(yī)院病理科)
[1]王伯沄,李玉松,黃高昇,張遠強,病理學技術人民衛(wèi)生出版社,2000,P95-134
Experience of thyroid puncture smear staining
Li Tao Bao Shuyou
Objective: to improve the effect of Pap smear on the thyroid gland puncture smear. Methods three methods were used to deal with the treatment of the thyroid gland puncture and dyeing of Su lignin before and after the. Results the third methods were satisfied with the results. Conclusion the results of the dyeing effect of the 3% glacial acetic acid 0.1% hydrochloric acid were greatly improved after the treatment of the thyroid gland puncture smear with the. The principle of hydrochloric acid can increase the permeability of the cell membrane, and can be hydrolyzed DNA, acetic acid and acetic acid is a good cell nucleus, so as to increase the effect of nuclear staining.
thyroid puncture smear;PAP staining