乙肝病毒對(duì)脂肪肝患者肝功能及血清腫瘤壞死因子-α與白細(xì)胞介素-6的影響

王玉澤，張海叢，葉立紅，劉志權(quán)，戴二黑，楊　莉

(河北省石家莊市第五醫(yī)院，河北 石家莊 050021)

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乙肝病毒對(duì)脂肪肝患者肝功能及血清腫瘤壞死因子-α與白細(xì)胞介素-6的影響

王玉澤，張海叢，葉立紅，劉志權(quán)，戴二黑，楊莉

(河北省石家莊市第五醫(yī)院，河北 石家莊 050021)

[摘要]目的探討非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者及乙型肝炎合并NAFLD患者肝功能的改變以及血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)與白細(xì)胞介素-6(IL-6)的表達(dá)水平。方法收集脂肪肝患者56例，分為NAFLD組28例，乙型肝炎合并NAFLD組28例；另選取正常體檢者28例作為正常對(duì)照組。比較各組間血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、TNF-α與IL-6水平變化，并分析其意義。結(jié)果NAFLD組及乙型肝炎合并NAFLD組的ALT、AST水平顯著高于正常對(duì)照組(P均<0.05)。NAFLD組血清TNF-α與IL-6水平均顯著高于正常對(duì)照組(P均<0.05)。乙型肝炎合并NAFLD組與正常對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論NAFLD患者受到乙肝病毒感染后，TNF-α與IL-6水平會(huì)受到影響，肝臟損傷進(jìn)一步加劇。

[關(guān)鍵詞]非酒精性脂肪肝;乙型肝炎;非酒精性脂肪肝；腫瘤壞死因子-α；白細(xì)胞介素-6

脂肪肝是一種病變主體在肝小葉，由多種疾病和原因引起的肝臟脂肪代謝紊亂，肝細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)攝取增加而氧化減少，導(dǎo)致肝細(xì)胞內(nèi)彌漫性脂肪變性為主的臨床病理綜合征。其與慢性乙型肝炎同為臨床常見疾病，相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，有18%～27%的乙型肝炎患者合并脂肪肝，兩者并存加重對(duì)肝臟的損害，使病程遷延不愈[1]。腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)是重要的致炎細(xì)胞因子，主要由巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞產(chǎn)生，以往的研究表明脂肪肝患者存在脂肪和肝臟的天然免疫功能紊亂，其內(nèi)巨噬細(xì)胞異常增多[2]，因此TNF-α和IL-6對(duì)脂肪肝形成的作用機(jī)制成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)。本研究通過分析非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者及乙型肝炎合并NAFLD患者血清中TNF-α和IL-6的水平差異，結(jié)合肝功能指標(biāo)的變化，探討乙肝病毒在患者體內(nèi)脂肪肝形成中所起的作用機(jī)制。

1臨床資料

1.1一般資料收集2013年1月—2014年12月石家莊市第五醫(yī)院收治的NAFLD患者28例為NAFLD組，乙型肝炎合并NAFLD患者28例為乙型肝炎合并NAFLD組，符合2006年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組制定的NAFLD診療指南中的標(biāo)準(zhǔn)[3]。并選擇同期健康體檢人群28例作為正常對(duì)照組。各組之間性別及年齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。所有受試者抽血前1周未服用過影響檢查的相關(guān)藥物。

1.2試劑及儀器全自動(dòng)生化分析儀(TBA120型，日本東芝)；ELISA試劑盒采購自美國(guó)R&D公司；芬蘭Thermo公司產(chǎn)MK3型全自動(dòng)酶標(biāo)儀。

表1　3組基線資料比較

1.3試驗(yàn)方法所有的受試者清晨空腹抽取靜脈血5 mL，室溫凝固，3 000 r/min離心15 min，收集血清，一部分血清使用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALT和AST，剩余血清分裝后-80 ℃保存。血清TNF-α與IL-6檢測(cè)采用ELISA法，每一步嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

2結(jié)果

2.13組血清ALT、AST水平比較NAFLD組血清ALT、AST水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；乙型肝炎合并NAFLD組血清ALT、AST水平與正常對(duì)照組相比明顯升高(P<0.05)；NAFLD組血清ALT、AST水平較乙型肝炎合并NAFLD組有所降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2　3組ALT、AST含量比較

