氣相色譜法測定烘焙食品中抗氧化劑丁基羥基茴香醚（BHA）和2，6—二叔丁基對甲酚（BHT）

陶曉杰　汪浩　趙宇飛　池善女

摘要：利用冷凍過濾優(yōu)化抗氧化劑叔丁基羥基茴香醚（BHA）和2，6-二叔丁基對甲酚（BHT）的萃取條件，通過加標回收率實驗（BHA、BHT回收率均在95%以上，相對標準偏差小于0.2%）評價了方法的準確性。建立了快速、簡單、準確的檢測烘焙堅果食品中BHA和BHT的方法。實驗表明本方法具有很好的回收率和重復(fù)性，對檢測烘焙堅果食品具有很好的應(yīng)用前景。

關(guān)鍵詞：GC-FID；烘焙堅果食品；BHA；BHT

中圖分類號：R917 文獻識別碼：A 文章編號：1001-828X（2016）006-000-02

引言

食用油脂和含有食用油脂的食品在不適當?shù)谋４鏃l件下或者超過保質(zhì)期就會發(fā)生酸敗現(xiàn)象。為了避免酸敗現(xiàn)象或者延緩其發(fā)生時間，通常會加入BHA、BHT或者其他的抗氧化劑和防腐劑，然而資料表明，BHA有潛在的致癌性，BHT危險小一些，不過動物實驗也發(fā)現(xiàn)它能致癌。因此，研究食品中的BHA、BHT的檢測方法就十分重要。目前檢測BHA、BHT等抗氧化劑的方法有氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、高效液相色譜法等。利用這些方法提取烘焙堅果食品中的油脂都需要將樣品中油脂提取出來，然后再通過柱層析或者凝膠色譜方法去除掉脂肪。由于柱層析與凝膠色譜法操作繁瑣、試劑消耗大等。因此，本文用甲醇直接提取油脂中的BHA、BHT，提取液經(jīng)過冷藏靜置后過濾，減壓濃縮至近干用乙醇定容。待分析。

一、實驗部分

1.材料試劑

石油醚（30℃～60℃）、甲醇、均為分析純；BHA、BHT標樣，純度均高于99%；氮氣，純度99.999%。

2.儀器與設(shè)備

GC-2010（日本島津公司）-氫火焰離子化檢測器（FID）、振蕩器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、離心機、冰箱。

3.色譜條件

色譜柱為DB-WAX石英毛細管柱，長30m、內(nèi)徑0.25mm、膜厚0.25μm；柱溫：初始溫度為80℃，保持1min，以10℃/min升溫至230 ℃，保持8min；進樣口溫度150℃，不分流進樣，進樣量1μm。檢測器：FID 溫度250℃。載氣流量：氮氣4.38 mL/min、氫氣40mL/min、空氣400mL/min。

4.樣品處理

（1）脂肪的提取

稱取樣品50～100g（視樣品脂肪含量而定），混合均勻，置于250mL具塞錐形瓶中，加入適量石油醚浸泡試樣，震搖10min靜置2-3h后快速濾紙過濾，減壓回收溶劑殘留脂肪備用。

（2）樣品的制備

準確稱取樣品1-2g（精確至0.001g）于15 mL離心管中，用10 mL甲醇分3次萃取（三次比例為4mL、4mL、3mL），震蕩2min/次，靜置10min后吸取甲醇溶液合并于15mL離心管中（如果靜置后乳化較為嚴重，可以3000rmm離心3min），合并好的甲醇溶液置于冰箱-4℃冷凍1h后用快速定性濾紙過濾，再用約3mL甲醇沖洗濾紙上殘渣，合并甲醇溶液，減壓濃縮至近干，用乙醇定容至2.0mL，該溶液為待測溶液。

二、結(jié)果與討論

1.色譜條件的優(yōu)化

本實驗采用DB-WAX毛細管柱，以及梯度升溫的方法測定混合標樣的含量和分離情況，結(jié)果如圖1所示。圖1表明，隨著溫度的升高BHA、BHT能夠達到很好的基線分離，且峰形較好。

2.線性關(guān)系及檢出限

分別繪制BHA、BHT的標準曲線，再0.02～0.5mg/L范圍內(nèi)兩種物質(zhì)的濃度與峰面積的線性關(guān)系良好，其線性方程及相關(guān)系數(shù)見表1。以三倍的信噪比（3S/N）計算檢出限。

3.方法的回收率

取已知不含待測物的樣品，分別添加80ng和160ng的BHA和BHT標準品，每一梯度取3個樣待測，同時定容2mL經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后，按照1.3節(jié)色譜分析條件平行測定三次，計算回收率。實驗表明，BHA、BHT的平均回收率分別為95.5%、95.2%，見表2。

4.烘烤榛子仁樣品的分析檢測

實驗采用本研究的方法，對3批次實際樣品驚醒測試，結(jié)果見表3。監(jiān)測數(shù)據(jù)表明，烘烤榛子仁中BHA、BHT的含量均為0。圖2為烘烤榛子仁樣品色譜圖。

三、結(jié)論

本文采用冷凍過濾提取烘烤榛子仁中的油脂作為前處理，并用氣象色譜法對烘烤榛子仁樣品中的BHA、BHT進行了檢測。檢測結(jié)果顯示，BHA、BHT在80ng-160ng添加濃度范圍內(nèi)，回收率均大于95%，相對標準偏差均小于0.2%。該方法簡單、高效，而且其準確性和重復(fù)性較好，可用于檢測堅果食品中抗氧化劑的限度。

參考文獻：

[1]伍先紹，柳永英，賴麗瓊.液相色譜法同時快速測定植物中TBHQ、BHA/BHT探討[J].糧食與油脂，2012，25（4）：26-29.

[2]凌關(guān)庭.食品抗氧化劑及其發(fā)展（II）[J].糧食與油脂，2007，7：47-48.

[3]林海宏.高效液相色譜法快速測定食品中的抗氧化劑[J].福建輕紡，2008，7：10-13.