缺血修飾蛋白與急性腦梗死體積的臨床研究

蘇宏圖　張春榮　石小晶　楊文軍　王帥　李霜梅

066000 河北省秦皇島市海港醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科[蘇宏圖(通信作者)　張春榮　石小晶　楊文軍　王帥　李霜梅]

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缺血修飾蛋白與急性腦梗死體積的臨床研究

蘇宏圖張春榮石小晶楊文軍王帥李霜梅

066000 河北省秦皇島市海港醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科[蘇宏圖(通信作者)張春榮石小晶楊文軍王帥李霜梅]

【摘要】目的探討急性腦梗死患者缺血修飾蛋白(IMA)水平與腦梗死體積的關(guān)系。方法選擇發(fā)病24h急性腦梗死患者116例，按照腦梗死體積分為4組，分別為0～5 cm3組(35例)；5～10 cm3組(32例)；10～15 cm3組(28例)；(15 cm3組(21例)；選取同期來本院體檢的20例健康者為對照組。運用ACB 比色法來測定血清 IMA水平。結(jié)果0～5 cm3組、5～10 cm3組、10～15 cm3組、(15 cm3組缺血修飾蛋白水平存在顯著差異(P<0.01)，急性腦梗死組血清IMA水平(除(15 cm3組)與腦梗死體積呈線性正相關(guān)(<0.01)。結(jié)論急性性腦梗死患者血清IMA水平均高于對照組，IMA可以作為腦組織缺血敏感的非特異性生化指標，并且急性腦梗死患者血清IMA水平隨腦梗死體積增加而增高?？赡茏鳛檩o助手段預測病情進展。

【關(guān)鍵詞】缺血修飾蛋白腦梗死體積腦梗死相關(guān)性

【DOI】10.3969/j.issn.1007-0478.2016.02.017

缺血修飾蛋白(ischemia modified albumin，IMA)是美國學者Bar 于上世紀90年代發(fā)現(xiàn)的一種被降解修飾的人血清白蛋白(Human Serum Albumin，HAS)，IMA是在發(fā)生缺血/再灌注時由于自由基等破壞了血清白蛋白的氨基酸序列，使白蛋白與過渡金屬的結(jié)合能力發(fā)生改變，即因缺血而產(chǎn)生與過渡金屬如鈷、銅和鎳等結(jié)合能力發(fā)生改變的白蛋白[1]。其可以在急性缺血性事件的早期診斷中作為新的生化指標，美國食品和藥物管理局(U.S. Food and Drug Administration ，F(xiàn)DA )將IMA批準為第一個心肌缺血診斷生化標志物[2-3]。目前，國內(nèi)外對IMA在缺血性腦血管病領(lǐng)域的研究相對較少，但國外研究已表明血清IMA水平與急性腦梗死患者的腦梗死體積之間存在相關(guān)性，目前這方面研究較少，本研究將運用白蛋白結(jié)合鈷試驗(Albumin Cobalt Binding test，ACB 試驗)并以比色法測定血清IMA 水平，以探討發(fā)病24 h的急性腦梗死患者血清IMA水平與腦梗死體積的相關(guān)性，以判斷血清IMA水平是否可以作為評價腦梗死病情程度的生化指標。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2011年1月～2015年1月收治的發(fā)病24 h急性腦梗死患者116例，按照腦梗死體積分為3組，分別為0～5 cm3組(35例)，5～10 cm3組(32例)，10～15 cm3組(28例)，(15 cm3組(21例)。選同期來本院體檢的20例健康者為對照組，所有入選者近2周內(nèi)未服用任何藥物。各組一般情況的構(gòu)成(表1)。1.2入選標準：所有患者均符合1955年全國第四屆全國腦血管會議修訂的診斷標準，根據(jù)臨床癥狀、體征及頭顱CT、MRI 檢查選入病例入組。各組患者在發(fā)病前均無特殊用藥史。發(fā)病時間的計算：從患者最后尚正常的時間算起，出現(xiàn)腦卒中癥狀或體征的時間。腦梗死體積是按照頭顱MRI的DWI像，按照長×寬×層面數(shù)/2(cm3)。

1.3排除標準：(1)嚴重肝腎功能衰竭者；(2)近期(半年內(nèi))有冠狀動脈血栓性疾病者；(3)發(fā)病之前1個月有重大手術(shù)或創(chuàng)傷史者；(4)慢性感染性疾病者；(5)妊娠者。