注：①與正常對(duì)照組比較，P<0.05;②與NAFLD組比較,P<0.05。

2.23組血清TNF-α、IL-6水平比較NAFLD組TNF-α、IL-6水平均顯著高于正常對(duì)照組(P均<0.05)；乙型肝炎合并NAFLD組TNF-α、IL-6水平較NAFLD組均明顯降低(P均<0.05)；乙型肝炎合并NAFLD組TNF-α、IL-6水平與正常對(duì)照組相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表3。

表3　3組血清TNF-α、IL-6水平比較

注：①與正常對(duì)照組比較，P<0.05;②與NAFLD組比較,P<0.05。

3討論

慢性乙型病毒性肝炎和NAFLD是威脅我國(guó)人民健康的兩大主要慢性肝病，據(jù)最新統(tǒng)計(jì)，HBsAg 陽性者占我國(guó)總?cè)丝诘?.18%，而隨著人們飲食結(jié)構(gòu)和生活習(xí)慣的改變，NAFLD 在我國(guó)發(fā)達(dá)地區(qū)的患病率已高達(dá)15.35%，并呈不斷升高趨勢(shì)，導(dǎo)致 CHB 合并NAFLD 患者持續(xù)增多，發(fā)病率已達(dá)到15%[4-5]。

脂肪肝合并乙肝發(fā)病有兩種情況：第一是乙肝患者在治療休息靜養(yǎng)，突然發(fā)胖增重，引發(fā)脂肪肝，發(fā)生原因與用藥傷害到肝臟的脂肪代謝功能有關(guān)，也和過度營(yíng)養(yǎng)有關(guān)；第二是先有脂肪肝，由于脂肪肝導(dǎo)致人體免疫力和解毒功能下降，更容易感染乙肝病毒。但是脂肪肝與乙肝并存是否對(duì)脂肪肝病情進(jìn)展具有協(xié)同作用，尚無規(guī)范化的循證依據(jù)。有學(xué)者認(rèn)為肝脂肪變?cè)诩涌煲腋芜M(jìn)程的同時(shí)直接影響患者的抗病毒治療，并促進(jìn)肝臟組織病理損傷[6-7]。也有學(xué)者認(rèn)為沒有證據(jù)表明乙肝患者存在脂肪肝會(huì)促進(jìn)肝臟組織病理損傷[4]。因此，辨證探討非酒精性脂肪肝與乙肝的關(guān)系并早期識(shí)別該類患者具有現(xiàn)實(shí)意義。

肝功能檢查指標(biāo)ALT是肝功能檢查中最常用的指標(biāo)。ALT主要存在于肝細(xì)胞的細(xì)胞漿中，當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生炎癥、壞死、中毒等，造成肝細(xì)胞受損時(shí)，ALT便會(huì)首先被釋放到血液里，使血清ALT升高。因此ALT水平可以比較敏感地監(jiān)測(cè)到肝臟是否受到損害。肝功能檢查指標(biāo)AST主要存在于肝細(xì)胞的線粒體中，當(dāng)肝細(xì)胞受損嚴(yán)重時(shí)，AST才會(huì)釋放入血液中，因此，AST升高通常意味著肝細(xì)胞受損嚴(yán)重[8]。在本研究中NAFLD組和乙型肝炎合并NAFLD組ALT與正常組相比均明顯增高，說明患者組肝細(xì)胞均受到不同程度的損傷，患者組AST雖然與正常組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是并沒有超出正常值范圍，說明患者肝臟損傷不是特別嚴(yán)重，沒有引起肝細(xì)胞線粒體的大量破裂。NAFLD組和乙型肝炎合并NAFLD組ALT、AST水平相差不大，說明這2組患者的肝損傷程度差異不大。