1.4IMA水平檢測

采用ACB比色法測定，取待測血清試樣200 μL，加入0.1%氯化鈷水溶液50 μ，混合后靜置10 min；然后加入1.5 g/L 二巰蘇糖醇水溶液50 μL，2 min后再加入0. 9%氯化鈉溶液1.0 mL；利用分光光度計在470 nm處測定吸光度值，空白管除不加二巰蘇糖醇外，其余步驟想通過，即可得出IMA水平且以吸光度為單位(U/mL)，IMA與反應(yīng)顯色強度呈正相關(guān)。即血清中白蛋白與鈷離子結(jié)合后剩余的游離鈷離子與有機顯色物反應(yīng)生成紅褐色產(chǎn)物，在470 nm的波長下比色，其吸光度與鈷離子水平呈正比。也就是說，ACB值越小，與鈷離子結(jié)合能力越低，IMA水平越高。單位(U/ml)定義：每mL血清中的白蛋白在470 nm波長下吸附1ug的鈷離子為1個單位。

表1　急性腦梗死組與對照組一般資料比較

1.5統(tǒng)計學處理

2結(jié)果

各組IMA水平比較(表2)。

表2　各組IMA水平比較

注：與對照組比較，▲P<0.01；與0～5 cm3組比較，▼P<0.01；與5～10 cm3組比較，△P<0.01；與 10～15 cm3組比較，*P<0.01。

急性腦梗死組血清IMA水平與腦梗死體積的相關(guān)分析(見表3)。

表3　發(fā)病24 h腦梗死血清IMA水平(U/mL)

0～5 cm3組、5～10 cm3組、10～15 cm3組，血清IMA水平與腦梗死體積呈正相關(guān)(P<0.01)；但>15 cm3組，血清IMA水平與腦梗死體積無明顯相關(guān)(P>0.01)。

3討論

1992年Bar-Or等[2]建立的ACB試驗檢測IMA水平[4]，且以吸光度為單位[2,5]，腦缺血患者血清中含有較多的修飾白蛋白(IMA)，加入同樣水平的氯化鈷溶液后由于IMA與Co2+結(jié)合的能力很低，使溶液中游離Co2+的水平較高；加入二巰蘇糖醇，其可與游離鈷發(fā)生顏色反應(yīng)，用分光光度法測定其吸光度，即可推測IMA水平。IMA與反應(yīng)顯色強度呈正相關(guān)[6]。腦組織的缺血、低氧后造成的能量代謝障礙-興奮性神經(jīng)介質(zhì)釋放-鈣離子過量內(nèi)流-自由基反應(yīng)-細胞死亡等缺血性連鎖反應(yīng)，而HAS易受羥基自由基的損害[7]，使N末端序列的2～4個氨基酸發(fā)生乙?；蛉笔?～2個氨基酸[8-9]，從而形成IMA。2006年Abboud等[10]首先進行了IMA水平與急性腦血管病的相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死、腦出血患者IMA水平顯著高于短暫性腦缺血發(fā)作(Transient Ischemic Attack，TIA)組，且腦梗死組患者24 h內(nèi)IMA水平逐漸升高。同時，Abboud 還推測血清IMA水平與腦梗死患者病灶大小及神經(jīng)功能缺損程度呈正相關(guān)。2011年國內(nèi)唐曉斌等[11]也做了急性腦血管病24 h缺血修飾蛋白變化觀察，結(jié)果提示急性腦梗死與急性腦出血患者在發(fā)病6、12 h的血清IMA水平存在顯著差異，IMA可以作為缺血腦組織敏感的非特異性生化指標。2010年陳家強等[12]研究發(fā)現(xiàn)，所有急性腦梗死患者的梗死體積與IMA和IL-6水平有密切關(guān)系，IMA和IL-6水平能反映腦梗死體積，對臨床評估缺血性腦卒中腦組織的損害程度有一定意義。本研究結(jié)果顯示發(fā)病24 h急性腦梗死患者血清IMA水平與梗死體積呈正相關(guān)，IMA可作為一種評價急性腦梗死病情輕重的重要指標，能夠客觀反映患者病情輕重情況，從而為早期診斷、治療提供依據(jù)。

有研究報道神經(jīng)功能缺損程度與多種因素等有關(guān)，而且梗死病灶部位的不同，臨床神經(jīng)功能損害程度相差較多。對于神經(jīng)纖維密集的部位，小的梗死灶可造成嚴重的神經(jīng)功能損害，而在神經(jīng)纖維比較稀疏的部位，大梗死灶可能產(chǎn)生相對比較輕的臨床神經(jīng)功能缺損。本研究的腦梗死體積的計算包括多發(fā)急性腦梗死，體積是每一處梗死體積之和，可能對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響，導致本研究>15 cm3組中的IMA水平與梗死體積無明顯相關(guān)的可能。因此，關(guān)于IMA水平與腦梗死嚴重程度之間的關(guān)系比較復雜，還有待進一步的研究。

參考文獻

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(2015-10-19收稿)

【中圖分類號】R743

【文獻標識碼】A

【文章編號】1007-0478(2016)02-0132-03