TNF-α是細(xì)胞因子中的一種重要的遞質(zhì)，它是由免疫細(xì)胞(單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等)和某些非免疫細(xì)胞(內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等)合成、分泌的一類用于調(diào)控免疫、誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)揮功能的小分子蛋白質(zhì)[9]。適量的TNF-α可以調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體抵抗力，維持機(jī)體內(nèi)部狀態(tài)的穩(wěn)定性[10]。NAFLD患者存在脂肪組織和肝臟的天然免疫紊亂，肝臟和脂肪組織聚集了異常增多的巨噬細(xì)胞，而巨噬細(xì)胞是炎癥因子的重要來源[11]。IL-6是體內(nèi)一種重要的炎癥遞質(zhì)，其能刺激細(xì)胞生長(zhǎng)，具有促進(jìn)細(xì)胞分化和加速肝細(xì)胞急性期蛋白合成的作用，能促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)增生，并參與炎癥反應(yīng)[2]。研究發(fā)現(xiàn)，IL-6能影響胰島素受體后信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，引發(fā)胰島素抵抗，高胰島素血癥可通過阻斷線粒體脂肪酸氧化，導(dǎo)致肝臟脂肪酸聚集，促進(jìn)NAFLD的發(fā)生和發(fā)展[12]。由于肝細(xì)胞受損后，可產(chǎn)生大量的抗原免疫應(yīng)答反應(yīng)，使單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等被激活，可分泌大量TNF-α和IL-6，IL-6和TNF-α可互相滲透、互相協(xié)調(diào)，而TNF-α也通過細(xì)胞因子間的相互作用進(jìn)一步誘導(dǎo)IL-6的產(chǎn)生[13]，共同參與肝損害的形成。在本研究中，NAFLD組血清TNF-α和IL-6水平均明顯高于正常對(duì)照組，因此推斷NAFLD患者可能是由于飲食、生活習(xí)慣等原因?qū)е轮敬x紊亂，肝臟和脂肪組織聚集了大量巨噬細(xì)胞,過量產(chǎn)生和釋放TNF-α和IL-6等炎癥因子，破壞機(jī)體免疫平衡，與其他炎癥因子共同作用造成肝臟病理損傷，參與NAFLD的發(fā)生、發(fā)展。而乙型肝炎合并NAFLD患者與正常對(duì)照組比較時(shí)，血清中TNF-α與IL-6水平雖然有一定程度的升高，但是差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， 而與NAFLD患者比較血清TNF-α與IL-6水平則明顯降低。顯示乙型肝炎合并NAFLD患者的肝損傷程度雖然與NAFLD患者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是血清中TNF-α和IL-6水平與正常對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可見乙型肝炎合并NAFLD患者體內(nèi)引發(fā)脂肪肝的機(jī)制不太一樣，雖然TNF-α和IL-6在肝損傷的形成中起到一定作用，但應(yīng)該還有其他因素起作用。有研究顯示，乙肝病毒本身對(duì)乙肝患者發(fā)生脂肪變無影響，并且乙肝病毒本身不會(huì)造成肝損害[14]，但是亦有研究發(fā)現(xiàn)HBV可能通過編碼產(chǎn)生HBX蛋白誘導(dǎo)LXBct和FAS表達(dá)上調(diào)，參與HBV相關(guān)肝細(xì)胞脂肪變[15]。脂肪肝患者合并了乙肝病毒感染后，除了TNF-α與IL-6在肝臟損傷中起作用，乙肝病毒的感染應(yīng)該在肝損傷中起到一定作用，兩種因素共同引發(fā)脂肪肝的形成。

綜上所述， NAFLD患者血清TNF-α和IL-6水平明顯增高，提示機(jī)體大量產(chǎn)生和釋放TNF-α，機(jī)體免疫平衡被破壞，與其他炎癥因子共同作用造成肝臟病理損傷，其與IL-6共同參與NAFLD的發(fā)生和發(fā)展過程。而在乙型肝炎合并NAFLD患者TNF-α與IL-6水平與正常對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與NAFLD組有差異，不能說明乙肝病毒感染NAFLD患者會(huì)促進(jìn)肝臟組織的損傷，NAFLD與乙肝病毒的關(guān)系尚待進(jìn)一步研究。

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[收稿日期]2015-08-30

[中圖分類號(hào)]R575.5

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B

[文章編號(hào)]1008-8849(2016)06-0612-03

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.06.013

[基金項(xiàng)目]河北省中醫(yī)藥管理局科學(xué)技術(shù)研究計(jì)劃基金項(xiàng)目(2012166)

[通信作者]楊莉，E-mail：yangli_yl6666@126.com